牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分离和cry基因鉴定

对牡丹江火山口原始森林苏云金芽孢杆菌的分布与基因多样性进行研究.采集91份土壤样品,利用温度筛选法从中分离出40株苏云金芽胞杆菌并对其进行光学显微观察,晶体形态为球形和菱形.PCR-RFLP鉴定结果表明:该地区的苏云金芽胞杆菌含有cry1,cry2,cry4,cry8,cry9,cry18,cry26,cry28,cry35基因,含cry8基因的菌株最丰富;苏云金芽孢杆菌在火山口原始森林的分布具有良好的多样性.     

苏云金杆菌NU-1之6种培养基发酵的对比

目的提高苏云金杆菌NU-1制剂的毒力。方法通过苏云金杆菌NU-1在6种培养基中发酵,研究其菌体生长、pH值变化、芽孢形成、伴孢晶体率、发酵周期等。并对其晶体蛋白进行了提纯和测定。结果5号培养基产量最高,30℃发酵40h时菌数可达80.4×108个/mL,伴孢晶体率大于90%,晶体蛋白浓度达6.312mg/mL。结论用5号培养基作的制剂毒力最强。     

利用味精废水生产苏云金芽孢杆菌生物农药Ⅱ：苏云金芽孢杆菌的菌种筛选及发酵优化

利用味精废水生产苏云金芽孢杆菌生物农药。首先将废水作为筛选培养基,对18株苏云金芽孢杆菌进行初筛和复筛后,确定菌株WB5为适合该废水生长的菌株。在此基础上,通过正交实验,确定了添加到废水中的营养物组分（％）：玉米淀粉3,蛋白胨1,豆粕3。发酵条件优化结果表明：培养基初始pH为8．0,发酵温度30℃、200rpm摇床培养50h。     

从土壤分离苏芸金芽孢杆菌

从120个土壤样品检测了11790株芽孢杆菌,其中有81株是产生伴孢晶体的苏芸金芽孢杆菌。它们在生长和对昆虫的致病力上,彼此存在明显差异。从中筛选出了毒力较强的苏芸金芽孢杆菌菌株,从而认为从土壤中分离苏芸金芽孢杆菌有效菌株,是一条新的途径。     

球形芽孢杆菌BS—1012产毒部位的研究

本文对球形芽孢杆菌 Bacillus Sphaericus BS—1012菌株的产毒部位进行了研究。结果表明:BS—1012菌株的伴孢晶体和芽孢对蚊幼虫具较高的毒力。营养体对蚊幼虫也有毒力,毒力强度低于芽孢和伴孢晶体。本文发现营养体在裂殖生长过程中能够产生并分泌到胞外的外毒素,这对于大规模生产时选用合适的剂型具有理论指导意义。     

对棉铃虫高效的2个Bt新菌株及其特性的研究

本文对从浙江者土壤中分离并经初筛的２个苏云金芽孢杆菌菌株进行了生物测定、晶体特性及生化特征的研究。生测结果表明，２个Ｂｔ菌株对棉铃虫具有很高的毒效，４８ｈ的校正死亡率高达９６－９８％，ＬＤ５０（半致死剂量（范围约为６．０－７．０μｇ晶体蛋白。扫描电镜观察表明，２个菌均有萎形和方形２处伴孢晶体。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱显示它们均有１３５ＫＤａ和６５ＫＤａ２条主带。生化测定结果推断９５０８和９５１１菌株分     

苏云金杆菌对主要大曲害虫的毒杀效果研究

苏云金杆菌是一种广泛应用的生物农药,苏云金杆菌在形成芽孢的同时,产生具有毒杀性的伴孢晶体.研究表明:利用液体发酵方法培养苏云金杆菌,最佳的发酵周期为2天;最佳毒杀剂量为日照条件下2.0×109个芽孢/克,非日照条件下3.2×109个芽孢/克;最佳毒杀温度为30℃,其毒杀效果在日照条件下为46%,非日照条件下为86%.     

