牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277菌株外切聚磷酸酶的表达、纯化和结晶

外切聚磷酸酶(exopolyphosphatase,PPX)对于细菌在恶劣环境下引起的严紧反应、病原菌的致病性和抗生素耐药性等生物学过程必不可少。牙龈卟啉单胞菌是与牙周炎关系最密切的病原菌。为解析牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)ATCC 33277菌株的外切聚磷酸酶(PgPPX)的结构,首先利用大肠杆菌对PgPPX蛋白基因进行克隆与蛋白表达,然后依靠谷胱甘肽巯基转移酶标签对融合蛋白亲和层析后,采用阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱得到表面电荷、聚合形态均一的PgPPX蛋白,最后对纯化后的目的蛋白进行结晶条件筛选。结果表明:PgPPX蛋白在溶液中表现为二聚体形式,纯度大于98%,表达量高达30 mg/L,且该蛋白在0.2 mol/L MgSO_4·6 H_2O、20%PEG3350(m/V)条件下获得的晶体形状较好。     

MAPKAPK2表达水平在非小细胞肺癌预后中的评估价值分析

目的:探讨致癌基因促分裂原活化蛋白激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2)的表达水平在非小细胞肺癌(NSCLC)预后中的评估价值.方法:采用免疫组化方法检测200例NSCLC组织中MAPKAPK2基因的蛋白表达量,采用Log-rank检验和COX回归分析MAPKAPK2表达与NSCLC预后的关联,并用时间依赖的ROC曲线探讨其预测价值.结果:NSCLC患者中位生存期随MAPKAPK2表达分级而显著缩短(低∶中∶高:22个月∶15个月∶8个月;Log-rank检验P=2.51×10-6);MAPKAPK2高表达组患者较低表达患者死亡率增加(HR=3.02,95%CI=1.86-4.92).NSCLC五年生存率下,MAPKAPK2表达的ROC曲线下面积值可达0.711.结论:MAPKAPK2高表达可增加肺癌患者的死亡风险,对NSCLC患者的预后具有较好的预测价值.     

口腔正畸治疗中RGp检出率变化及对牙龈炎发生的影响

目的探讨口腔正畸治疗中牙龈蛋白酶R(RGp)检出率变化及对牙龈炎发生的影响.方法选取接受正畸治疗的患者72例,分别于矫治器戴入前、后60 d取牙龈沟液为研究样本,采用16S r DNA PCR检测样本中牙龈卟啉单胞菌(P.g),取P.g阳性标本进一步检测RGp;同时用牙周探针检测牙龈指数,分析P.g,RGp的检出率与牙龈指数的相关性.结果矫治器戴入后60 d时,P.g,RGp检出率均明显高于戴入前,差异具有统计学意义(P0.05);RGp与P.g检出率之间呈明显正相关,矫治器戴入后60 d牙龈指数Ⅰ级的P.g检出率明显高于戴入前牙龈指数0级的P.g检出率,差异具有显著统计学意义(P0.01);戴入后牙龈指数Ⅰ级的P.g检出率明显高于0级的P.g检出率,差异具有统计学意义(P0.05).P.g阳性患者中,戴入后60 d牙龈指数Ⅰ级的RGp检出率明显高于戴入前牙龈指数0级的RGp检出率,差异具有显著统计学意义(P0.01);戴入后牙龈指数Ⅰ级的RGp检出率明显高于0级的RGp检出率,差异具有统计学意义(P0.05).RGp,P.g检出率与牙龈指数分级之间呈明显正相关.结论 P.g感染和RGp水平提高会引发口腔正畸治疗中牙龈炎性反应,应在矫治器戴入后给予干预性治疗.     

卟啉试剂在分析化学中的应用

从卟啉与金属离子的作用机理出发,讨论了卟啉类试剂在光度分析、电分析以及HPLC中的应用     

β—淀粉酶基因在黄单胞菌中的克隆及表达

广泛寄主范围载体ｐＫＴ２１０可在辅助质粒ｐＲＫ２０１３的协助下转移进入黄单胞菌（革兰氏阴性）中并能稳定存在；来源于枯草杆菌的β－淀粉酶基因与载体ｐＫＴ２１０形成重组质粒ｐＹＬ１，并以其转化大肠杆菌；通过三亲本接合将ｐＹＬ１引入带有利福平抗性的黄单胞菌ＮＫ－０１－Ｒ中，通过抗性选择接合子，并测定接合子的淀粉酶水解能力及产胶能力。本文获得一株黄原胶产量比出发菌株提高２０％，且淀粉酶水解能力显著提高的工     

卟啉试剂在动力学分析法中的应用

介绍了近十多年来国内对卟啉试剂在动力学分析法中的研究和应用概况.并分三部分进行综述,即一般动力学法、流动注射法和模拟酶法.共引参考文献30篇.     

