玉米茎尖培养研究(I) --胚状体和丛生芽发生的扫描电镜观察

扫描电镜观察结果显示,所用六个基因型的玉米茎尖分生组织在添加500mg/L水解溶蛋白和9.0～13.5μmol/L6～BA的改良MS培养基上培养四周,茎尖可产生由腋芽和不定芽组成的密集的丛生芽.在含有4.5μmol/L 6～BA和1.0～2.0μmoL/L 2.4-D的培养基上,茎尖分生组织产生"层状"伸展的愈伤组织.将愈伤组织转移到发育培养基上,愈伤组织表面可观察到大量的胚状体出现,胚状体继续发育成丛生芽.激素浓度和种类不同明显影响茎尖产生胚状体和丛生芽的数量,基因型不同的茎尖,其产生胚状体或丛生芽的能力也呈现出明显的差异.     

玉米茎尖培养再生体系的建立

不同基因型的玉米茎尖分生组织在添加不同浓度6-BA(6-苄基嘌呤)的MS培养基上,经过4周愈伤组织诱导培养和4周芽发育培养,获得高频率的丛生芽和再生植株,芽尖倍增数可达3~8芽/茎尖.通过比较试验,确立了诱导丛生芽发生的适宜培养条件和程序,反映了不同基因型的茎尖形成愈伤组织和再生植株的能力不同,从而初步建立了利用玉米茎尖分生组织再生植株的培养体系.     

玉米茎尖培养研究(Ⅱ)--体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以玉米茎尖分生组织为外植体，在离体培养条件下诱导体细胞胚胎(胚状体)发生。组织细胞学观察表明，玉米茎尖分生组织在离体培养条件下可直接产生胚性愈伤组织，后者在继代培养中发生胚状体。多数胚状体起源于愈伤组织的表层细胞和表层之下的几层细胞，少数产生于愈伤组织的较深层。胚状体发生于单细胞，发育过程与合子胚大致相似。多数胚状体发育正常，具有一个芽端和一个胚根端。少数胚状体形成具多个芽端而共用一个胚根端的次生连体胚。胚状体发生不同步。胚状体只有在分化培养基上才能发育成熟。     

玛丽安万年青的茎尖培养与快速繁殖

以玛丽这万年青（Ｄｉｅｆｆｅｎｂａｃｈｉｓ Ｔｒｏｐｉｃ Ｍａｒｉｎｎｅ）的顶芽或侧芽茎尖作外植体,通过二次表面灭菌,得到茎尖无菌培养物。根据茎尖愈伤组织诱导率和生长速度２项指标,筛选出码丽安万年青茎尖离体培养的培养基。ＭＳ＋ＢＡ４．０ｎｇ／Ｌ的固体培养基适宜于诱导茎尖形成愈伤组织和愈伤组织生长。愈伤组织转入ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ的固体培养基分化形成丛生芽,从愈伤组织上切取１ｃｍ以上的牙转入ＭＳ     

菊花的组织培养研究

以菊花侧芽茎尖做外植体，通过二次表面灭菌，得到茎尖无菌培养物．根据长出丛生芽的芽数的多少，筛选出适合菊花茎尖离体培养的培养基．MS＋6-BA5．0mg／L＋NAA0．01mg/L的固体培养基适宜于诱导侧芽生长出丛生芽；丛生芽转入到MS＋6-BA3．0mg/L＋NAA0．01mg／L培养基上进行继代培养扩大增殖：取长2～3cm的芽苗在1／2MS＋NAA0．1mg/L培养基上生根并形成完整植株．     

垂柳的组织培养及植株再生体系研究

对垂柳愈伤组织和植株再生体系进行了研究,结果显示茎段比较适合诱导愈伤组织,质量浓度为1.0mg/L和2.0mg/L的6-BA均能诱导垂柳茎段愈伤组织;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.5 mg/L的激素配比最为适合胚状体和芽的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+Ac 0.3%培养基能促使垂柳根的形成,且能促使芽生长,最终形成幼苗。     

