大豆凝集素的分离纯化及血凝效果研究

为研究不同品种大豆中凝集素相对含量高低及血凝效果,用0.9%Na Cl溶液抽提不同品种大豆中的凝集素,通过观察凝集素提取液与2%红细胞悬液的凝集反应程度,来初步判断凝集素的含量高低;再通过测定凝集素提取液与2%红细胞悬液作用后上清液吸光值,以及凝集红细胞沉淀的干重,进一步确定不同品种大豆中凝集素的相对含量。结果表明,利用血凝法可快速测定大豆中的凝集素含量,‘晋科5号’、‘长豆34号’凝集素含量最高,‘晋豆25号’、‘晋遗57号’凝集素含量次之,‘晋遗59号’含量最低。     

黄牛肝菌凝集素的分离纯化及部分性质

黄牛肝菌(Boletus fulvus)经生理盐水浸提、CM-Sepharose、DEAE-Sepharose及Sephacryl S-100分子筛层析后得到黄牛肝菌凝集素(BFL).经SDS-PAGE电泳及Sephacryl S-100分子筛层析检测表明,所得的BFL是由两个分子量约15.8kDa、非二硫键相连的亚基组成的表观分子量为32kDa的二聚体.BFL可快速凝集兔血红细胞,其最低凝集浓度为3.9μg/mL;糖抑制试验表明,胃粘蛋白、甲状腺球蛋白、卵粘蛋白和卵清蛋白均可抑制BFL活性.当温度在70℃以下和pH值在6.0~9.8之间时,BFL凝血活性基本不变.然而当温度至90℃以上和在极端pH值下,BFL凝血活性减弱甚至完全丧失.不同浓度的脲和盐酸胍对BFL凝血活性的影响表明:随着变性剂浓度的增加,BFL的结构逐渐被破坏.     

江苏菜豆PHA—P的提取及其同工凝集素的分离和性质研究

植物血球凝集素(Phytohemagglutinin PHA-p)提取及其生物学活性、理化性质等已进行了广泛研究,並成为外周血淋巴细胞转化、细胞膜糖专一性研究的重要试剂。然而国内应用的PHA-p及其同工凝集素却均靠进口。本文报道用硫酸铵分级沉淀,从江苏菜豆(Phaseolus vulgaris)中提取PHA-p,並进一步用SP-Sephadex C-50离子交换层析分离L_4和E_4-PHA同工凝集素的方法及性质研究。     

凝集素的分离纯化、基因克隆及功能研究进展

凝集素(lectin)研究近年来发展迅速，尤其在植物基因工程中，植物外源凝集素基因越来越受到重视。本文从凝集素的分离纯化、基因克隆、理化性质和功能等方面进行了综述。此外还讨论了凝集素基因在植物基因工程中的应用。     

半夏蛋白的提取工艺及其凝集素的抑菌研究

运用正交试验和单因素比较试验,探讨半夏蛋白提取过程中各条件对蛋白质量浓度的影响,优化半夏总蛋白的分离纯化工艺.用DEAE-Sepharose FF离子交换层析对半夏凝集素进行分离、纯化、凝血鉴定,并进行抑菌效果的探究.建立半夏总蛋白的最佳提取工艺:称取适量新鲜半夏块茎,超声波处理20min,用1.5%NaCl溶液在4℃下静置抽提6h,提取1次后离心取上清并进行硫酸铵沉淀得到半夏总蛋白.凝集素对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显,对大肠杆菌的抑制效果一般.     

小白芸豆凝集素的分离纯化及性质研究

从小白芸豆中分离纯化出一种新的凝集素,对其部分理化性质和生物活性进行研究.小白芸豆经过去皮粉碎、浸提、硫酸铵分段盐析、SP Sepharose阳离子交换、Q Sepharose阴离子交换和Superdex 200凝胶过滤层析后可得到小白芸豆凝集素(Phaseolus vulgaris var.albuslectin,PVAL)纯品.测定了PVAL的表观分子质量、亚基分子质量、糖含量、等电点、氨基酸组成、酸碱稳定性以及抗癌性.PVAL的表观分子质量为136 ku,是由2种分子质量分别为36.2 ku和32.2 ku的亚基组成的四聚体,糖含量为4.93%,等电点分布在pH5.3~6.0之间.PVAL分子无半胱氨酸,也无二硫键,疏水性氨基酸质量分数约为37%.PVAL对酸碱的耐受性比较好,并且对肿瘤细胞MDA-MB-435S有较好的抗性.     

木菠萝凝集素的纯化与性质研究

木菠萝种子经抽提、４０－６０％饱和度度硫酸铵沉淀和Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析，得到纯化的木菠萝凝集素（Ｊａｃａｌｉｎ）。Ｊａｃａｌｉｎ分子量约为５８２００，由分子量分别是１４０００和１５８００的亚基组成，等电聚焦电泳显示多条区带，其ＰＩ为５．７－８．６５，Ｓｃｈｉｆｆ’ｓ试剂染色证明它是一种糖蛋白，Ｎ－末端为精氨酸和甘氨酸。Ｊａｃａｌｉｎ能凝集除山羊、鸡以外的多种动物和人Ａ、Ｂ、Ｏ和Ａ     