β－淀粉酶基因在黄单胞菌中的克隆及表达

广泛寄主范围载体ｐＫＴ２１０可在辅助质粒ｐＲＫ２０１３的协助下转移进入黄单胞菌（革兰氏阴性）中并能稳定存在；来源于枯草杆菌的β－淀粉酶基因与载体ｐＫＴ２１０形成重组质粒ｐＹＬ１，并以其转化大肠杆菌；通过三亲本接合将ｐＹＬ１引入带有利福平抗性的黄单胞菌ＮＫ０１－Ｒ中，通过抗性选择接合子，并测定接合子的淀粉酶水解能力及产胶能力．本文获得一株黄原胶产量比出发菌株提高２０％，且淀粉酶水解能力显著提高的工程菌株．     

miR-140-3p在侵袭性念珠菌感染患者中的诊断意义及预后价值

目的:探究miR-140-3p在侵袭性念珠菌感染(ICI)患者中的诊断价值和预后中的作用.方法:选择2021年1月至2021年6月在广东同江医院确诊治疗的60例侵袭性念珠菌感染患者作为本次研究实验组,另收集同期在该院进行体检的正常人50例作为本次对照组.收集两组人群血清,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检...     

基于最大最小爬山算法的肺癌预后模型

利用最大最小爬山算法构建肺癌患者的预后模型,指导肺癌预后评价。以SEER(surveillance, epidemiology, and end results)数据库中2008年至2014年期间被确诊为肺癌的患者组成数据集,首先利用卡方检验、Logistic回归分析方法对数据集中的变量进行特征选择;然后,在训练集上利用最大最小爬山算法建立肺癌患者的预后模型,并在测试集上对患者进行5年后生存情况预测;最后,选择Logistic回归、人工神经网络、决策树、支持向量机方法和本研究模型在测试集上进行分类实验对比。最终结果显示本研究模型对肺癌患者5年后生存情况的预测准确率高于其他方法。     

卵黄抗体在防治中华鳖气单胞菌病中的应用

探讨了卵黄特异性抗体在防治中华鳖气单胞菌病中的应用 .产蛋鸡经嗜水气单胞菌免疫后 ,产生了高效价的卵黄抗体 ;冻干过程中抗体活性基本没有损失 ;体外抑菌试验表明 ,该特异性抗体具有较强抑制嗜水气单胞菌的效果 ;鳖场被动免疫防治试验证明 ,该抗嗜水气单胞菌卵黄抗体对中华鳖气单胞菌病具有良好的防治效果 .     

运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

以总DNA为模板，采用PCR技术克隆得到运动发酵单胞菌(Zymamonas mobilis）丙酮酸脱羧酶(pyru—Vate decarboxylase)基因pdc，将该基因连接到表达裁体pSE380上，得到重组质粒PSE—pdc,将此重组质粒转化到受体菌E．coliDH5α中，挑取重组菌株．经IPTG诱导后，在乙醛指示平板检测到丙酮酸脱羧酶活性．SDS—PAGE电泳结果显示出明显的特异性蛋白质条带：其分子量约为60KD．     

老年与青年肺癌的临床特征及预后比较

目的:为了解老年与青年肺癌的临床特征及预后的差异。方法:回顾性收集近7年来在我院肿瘤科经病理学证实的住院肺癌患者,其中符合条件的老年(≥70岁)组188例,青年(≤40岁)组68例,对患者的年龄、性别、组织分类、临床症状、治疗经过及预后等指标进行比较。结果:(1)老年组中女性患者的比例较青年组低,鳞癌类型较高;(2)老年组中胸痛症状的比例较青年组低,而阻塞性肺炎或肺不张等合并症多见;(3)老年组中远处转移较多见,临床分期较晚;(4)老年组接受综合治疗方案比例与青年组相仿。结论:老年人肺癌相比于青年人肺癌,以男性、鳞癌比例较高,合并症、远处转移更多见,易误诊和漏诊,分期较晚,预后较差。早期诊断、积极治疗能提高老年人肺癌的生存期。     

