微生物发酵法降解山黧豆毒素的研究

为了寻找具有降解山黧豆神经毒素（ODAP）的菌株，本实验选择30种菌株，以含有已知量的ODAP的山黧豆粉提取液为培养基，采用邻苯二甲醛法检测培养前后培养基中ODAP的消耗量，筛选具有能够明显利用和消耗ODAP的菌株.实验结果表明，有2种菌株对ODAP有明显的降解和消耗作用.还探讨了这两种菌株在山黧豆培养基中的生长情况与ODAP降解情况的相关性以及酶促反应的基本动力学,从所获得的试验结果可断定被筛选出的2株菌种经发酵可产生ODAP降解酶.     

干旱条件下两种山黧豆气孔特性及种子ODAP,粗蛋白和淀粉积累的研究

对干旱条件下永寿山黧豆(YS)和定西山黧豆(DX)的气孔特性、光合特性和种子物质的积累进行了研究。结果表明，干旱使两种山黧豆气孔密度(SD)显著升高，同时显著减小气孔开度(SA)，SA在30％以上的气孔所占的比例显著减小，而气孔阻力(r)却显著增加；干旱条件下，两种山黧豆的光合速率(Pn)和蒸腾速率(E)均较正常水分条件下的小，而叶片水平水分利用效率(WUE)却显著上升；干旱使两种山黧豆种子千粒重降低，而种子ODAP，粗蛋白和淀粉含量均有一定程度增加，相比之下，干旱更严重地影响了YS的SD，SA，r，Pn，E以及种子ODAP含量，而更显著地提高DX的WUE和种子粗蛋白、淀粉含量。分析认为，干旱通过影响气孔密度和开度而影响光合速率蒸腾速率和水分利用效率；干旱也增加了气孔阻力，而气孔阻力的增加大幅度地减小了蒸腾速率；光合速率、蒸腾速率和水分利用效率的变化最终影响种子千粒重以及种子ODAP，粗蛋白和淀粉等物质的积累；DX可能较耐旱，水分亏缺对YS的影响较DX大。     

山黧豆中β-ODAP及其他氨基酸的提取和HPLC分析

利用氯甲酸对硝基卞酯(PNZ-C1)作为柱前衍生化试剂,建立了山黧豆中神经毒素β-N-草酰基-L-α,β-二氨基丙酸(β-N-oxalyl-α,β-diaminopropionic,β-ODAP)及其他游离氨基酸的同时分析法.HPLC法为色谱柱Ultimate XB-C18,流动相乙腈和乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH值=4.6),梯度洗脱程序0～5 minφ(乙腈)25％,5～ 30 minφ(乙腈)25％ ～ 90％,流速0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长300 nm.利用该方法对山黧豆中β-ODAP及其他游离氨基酸的提取条件中乙醇体积分数、山黧豆粉的质量浓度(ρ(山黧豆粉))、提取温度等进行了优化.结果表明,在φ(乙醇)为10％,ρ(山黧豆粉)为0.025 g/mL,提取温度为60℃时,提取效率较高.     

碱性氨基酸的局部酰化—L-β-N-草酰氨基丙氨酸的合成

由于L-β-氨基丙氨酸的铜络合物(Ⅴ)按照Rao等的条件未能草酰化,所以改变方法,在弱碱性条件下与草酸单乙酯-酰氯(Ⅵ)反应,得到了L-β-N-草酰氨基丙氨酸(Ⅶ)。合成产物与自山黧豆中提取得到的样品的物理常数相同,因此证明它们是同一物质。     

山黧豆中α—及β—草酰二氨基丙酸相对含量的电泳测定及分离

本文用电泳扫描法对国内一些山黧豆样品中α—及β—草酰二氟基丙酸的相对含量进行了测定井改进了二者的分离方法.     