掌叶半夏凝集素的分离纯化及抗蚜活性研究

前已发现某些国产药用植物粗提物在体外实验中的杀虫活性与所含蛋白有关，利用４５％饱和硫酸铵沉淀，ＰＨＥＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ疏水柱层析和ＱＳＡｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ离子交换柱层析，从掌叶半夏块茎中分离纯化到一种蛋白质（ＰＰＡ），ＰＰＡ在刺吸口器害虫棉或桃蚜的人工饲料中分别含０．１２％或０．１５％时显示出明显的致死作用，ＰＰＡ是一种热稳定性较强，亚基分子量１２ｋｕ的非共价结合的上聚体凝集素。     

甘薯品种岩8-6凝集素的分离纯化及其性质

甘薯品种岩8－6的叶片组织依次经硫酸铵分级沉淀,甲壳素亲和层析及Sephadex G-75分离纯化得到一种凝集素（IPomoea Batatas Lectin,简称IBL）,纯化的IBL电泳显示一条蛋白质着色带,IBL的亚基相对分子质量为47000,IBL对兔红细胞有凝集作用,凝血活性可被D－果糖明显抑制,IBL对热不稳定,加热到70度时,活性完全丧失,IBL对碱敏感,IBL含有16种氨基酸,富含Asp和Glu,中性糖含量为5．07％。     

磷的有效性对菜豆生理生态特征的影响

研究了生长在３种不同磷水平下６种不同基因型菜豆的多项生理生态指标．结果表明：①Ｐ水平显著影响菜豆的光合、蒸腾、气孔导度、叶磷浓度、光能和水分利用率、磷利用率及生物量等;②在同一磷水平下,不同基因型菜豆的光合、气孔导度、光能和水分利用率显著不同;③在各基因型中,Ｇ２４２４的耐低磷性最强     

修饰聚合物-盐水液-固亲和萃取体系分离纯化大豆中的氨基酸

用亚氨基二乙酸 (IDA )修饰聚乙二醇 60 0 0 (PEG)后 ,再与 Cu SO4反应 ,形成 PEG修饰聚合物 PEG-(IDA-Cu) 2 ,混合吐温 80、磷酸盐 ,即构成液 -固亲和萃取体系 .采用该体系 ,直接从大豆蛋白匀浆中提取了氨基酸 .选定萃取条件 :磷酸盐摩尔比 n(K2 HPO4)∶ n(Na H2 PO4) =4.8∶ 1,维持体系 p H值 7.70 ,总盐浓度 1.60 mol·L- 1;吐温 80的体积分数 10 .5% .结果表明 :该体系对大豆蛋白匀浆中氨基酸的二次萃取率为 66.5%     

八角中茴香油与莽草酸的提取和分离纯化

研究了用柱层析提取法从八角中提取、分离、纯化和制备高品质茴香油和高纯度莽草酸的方法.干燥的八角粉末过筛（250m～850m）,用85%乙醇柱层析提取法提取,收集材料干质量2.4倍体积的提取液,两者的提取率均超过93%.提取液减压蒸馏回收乙醇,分离油相和水相.油相经活性炭吸附等方法精制成高品质茴香油,总回收率93.2%,得率6.6%;水相经减压蒸干,用乙醇和石油醚处理除去杂质后,用乙醇结晶,得到纯度大于99%的莽草酸,总回收率为73.3%,得率为5.8%.     

扁核木叶蛋白的提取及分离和纯化研究

本实验主要对扁核木叶蛋白的提取、分离和纯化进行了研究。从扁核木叶片中提取叶蛋白,用20%～80%硫酸铵沉淀分级盐析叶蛋白,采用葡聚糖G-150凝胶层析对扁核木叶蛋白进行脱盐和分离,以除去硫酸铵以及其他盐类,最终得到较纯的叶蛋白。结果表明,经盐析沉淀后的叶蛋白提取率达66%,层析纯化后的扁核木叶蛋白提取率较高,达74%,实验基本达到了纯化效果。     

绿原酸的分离纯化工艺研究

研究从杜仲提取物中分离纯化绿原酸的工艺,确定其分离纯化参数.采用料液比1∶20水超声提取,上聚酰胺柱分离,4BV15％乙醇洗脱,洗脱浓缩液调pH为1-2静置结晶,可得85％以上的绿原酸粗晶,再甲醇重结晶,可得97％绿原酸白色针状晶体.采用此工艺可以将杜仲提取物中绿原酸由20％分离纯化至97％,工艺适合工业化生产.     

葡萄籽中原花青素提取、分离纯化研究进展

综述了近十年来葡萄籽中原花青素的提取、分离纯化方法和工艺的研究进展.提取方法主要包括传统的溶剂提取法、微波法、超临界CO2萃取法;分离纯化方法包括大孔树脂吸附法、超过滤法.这些方法为提取纯化葡萄籽中的原花青素,进一步分离得到单体提供有用的参考.     

鲤鱼红色肉中金属蛋白酶的分离纯化与性质分析

通过硫酸铵盐析、DEAE—Sephacel离子交换、Sephacryl S-200凝胶过滤、High-Q离子交换和Gelatin—Sepharose亲和层析等方法,从鲤鱼红色肉中纯化得到分子量为75ku的金属蛋白酶．该酶在碱性条件下显示活性,活性温度范围为30～50℃．金属蛋白酶抑制剂EDTA和EGTA能够完全抑制该酶的活性,而其他蛋白酶类抑制剂则不起抑制作用．进一步研究发现,该酶能够有效分解Ⅰ型胶原蛋白和明胶,说明其在鱼体死后肌肉软化过程中起着重要作用．