用种子醇溶蛋白电泳技术鉴定外源DNA导入春小麦变异后代

采用醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对外源DNA导入技术选育的春小麦变异株系的单株及其受体种子的分析结果:小麦各变异后代电泳谱带在15～19条之间变动,受体谱带为16条.多数谱带与受体相似,也出现了受体所没有的新谱带.各后代的谱带着色深度、谱带宽度均存在显著差异,其差异的出现与外源DNA导入有关.同时说明,种子醇溶蛋白电泳技术可用于外源遗传物质导入小麦变异后代的鉴定.     

青海高原春小麦醇溶蛋白电泳分析

采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（Ａ－ＰＡＧＥ）法,分析了青海省不同地区同一品种和同一地区不同品种（系）的春小麦籽粒醇溶蛋白电泳图谱。结果表明：不同地区同一品种的电泳图谱一致;同一地区不同品种（系）间的电泳图谱差异显著,并显示出各自特独的谱带组合。证明麦醇溶蛋白的组成完全的组成完全由遗传决定,不受外界环境条件的影响。     

外源DNA导入技术在小麦改良中的应用研究

研究表明:(1)外源 DNA 导入技术应用于转移抗病基因是有效的;(2)外源DNA 导入后代常常会产生意想不到的特殊类型,为新种质创造开辟了一条新途径.     

利用两种电泳技术分析大麦品种的醇溶蛋白差异及亲缘关系

利用大麦醇溶蛋白电泳鉴定方法了解大麦各品种间的亲缘关系,采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳(A-PAGE)和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对国内18份大麦品种的醇溶蛋白电泳图谱进行了分析。结果表明:从18个供试大麦品种中分别分离出13条和18条迁移率不同的多态性醇溶蛋白谱带。利用各品种在迁移率Rf值不同的谱带存在的明显差异,可将供试18个大麦品种区分开。对醇溶蛋白电泳结果进行聚类分析,结果显示:18份大麦材料在遗传距离(GD)0.49处聚为4个大类,这表明醇溶蛋白电泳技术对大麦品种鉴定和亲缘关系的评价是一种有效的方法。     

利用两种电泳技术分析番茄品种醇溶蛋白及其亲缘关系

本文利用番茄种子醇溶蛋白电泳图谱鉴定番茄各个品种之间的亲缘关系,采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（A-PAGE）和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）对枣庄市售10种番茄品种的醇溶蛋白电泳图谱的分析.结果表明：不同物种间的醇溶蛋白谱带存在一定差异且这种差异反映一定的关系.10种番茄醇溶蛋白分离谱带8条,大部分具有5条相同谱带,少部分谱带数量较少,最少谱带4条,经过遗传相似性与遗传多样性分析番茄的亲缘关系,经过遗传多样性聚类分析,将10种番茄在一定水平上,聚为5类.为枣庄番茄品种的亲缘关系分析以及遗传育种工作提供了依据.     

基因工程与外源DNA导入技术

基因工程是把目的基因与适当的载体相连接形成重组ＤＮＡ, 并引入到适当的寄主细胞中进行复制和表达; 外源ＤＮＡ 导入技术是将供体总ＤＮＡ的片段, 在自花受粉后一定时期内, 使其沿着花粉管通道或其他方法进入胚囊, 转化受精卵或其前后的细胞． 基因工程方法思路清晰、原理清楚、目的明确, 但操作繁琐, 费用高; 外源ＤＮＡ导入技术简便易行, 费用低, 但目的性不强, 工作量大． 如将两种方法结合使用, 可降低费用, 提高整合率． 综述了两种方法的研究进展情况及在实际应用中所取得的成果     

高粱种子醇溶蛋白的提取条件

以高粱种子为材料,研究了不同提取剂、提取剂用量、浓度和还原剂浓度对高粱种子醇溶蛋白提取的影响.蛋白浓度测定和SDS PAGE电泳表明,DDT浓度为4%的60％叔丁醇溶液,样品质量比提取剂用量为1∶8（g/mL）是提取高粱种子醇溶蛋白的最佳条件.该条件下,提取高粱属不同种的种子醇溶蛋白,得到的高粱属种子醇溶蛋白的“指纹”图谱,可以用来区分高粱属内的种间差异.     

富钾植物DNA导入早稻变异后代的RAPD分析

应用花粉管通道法和浸种法将两种富钾植物空心莲子草和商陆DNA导入到不同的水稻品种中,结果在其后代产生了广泛的变异,并从中筛选出耐低钾的变异材料。应用PCR技术对其中耐低钾的4个变异材料进行了RAPD分析。结果表明,所用100个随机引物中有7个引物在受体和变异后代间扩增出了多态性产物。后代和受体的相似系数均在90%以上,而与供体的相似系数只有6%以下,其中有三个引物的扩增产物中出现了供体的特异性带。这说明空心莲子草和商陆DNA导入水稻后确实引起了水稻基因组结构的变化,同时也为变异后代所发生的生物学性状的改变提供了直接的分子证据。     

小麦醇溶蛋白电泳分析及其在品种分类上的应用

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对２００多个小麦品种的醇溶蛋白进行了分析。结果表明：醇溶蛋白带谱是品种的重要遗传特征,它既能区分所有具有遗传差异的品种（品系）,又能反映出品种（品系）间的亲缘关系的远近。该方法分辨力高,重复性好,操作简便,成本低,可应用于品种鉴定、纯度分析和作为一种遗传选择标记应用于作物育种。本次研究以品种间醇溶蛋白带谱的相似系数为指标,采用类平均法,对其中部分品种进行了聚类分析。聚类分析的结果与品种间的亲缘关系相符,由此说明,醇溶蛋白凝胶电泳技术在小麦品种分类上有着重要的意义。     