山黧豆蛋白质的提取及营养价值研究

优化碱溶酸沉提取山黧豆蛋白的方法,得到山黧豆粗蛋白,并分析其氨基酸组成,同时对山黧豆蛋白质进行了综合的营养价值评价。结果显示,山黧豆蛋白质的较佳提取条件为:提取温度40℃,pH值10,提取时间1h,料液比1∶20g/mL。此条件下,山黧豆蛋白质的提取率最高,蛋白质质量分数高达26.1%。山黧豆蛋白的等电点为pH值5;山黧豆蛋白质中含有18种蛋白质氨基酸,其中谷氨酸质量分数最高为17.4%,其次是天冬氨酸10.0%。其必需氨基酸占总氨基酸的比值EAA/TAA为42%(>40%)、必需氨基酸与非必需氨基酸的比值EAA/NEAA为72.41%(>60%),即均大于FAO/WHO提出的参考蛋白量。山黧豆蛋白中的氨基酸评分、化学评分、氨基酸比值系数以及必需氨基酸比率,除蛋氨酸+胱氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸外,其他均高于WHO/FAO标准;蛋氨酸+胱氨酸、色氨酸分别为第一和第二限制性氨基酸。山黧豆蛋白质的必需氨基酸指数EAAI值为1.16,根据蛋白质的评价标准:EAAI值大于0.9为优质蛋白源,说明山黧豆蛋白质属于优质蛋白。     

干旱和复水对大豆叶片光合生理特性及产量的影响

实验运用盆栽技术,选用豫豆29作为材料,对逐步干旱和旱后复水过程中大豆各项生理指标的变化及最后作物产量进行了研究.研究发现,在土壤相对含水量高于22%时,处理组大豆凌晨叶片水势和对照组相比基本没有下降,但当含水量低于22%时,处理组叶片水势急剧下降,表现为一定的阈值反应(约为-0.89 MPa),存在明显的凌晨叶片水势临界值.低于此临界值,叶片水势急剧下降,净光合速率也明显降低.复水后大豆叶片水分状况得到改善,大豆叶片的净光合速率和蒸腾速率都表现为接近于直线的上升,气孔导度的恢复也很快, 并在实验的最后接近对照组的水平,这表明豫豆29的叶片光合在水分胁迫解除后有迅速恢复的能力.成熟期,处理组与对照组的种子产量相差不大,所以适当的干旱胁迫并不影响最终的大豆产量.     

氯化钙溶液处理改善水分胁迫对白菜幼苗的影响

以大白菜品种"绿星65号"种子为试材,通过不同浓度氯化钙溶液对水分胁迫条件下"绿星65号"种子进行处理,并观察其影响.结果表明,水分胁迫条件下,"绿星65号"幼苗叶片中叶绿素含量减少,丙二醛含量持续增加;伴随水分胁迫条件加重,可溶性糖含量同时增加;通过氯化钙溶液处理能够相对提高水分胁迫条件下大白菜幼苗的叶绿素含量,降低叶片中可溶性糖和丙二醛含量,提高幼苗抗旱性,且0.15%的氯化钙溶液处理"绿星65号"种子对于缓解水分胁迫效果最明显,提高了幼苗存活率.     

蚕豆(Vicia faba L.)对不同水分胁迫的光合适应性研究

以重庆市的蚕豆当家品种之一的大白豆为材料,通过人工水分胁迫处理,发现随干旱程度的增加,蚕豆叶片的叶绿素a、叶绿素b含量和叶绿素总降低,Hill反应活力下降,净光合速率下降,同化产物的积累减少,最终表现为植株生物量的降低,水分胁迫下植株净光合速率下降,光饱和点降低,光补偿点提高,CO2补偿点提高,光呼吸增大,生长减弱,这时导致生物量积累减少的主要原因。     

外源一氧化氮对PEG6000水分胁迫下小麦幼苗生理特性的影响

采用10%的聚乙二醇6000对小麦幼苗根部进行轻度水分胁迫处理,并通过添加不同浓度的一氧化氮供体硝普钠(SNP),研究外源NO处理对水分胁迫下小麦幼苗生理特性的影响.结果表明,0.05 mM SNP能显著降低水分胁迫下小麦幼苗丙二醛(MDA)含量和超氧自由基(O2-)产生速率,但能显著增加小麦幼苗叶绿素a,类胡萝卜素、叶绿素(a+b)含量及株高、根长、叶面积和干重.表明外源0.05 mM SNP处理对水分胁迫下小麦幼苗具有明显的保护作用,可以促进植株生长.     