BT——37杀虫菌的初步研究

从山西省娘子关瀑布附近的土壤中分离到一株产晶体的芽孢杆菌,具有苏芸金杆菌(Bacillus thuringiensis)的典型特征,编号为 BT——37。该菌伴孢晶体呈园菱形、颗粒状等多种形态。一个芽孢产生一个大晶体的同时,往往又脱落一个或2～3个小晶体。室内生测表明,发酵液对蚁蚕半小时死亡率为82%,2小时达96～100%。稀释4800倍,24小时死亡率97%;对杨树毒蛾、菜青虫有较高毒力;对棉铃虫、粘虫也有一定毒杀作用;对孑孓无效,不影响草蛉幼虫的发育。是一种较有前途的防止鳞翅目害虫的新菌株。本文对 BT——37杀虫菌的生产性能作了考察,提出了以胞外蛋白酶活性作为选择高毒力发酵物培养基的生化参考指标。并对通过改变培养和生产条件以及使用方法提高工业菌剂的毒力,作了初步探索,取得了良好的田间效果。     

酶化苏云金芽孢杆菌固态发酵培养基研究

在生物农药生产过程中，粉碎能耗占据了生产成本的10％以上。采用纤维素酶对苏云金芽孢杆菌固体发酵的培养基进行前处理，得到一种易粉碎的培养基，用该培养基发酵所得产品后处理能耗明显降低，且和原培养基发酵产品的效价相当，证明纤维素酶的加入没有影响菌种的生长。     

解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶培养基组成的优化

从甜酒曲中分离筛选得到1株解淀粉芽孢杆菌菌株GSBa-1,为了提高该菌株液态发酵产凝乳酶的能力,采用单因素实验和响应面法优化其产酶培养基组成。通过单因素实验分析了碳源、氮源、金属盐、磷源对菌株GSBa-1产凝乳酶的影响,并采用响应面法对产酶培养基中麦芽糖、蛋白胨和酵母浸粉含量3个主要因素的优化组合进行了定量研究,确定解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶的优化培养基组成为:麦芽糖1.93g/L、蛋白胨10.89g/L、酵母浸粉2.15g/L。在此优化培养基培养条件下,该菌株产凝乳酶活力可达(562.57±7.67)Su/mL,接近理论预测值537.10Su/mL,且平均误差为4.53%。优化后解淀粉芽孢杆菌GSBa-1产凝乳酶活力比基础培养基提高了1.88倍。     

苏云金芽孢杆菌LSZ9408伴孢晶体的形态特征研究

本文通过对虫体复壮前后BtLSZ9408菌株伴孢晶体的形态结构观察、杀虫毒力测定，发现BtLZS9408伴孢晶体以菱形结构为主（比例〉85％），其余为正方形结构（比例占3％）、不规则结构（比例〈12％）；虫体复壮后菌株伴孢晶体中菱形结构比例提高、不规则结构比例下降，菱形晶体平均轴长增大，杀虫毒力显著提高。     

苏云金芽孢杆菌MS7培养条件的优化

通过单因子试验对苏云金芽孢杆菌MS7菌株的培养条件进行优化．研究表明,该菌株的最佳培养基组成和发酵条件为：蔗糖10．0g／L、牛肉膏10．0g／L、K2HPO42．0g／L,初始发酵pH7．0,装液量25mL,培养温度35℃,培养时间36h,优化后细菌总数可达1．2×10^8CFU／mL．     

原生质体融合技术及其在苏云金芽孢杆菌中的应用

原生质体融合技术获得的长足进展使其成为一种有效的重组技术并在苏云金芽孢杆菌上得到了广泛应用.本文从PEG诱导融合、电场诱导融合、激光诱导融合和螯合剂诱导融合等方面阐述了原生质体融合技术的进展,并从种内融合、种间融合和远缘融合三个角度列举了它在苏云金芽孢杆菌广谱多功能生态工程菌构建中的应用.     

苏云金芽孢杆菌在固态和液态基质中的生长差别研究

在同等条件下,采用同一培养基的固态和液态两种环境,对苏云金芽孢杆菌中国标准品(BtCS3ab-1991)的发酵质量进行了比较研究.结果表明:固态发酵培养的Bt芽孢平均长度0.028mm,液态发酵平均为0.017mm,含菌量在28h分别为0.88×1010个/l和0.54×1010个/l.发酵过程中菌体浓度在生长曲线上表现为固态发酵高于液态,缩短发酵时间2h,且接种量对固态发酵的影响也较小.而在虫害研究方面,取食含固态药液菜叶的小菜蛾羽化率较液体降低10%,死亡率差异显著.     