系列羟基苯基卟啉在碱体系中的性质

利用紫外-可见光谱、拉曼和红外光谱研究系列羟基苯基卟啉在碱体系中的性质.结果表明,碱与羟基苯基卟啉周边的羟基发生反应形成盐,而与卟啉中心环上的H没有相互作用,说明羟基苯基卟啉分子的中心环比较稳定,电荷主要分布在周边meso-位的取代基上,该位置易发生反应.     

金属卟啉在医学和催化中的应用Ⅰ．卟啉配体的合成与方法改良

用改良的Ａｄｌｅｒ－ｌｏｎｇＯ方法合成了若干卟啉配体，得到铰高的收率，所合成的卟啉及所得产率分别为（１）ＴＰＰ２７．３％；（２）Ｔ（３，４，５－３ＭｅＯ－Ｐ）Ｐ３０．４％，（３）Ｔ（４—Ｍｅ—Ｐ）Ｐ２３．９％，（４）Ｔ（３，５—２Ｍｅ）Ｐ２２％；（５）Ｔ（４－Ｃｌ－Ｐ）Ｐ２９．８％，合成反应在低于丙酸的回流温度下进行．     

PCNA和Bcl-2蛋白在牙龈组织中的表达

给实验动物狗分别行金合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金全冠修复，建立实验动物模型．采用ICP-MS（电感耦合等离子体质谱仪）检测戴冠前后牙龈组织中金属离子的质量分数，同时应用免疫组化EnVision二步法检测PCNA（增殖细胞核抗原）、Bcl-2（B细胞白血病脯巴瘤基因2）蛋白在牙龈组织中的表达．结果表明，镍铬合金全冠戴用后，牙龈组织PCNA，Bcl-2蛋白表达明显，而金合金全冠戴用后表达不明显．FENA蛋白表达率与Ni，Cr，S及Be离子质量分数正相关，而Bcl-2蛋白表达率与离子质量分数无明显的相关性．     

C-met和COX-2在非小细胞肺癌中的表达与临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中C-met和COX-2表达及其临床意义。方法收集2010年1月至2012年6月存档的NSCLC石蜡标本60例肺癌组织和20例相对应癌旁正常肺组织。采用免疫组化方法分别检测肺癌组织及癌旁正常肺组织中C-met和COX-2的表达情况。结果 C-met和COX-2在NSCLC中的表达显著高于癌旁正常组织;C-met和COX-2在NSCLC中的过表达和病理类型、有无淋巴结结转移以及TNM分期有密切相关性;C-met还与病理分级相关;C-met和COX-2两者在NSCLC中的表达呈正相关性。结论 C-met和COX-2可能在NSCLC的发生、发展过程中起了重要的作用,C-met和COX-2可能成为肺癌早期诊断、预后评估的生物标志物。两者的显著相关性提示C-met和COX-2两者在NSCLC的发生、发展中存在相互作用,为探讨非小细胞肺癌发病机制以及探寻非小细胞肺癌治疗新途径提供实验依据。     

原卟啉在碳酸盐溶液中的一个灵敏极谱波及其分析应用

报道了原卟啉在碳酸盐溶液中的单扫描极谱行为及其分析应用.在NaHCO3-Na2CO3(pH=9.6)的缓冲溶液中原卟啉于-1.06V(vs.SCE)产生一灵敏还原波,该波一阶导数波波高与原卟啉浓度在3.6×10-7～5.3×10-5 mol/L范围内有线性关系(r=0.998),检出限为8.9×10-8mol/ L.1.78×10-5 mol/ L的原卟啉溶液平行测定11次,RSD为0.76 %.极谱波的波高在室温条件下至少稳定3 h. 讨论了测定中干扰物质的影响及机理包括循环伏安图、电位扫描速度、表面活性剂的影响和电毛细管曲线.结果较之文献,扩大了线性范围,降低了检测下限,且方法简便快捷.