缺氧条件下活性污泥中PHB的生物合成

在序批式反应器(sequencing batch reactor,SBR)中驯化活性污泥,富集聚β-羟基丁酸酯(poly-β-hydroxybutyrate,PHB)积累菌,并研究驯化后活性污泥的PHB合成能力.污泥驯化采用好氧动态供料法,为期3个月.PHB合成实验在缺氧条件下进行(通气量为80.L/h,溶解氧为0.mg/L),温度为20.℃,活性污泥初始质量浓度为1.200.mg/L,乙酸钠质量浓度为931.5.mg/L(以C计).结果表明,驯化后活性污泥中PHB积累菌占优势,具有PHB合成的能力.投加乙酸钠931.5.mg/L(C),在缺氧条件下,活性污泥中PHB含量于feast(底物丰富)阶段末达最高值45.4%.feast阶段内乙酸钠消耗94%,其中53.4%的乙酸钠被转化为PHB,2.7%乙酸钠用于合成污泥活性生物量,供污泥生长.因此,好氧动态供料法驯化后的活性污泥具有较强的PHB合成能力,生长缓慢.     

真菌绿原酸的生物合成途径解析及调控策略

绿原酸具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等生物学功能。为提高真菌中绿原酸的生物合成量,实现真菌的提质增效,本文综合分析植物与真菌绿原酸的生物合成过程及其异同,绘制了绿原酸的生物合成途径;比较目前提高绿原酸合成量的方法,发现逆环境胁迫是积累绿原酸的关键。在培养真菌的过程中,可通过UV-B处理、增加光照强度、适当的光照时长、蓝光照射、低温胁迫、干旱胁迫等物理处理来调控其生长代谢,或者施加外源激素或转录因子刺激绿原酸生物合成途径中关键调节酶的过量表达,如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4-香豆酰辅酶A连接酶(4CL)、莽草酸/奎宁酸羟基肉桂酰基转移酶(HCT)及羟基化肉桂酰转移酶(C3H)等,这些酶的过表达可增加绿原酸生物合成途径的流通量,进而提高真菌中绿原酸的含量。     

褪黑素对低温胁迫后菘蓝种子苗抗氧化性影响

目的以低温胁迫处理的菘蓝种子为起始材料,研究外源褪黑素对萌发种子苗的生长及抗氧化性的影响。方法褪黑素处理低温浸种菘蓝种子,测定萌发的种子幼苗中丙二醛含量以及相关抗氧化酶活性;测定植株根长和IAA含量。结果 10～500μmol/L适宜浓度的外源褪黑素可降低低温处理后菘蓝幼苗中的丙二醛含量,增强过氧化氢酶和过氧化物酶活性,增加内源激素IAA的含量并促进幼苗根的伸长。其中500μmol/L褪黑素作用最显著,随着其浓度的进一步升高,褪黑素植物保护作用减弱。结论外源褪黑素处理菘蓝种子能降低膜脂过氧化水平,提高抗氧化酶的活性,减轻冷胁迫对幼苗生长过程中的氧化损伤,并且褪黑素可能通过影响植物体内IAA水平,刺激植物根生长。     

紫外辐射对盐藻SZ-05的胞外多糖和β胡萝卜素产量的影响

研究紫外辐射对盐藻空间诱变株系SZ-05(Dunaliella salina SZ-05)胞外多糖及β胡萝卜素积累的影响.实验显示,紫外辐射后盐藻SZ-05的细胞密度明显降低,β胡萝卜素的产量显著提高,胞外多糖的产量也略有增加.结果表明,氧化胁迫能提高盐藻SZ-05的胞外多糖和β胡萝卜素的含量.     