红叶李组织培养快繁技术

通过培养红叶李的不同外植体，建立适宜的组织培养条件和快繁技术，为红叶李的组培繁殖提供技术参考。采用MS为基本培养基，添加不同浓度的激素，以茎尖、腋芽、茎段和叶片作为外植体进行培养。结果表明：茎尖和腋芽既能诱导芽的生长又能诱导愈伤组织，且诱导效果较好，而茎段仅能诱导产生愈伤组织，叶片的诱导效果不明显。BA1．0mg／L 2，4-D0．5～2．0mg／L组合的诱导效果最佳，单芽在BA1．0mg／L IBA0．5～2．0mg／L培养基中继代培养都能诱导产生丛芽，诱导率达70％。     

陆地棉基因转移技术研究初报

应用农杆菌菌株Ａｔ４４０４携带抗卡那霉素基因（氨基葡萄糖磷酸转移酶）、Ｇｕｓ基因（葡萄糖苷酸酶）以及Ｂ．Ｔ毒蛋白基因，对陆地棉４个不同栽培品种鲁棉６号、鲁棉１０２４、中棉１２、中棉１９的无菌苗下胚轴和茎尖分生组织区作基因导入的研究，获得转基因的棉花试管苗．在以胚轴作为转化体系的培养过程中，只有鲁棉６号经过了愈伤组织发生、胚状体形成及植株再生途径．若以３～５ｄ的无菌苗芽顶端分生组织作为转化体系，经转化的茎尖分生组织培养在无激素或低浓度激素的ＭＳ培养基上，则可较容易地从多个品种中获得转基因的再生植株．以此方法进行基因转移，时间短、方法简便、不受品种来源及基因型的限制．这一技术将有利于提高棉花转基因植株的成活率     

裂叶秋海棠的离体快速繁殖

利用野生裂叶秋海棠叶片及叶柄培养，通过两种方式获得大量再生植株。(1)直接从外植体表面诱导出不定芽，最佳诱导培养基为MS 6-BA 3mg／L，不定芽在培养基MS NAA0．5mg／L 6-BA0．5mg／L增殖成丛生芽．(2)先诱导出愈伤组织，再由愈伤组织分化出大量不定芽．最佳愈伤组织诱导培养基为MS NAA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L 6-BA0．5mg／L,愈伤组织不定芽分化培养基为MS 6-BA 1mg／L,试管苗在含1／5MS无机盐的培养基上生根，之后移栽成活率达85％。     

糯米藤的离体快繁系统的建立

对糯米藤（Memorialis hirta BL.Wedd.）进行了离体快繁研究。叶片和茎段在附加NAA0．5mg/L＋KT1．0mg/L或NAA0．5mg/L 6-BA 1.0mg/L的MS培养基上，诱导形成愈伤组织后再分化形成植株；腋芽在附加NAA0．1mg/L KT1.0mg/L或NAA0.1mg/L 6-BA1.0mg/L或IAA0.1mg/L 6-BA 1.0mg/L的MS培养基上诱导出丛生芽，并再生成植株。     

甘薯茎尖培养

报道了甘薯茎尖培养的实验工作,证明在MS附加IAA mg/L+BA 0.1mg/L+GA_3 0.05mg/L的条件下能促进茎尖生长,但基部形成愈伤组织,因此必须适时转入无激素的MS培养基上,停止愈伤组织的继续生长,以加速成苗过程,成苗度可达80％左右。甘薯的基因型显著影响培养茎尖的成苗率,脱毒植株进行单节茎段微型快速繁殖,每月繁殖系数为4～5。     

真盐生植物盐地碱蓬茎尖组织培养和植株再生

以盐地碱蓬茎尖为外植体,探讨了不同激素浓度配比对植株再生的影响．结果表明,以盐地碱蓬茎尖为外植体,在附加1．0mg/L6-BA和0．5mg／L IAA的MS培养基上培养30天可诱导出不定芽,不定芽的诱导频率达到100％以上,每个外植体的平均出芽数达到3．63,60天后形成丛生芽．不定芽转至MS培养基中培养10天生根形成完整植株．本文建立了真盐生植物盐地碱蓬高效的再生体系,为遗传转化体系的创建奠定了基础．     