苏云金芽孢杆菌与平沙绿僵菌混配对卷叶虫的防治研究

利用苏云金芽孢杆菌杀虫剂与平沙绿僵菌混配防治园林害虫卷叶虫.结果表明:在温度32℃、相对湿度70%～73%条件下,苏云金芽孢杆菌杀虫剂与平沙绿僵菌液体制剂采用1:1的比例混合,混合液体制剂使用量为0.12ml/g时,试验用虫在第20天死亡率可达86.3%,校正死亡率可达82%.     

田基黄提取物抑菌作用的研究

该实验以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、酿酒酵母菌、苏云金芽孢杆菌和变形杆菌为供试菌种,采用采用滤纸片扩散法对田基黄水提取液进行抑菌实验研究,并测定其最低抑菌浓度（MIC）,其结果表明：田基黄水提取物对供试菌种普遍有抑制作用,黑曲霉除外;MIC也因菌种不同而不同,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和青黄链霉菌为0.25g/mL,酿酒酵母菌为0.5g/mL,苏云金芽孢杆菌和变形杆菌均为0.125g/mL.实验还采用不同有机溶剂的提取物对选取的五种供试菌种进行抑菌作用研究,其结果表明：田基黄有机溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌均有抑制作用,且抑菌效果均比水提取物的抑菌效果明显.     

Genome sequence of Bacillus cereus and comparative analysis with Bacillus anthracis

Bacillus cereus is an opportunistic pathogen causing food poisoning manifested by diarrhoeal or emetic syndromes. It is closely related to the animal and human pathogen Bacillus anthracis and the insect pathogen Bacillus thuringiensis, the former being used as a biological weapon and the latter as a pesticide. B. anthracis and B. thuringiensis are readily distinguished from B. cereus by the presence of plasmid-borne specific toxins (B. anthracis and B. thuringiensis) and capsule (B. anthracis). But phylogenetic studies based on the analysis of chromosomal genes bring controversial results, and it is unclear whether B. cereus, B. anthracis and B. thuringiensis are varieties of the same species or different species. Here we report the sequencing and analysis of the type strain B. cereus ATCC 14579. The complete genome sequence of B. cereus ATCC 14579 together with the gapped genome of B. anthracis A2012 enables us to perform comparative analysis, and hence to identify the genes that are conserved between B. cereus and B. anthracis, and the genes that are unique for each species. We use the former to clarify the phylogeny of the cereus group, and the latter to determine plasmid-independent species-specific markers.     

苏云金芽孢杆菌LLB19发酵培养基的优化

通过单因子实验对苏云金芽孢杆菌LLB19菌株发酵培养基碳氮源配方进行优化,确定以玉米淀粉、玉米粉为发酵培养基的碳源;以黄豆饼粉、酵母粉作为发酵培养基的氮源.采用Plackett-Burman设计,SAS软件分析该菌株的发酵培养基配方,确定了玉米淀粉、黄豆饼粉、酵母粉为影响LLB19菌株芽孢含量的3种重要因子.运用爬坡路径法对这3种因子进行实验,获得这3种重要因子的最适质量浓度范围.通过响应面分析法,得出3种重要影响因子的交互作用及最佳条件.确定LLB19菌株产芽孢最佳发酵培养基为:玉米淀粉20.0 g/L,黄豆饼粉26.7 g/L,酵母粉5.5 g/L,K2HPO4 0.3 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,CaCO3 0.4 g/L,ZnSO4 0.2 g/L.最佳发酵培养基芽孢数为4.250×107/mL,与初始培养基芽孢数3.410×107/mL相比提高了24.6%.     

广西四川金矿床区土壤样品中蜡状芽孢杆菌的分离和鉴定

从广西金芽、四川阿西所属的三个金矿区采集了土壤样品55份,采用选择性培养基从10~(-2)稀释度的平皿中分离到阳性菌739株,从中挑取11株,其分出率为1．5％,并对分离株进行了光镜和电镜形态学观察,其大小为1～1．4×2．5～3．5μm;芽孢椭圆形．中生,没有孢囊和伴孢晶体,并对11株分离株的生理生化特性进行了测定,结果表明,除C_（17）分离株V、P反应阴性有待进一步分析外,其余10株都与标准株完全相同,因此,应归属芽孢杆菌属蜡状芽孢杆菌（Bacilluscereus）．