山黧豆中毒素分析与去毒方法的研究

1.分离鑑定了山黧豆中所含的毒素为一种变异氨基酸,B-草酰氨基丙 氨酸(简称BOAA)。2.对BOAA的毒性进行了动物急性中毒试验,小鸡中毒最低剂量为 15—25毫克/100克体重。3.建立了纸上色谱一光电比色监测毒素 BOAA的方法。4.将山黧豆制成粉条,去毒效果达到99.9％,去毒过程中的废水含 有毒素应严禁人畜饮用。     

外源GA3对盐胁迫下北美海蓬子种子萌发及幼苗生长的影响

研究了外源GA3对不同浓度的盐胁迫(NaCl)下北美海蓬子种子萌发及幼苗生长的影响.结果表明:外源GA3促进了盐胁迫条件下北美海蓬子种子萌发.在外源GA3处理下,北美海蓬子幼苗中脯氨酸的含量高于单盐处理,而可溶性蛋白含量影响不大;抗氧化酶活性、(O2·) 产生速率值和MDA值低于单盐处理,说明外源GA3可以加强北美海蓬子自身抗胁迫能力,其主要途径是增加体内的脯氨酸含量起作用.另外,在外源GA3处理下的北美海蓬子根系活力显著提高,说明外源GA3有利于北美海蓬子在盐胁迫下生长.     

He-Ne激光对油松幼苗活性氧代谢的影响

采用功率密度为5.6 mW.mm-2的He-Ne激光处理油松种子,处理时间分别为60 s、80 s和100 s,用PEG对其油松幼苗进行水分胁迫.结果发现,经激光处理的油松幼苗在水分胁迫条件下,其幼叶中活性氧产生速率受到抑制,丙二醛含量和相对电导率下降,保护酶活性增强.这表明激光处理油松种子对其幼苗在水分胁迫下体内活性氧清除能力增强,抗旱性提高.     

不同外源物质浸种对干旱胁迫下巴马火麻种子萌发的影响研究

以巴马火麻种子为试验材料,探索4种外源物质赤霉素、Vc(维生素C)、葡萄糖和CaCl_2不同浓度处理对20%PEG-6000模拟干旱胁迫下大麻种子萌发的影响.结果表明:在一定浓度的赤霉素、Vc、葡萄糖和CaCl_2浸种处理后能不同程度缓解干旱胁迫下的巴马火麻种子的萌发,且较适宜的处理质量浓度分别为600、600、800 mg/L和600 mg/L.4种外源物质对巴马火麻种子萌发的干旱胁迫缓解作用以赤霉素和Vc处理效果较好.     

植物在水分胁迫下脯氨酸积累的研究──Ⅲ．外源脱落酸、细胞分裂素与脯氨酸积累和叶气孔变化的关系

研究了在水分胁迫下，两种禾草体内ＰＲＯ、叶气孔、外源ＡＢＡ和６－ＢＡ之间的相互依存关系。认为ＰＲＯ积累中气孔因子能更早的提示ＰＲＯ变化的态势。外源ＡＢＡ，６－ＢＡ及水分胁迫仅仅是促使气孔变化的初级因子。     

杨木粉接枝β-环糊精的制备与表征

介绍杨木粉接枝β-环糊精(β-CD)的制备方法,采用柠檬酸(CA)为交联剂,将杨木粉接枝到β-环糊精上.探讨了反应温度、反应物配合比、对木粉的不同处理方法等因素对该接枝反应的影响.木粉-β-环糊精合成的最佳条件为:首先合成柠檬酸-β-环糊精,然后在这个反应体系中,控制木粉与柠檬酸-β-环糊精的质量比为1∶9,反应温度100℃,反应时间2.5h,木粉-β-环糊精中β-环糊精的含量最高,为19.37μmol·g-1.