常夏石竹的组织培养与快速繁殖

用常夏石竹的茎尖作为外植体进行培养,成功地建立了常夏石竹的快速繁殖程序。常夏石的茎尖接种在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L的培养基上能够形成绿色愈伤组织;把带芽点的愈伤组织转移至培养基:MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mgL上继代效果较好;不定芽在MS+IBA0.3mg/L+0.5％活性碳的培养基上易生根。     

西红花球茎组织培养的研究

以球茎切块为外植体，MS为基本培养基，0．5mg·L^-1 6-BA和2mg·L^-1 2，4-D为激素，在（20±2）℃，黑暗环境下培养，可以获得98％的愈伤组织诱导率．愈伤转入MS＋5．0mg·L^-1 6-BA＋5．0mg·L^-1 NAA培养基中，可诱导丛生芽的产生，将丛生芽切成单个不定芽后转移到MS＋4．0mg·L^-1 6-BA＋0．5mg·L^-1 NAA的培养基中，光照条件下可诱导新生小球茎的产生．     

植物生长调节剂对五鹤续断组织培养的影响

通过不同植物生长调节剂的组合和配比,对五鹤续断茎尖、幼嫩茎段和叶进行愈伤组织的诱导、丛生芽分化和增值及生根培养,确定了五鹤续断组织培养的最佳培养基为:(1)初代培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA0.1mg/L;(2)丛生芽培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.6 mg/L;(3)生根培养基为1/2MS+IBA 0.4 mg/L+PP3330.4mg/L.     

甘蓝型油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代的快繁生根及愈伤组织诱导

利用油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代种子，在附加各种不同激素浓度组合的MS培养基上访导丛生芽、生根及愈伤组织诱导，结果表明：在MS培养基中添加1．0mg/L6—BA_0.1mg/L NAA对诱导丛生芽有较好的效果，l／2MS培养基对小芽生根效果最好，在MS培养基中添加0．5mg/L 8-BA 0.1mg/L NAA 0.25mg/L GA3 0.1mg/L 2,4-D对诱导愈伤组织效果最好．     

大叶冬青叶外植体的愈伤组织诱导与不定芽苗再生

将离体培养的大叶冬青幼叶外植体在含有TDZ(噻吩隆,浓度0．1～5．0μmol／L)与IAA(浓度0．1～5．0μmol／L)的wPM培养基上培养,能够产生愈伤组织。当TDZ浓度不变时,5．0μmol／LIAA处理产生的愈伤组织块直径最大;愈伤组织块转培到含有不同浓度TDZ与IAA的WPM培养基上,在5．0μmol／LTDZ 3．0μmol／LIAA的培养基上出现较多不定芽苗(每一愈伤组织块平均产生11．2株);几种细胞分裂素作用比较研究表明：在BA、TDZ与ZT(均为15．0μmol／L)处理中,较好的芽苗增殖系数分别为3．7,6．0和7．4,BA与2-ip(均为3．0μmol／L)处理时芽苗高生长可达34mm和45mm。     

甘薯品种“白星”体细胞胚的诱导

将甘薯品种“白星”带2个叶原基的茎尖接种于含5μmol/L 2,4-D的修改的MS培养基上能诱导出胚性俞伤组织;胚性愈伤组织在不含生长素类的修改的MS培养基上进一步发育成子叶胚;子叶胚在1/2MS培养基上能发育成试管植株.     

正交设计在驱蚊草组织培养中的应用

以驱蚊草茎、叶为外植体,筛选诱导愈伤组织、丛生芽增殖及生根的最佳培养基.结果表明:MS 6-BA0.1 mg/L NAA0.1mg/L 2,4-D0.1 mg/L AgNO31.0mg/L对愈伤组织的诱导效果最好;MS 6-BA0.2 mg/L NAA0.1mg/L AgNO31.0mg/L为丛生芽增殖的最佳培养基;1/2MS NAA0.3mg/L AgNO31.0mg/L生根效果最好.     

麦瓶草的茎尖敏殖

本文以麦瓶草（Si1ene；jeniss nisWi11d)茎尖为外值体，在培养基MS＋6BA0．5中诱导形成大量丛生芽，在培养基MS＋2．4－D0．1，或MS＋NAA0．5中芽生出根，并且栽成活。