外源DNA导入法提高棉花抗病性效果初报和体会

通过5年外源DNA导入方法的研究说明利用外源总DNA导入植物体的分子育种方法简单易行,是变导性状稳定快的生物育种新技术。尽管机率很小（约1／1000）,随机性大,但能促进育种工作有更新更快的发展。     

青菜花粉管通道法导入外源DNA的研究初报

采用花粉管通道法，将青菜株系７５Ｆ５、１４号大白菜、紫阳等三个品种的总ＤＮＡ及质粒ｐＡｃｔ１－Ｄ ＤＮＡ导入青菜６０５品系，收获青菜种子。种子发芽后分别提取约两周苗龄的小苗总ＤＮＡ，并经ＥｃｏＲⅠ酶切，以ｇｕｓ基因片段为探针做子杂交，证实了外源ｇｕｓ基因已整合到青菜６０５品系中；田间观察还获得了一株与供体大白菜花形相似的变异株。     

春小麦谷蛋白亚基、醇溶蛋白电泳谱带及主要品质指标的主成分分析和聚类分析

对18份小麦品种(系)的高分子量谷蛋白亚基、醇溶蛋白电泳谱带的组成及主要常规品质指标进行了检测，并对31个权重最大的小麦品质影响因子进行了主成分分析和聚类分析。结果表明，对小麦品质贡献大的前10个因子的先后次序为：湿面筋含量、硬度、Glil7．6、Gli22、沉淀值、Gli30、1Dx5 1Dy10、蛋白质含量、面筋指数、Gli59．0。这10个因子既相互促进，又相互制约。在小麦品质育种中要高度重视谷蛋白亚基及醇溶蛋白电泳谱带的作用。18个小麦品种可以聚成5类，10个主成分值在5类品种中的表现差异很大。因此，在小麦品质育种的亲本选配时，既要注意协调10个主要品质影响因子的关系，又要使同一组合亲本间保持一定的遗传距离。     

外源全量DNA导入方法对葡萄种子发芽生根和成苗的研究

应用物化法对葡萄导入抗塞外源总量基因，采收转基因种子，进行层积处理、催芽、育苗，结果表明：转导外源基因的方法、外源基因种类以及受体葡萄品种的不同与座果率、种子发芽、成苗之间的比较结果是不同的。     

玉米渣提取玉米醇溶蛋白工艺初探

主要介绍了从玉米渣中提取玉米醇溶蛋白的工艺。从玉米醇溶蛋白不溶于水和无水乙醇，而只溶于60％～95％的醇水溶液中的特殊溶解性出发，利用90％的乙醇溶液，在45～55℃、pH8．0的条件下处理3～4h，可将玉米醇溶蛋白从玉米渣中提取出来。并通过实验确立了各步的工艺条件，在此奈件下玉米醇溶蛋白的得率可达80％。     

大麦籽粒醇溶蛋白组分的基因型和环境变异及其与β-淀粉酶活性的关系

选用7个二棱大麦品种,种植在生态条件差异很大的3个地区,测定和分析了以上大麦籽粒的蛋白质含量、醇溶蛋白组分含量及β-淀粉酶活性,分析了这些性状的基因型和环境变异之间的相关性。结果表明:这些性状在试点间、品种间差异显著,且试点和品种的互作效应显著;B醇溶蛋白和C醇溶蛋白的基因型效应要比环境效应影响大,而蛋白质含量、D醇溶蛋白和β-淀粉酶活性的环境效应要比基因型效应的影响大。相关分析表明:籽粒蛋白质含量与B醇溶蛋白含量、C醇溶蛋白含量与β-淀粉酶活性呈显著正相关;B醇溶蛋白含量和C醇溶蛋白含量均与β-淀粉酶活性呈显著正相关。     

黑稻种子醇溶蛋白亚基组成分析

以9个品种的黑稻种子为材料,用SDS—PAGE方法,分析了各个品种的醇溶蛋白亚基组成。结果表明:①黑稻种子有2条共有的特征带,其分子量分别为:26.1 KDa、21.5KDa;②亚基57.2 KDa、35.0 KDa和26.1 KDa,在每个品种中都存在明显的差异。其中,汉中黑糯、云黑和龙睛2号中含有此类亚基的数目最多(3个);在乌贡1号中,此类亚基数目最少。     

苏丹草种子醇溶蛋白提取和电泳条件优化

以苏丹草(Sorghum sudanense)种子为材料,以蛋白质提取率和电泳图谱效果为标准,分析不同提取剂、种子粉末质量(g)与提取剂体积(mL)的比例、还原剂二硫苏糖醇(dithiothreito,DTT)的浓度对种子醇溶蛋白提取效果的影响,同时研究上样量、不同胶浓度对SDS-PAGE检测蛋白的影响.结果表明,苏丹草的最佳提取剂为含有0.2%DTT的70%正丙醇,种子粉末质量与提取剂体积的最佳比例为1∶8.在上样量适当的情况下,12%分离胶电泳可以得到清晰的电泳图谱.以苏丹草种子为材料所建立的醇溶蛋白提取和电泳条件,也可应用于其他几种常见的禾本科种子醇溶蛋白的分析,并可得到较好的分辨率.     

我国部分优质小麦醇溶蛋白遗传多样性分析

采用A-PAGE对49个优质小麦品种进行了醇溶蛋白遗传多样性检测.结果表明:49个供试品种在醇溶蛋白带型上差异显著,品种间遗传距离(GD)在0~0.935之间,平均值为0.525.聚类分析可将优质小麦分为6大类,1BL/1RS易位系有12份,占24.5%.这个结果表明供试品种醇溶蛋白变异丰富,存在广泛的遗传多样性.