水稻白叶枯病拮抗菌的筛选、鉴定及发酵液稳定性分析

从稻田土壤、水稻植株、昆虫肠道等环境中分离纯化得到88株菌株,以水稻白叶枯病菌生理小种P6菌株为指示菌,通过琼脂块法和牛津杯法从中筛选得到了对水稻白叶枯病菌具有明显拮抗作用的12号菌株,其抑菌圈直径为6.09 cm.根据12号拮抗菌株菌落和菌丝形态特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析结果,鉴定该菌株为Streptomyces gramineus.该拮抗菌发酵液具有较强的热稳定性、酸碱稳定性和光照稳定性,将其作为生物农药具有一定的应用价值和开发前景.     

烟草赤星病菌致病力变异的研究

用烟草赤星病菌的6个菌株测定了病菌在低温保存、连续培养和连续接种过程中致病力的表现,病菌在1—4℃下保存4年后,侵入寄主的能力不变,引起病斑扩展的能力略有减弱。连续23代继代培养的结果表明,致病力表现稳定,菌株TBA28的侵染能力(接种幼苗后的发病率)和引起病斑扩展的能力(病情指数)分别稳定在100％和60—80之间,另外5个菌株的这两项值分别在60—100％和20—40之间变化。连续11代继代接种的结果也表明了类似趋势,菌株TBA28一直表现出最强的致病力,两项测定值分别为近100％和40左右,其余菌株均保持较弱的致病力。这些结果表明,病菌致病力经低温保存虽有减弱,经人工培养和接种可恢复到原有的水平,而连续培养或连续接种不引起致病力的减弱或增强。     

几种药剂对烟草赤星病菌的抑制作用

本文为了向田间防治烟草赤星病提供高效、安全的杀菌剂,在室内研究了4种杀菌剂对赤星病病原菌的毒力试验。结果表明:不同浓度的杀菌剂对烟草赤星病菌丝的生长抑制效果不同。40%的菌核净WP EC50值为29.84 mg/L,抑制效果最好;50%的腈菌三唑酮EC和10%多抗霉素B WP次之,其EC50分别为33.01 mg/L和30.02 mg/L;10%的多抗霉素(宝丽安)WP的抑制效果最差,其EC50为139.42mg/L。当浓度达到100 mg/L时,50%的腈菌三唑酮EC、10%多抗霉素BWP和40%的菌核净WP对烟草赤星病病原菌的抑制率分别达到了57.23%、66.52%和67.44%,而10%的多抗霉素(宝丽安)WP的抑制率只有45.39%。在一定范围内,各种药剂随着浓度的增大其抑制率也随之增大。     

拮抗梨黑斑病菌的链霉菌的筛选及鉴定

从河北梨树果园土壤中分离到一株对梨黑斑病菌(Alternaria alternard)有强拮抗作用的链霉菌菌株B-105,该菌对多种植物病原真菌有很好的抑制作用.离体叶片和鸭梨果实试验表明,B-105菌株对梨黑斑病防治效果显著.通过对拮抗菌的形态特征、培养性状、生理生化特征及16S rDNA序列进行综合试验分析.鉴定该菌株为灰色链霉菌(sfreptomyces griseus).     

棉苗立枯病拮抗菌的筛选及鉴定

为明确7株拮抗细菌对棉苗立枯丝核菌在生物防治中的应用潜力,通过拮抗菌拌种催芽、温室盆栽测试、小区拌种测定及大田拌种测定其防治棉苗烂根病的防治效果。结果表明,拮抗菌S37和S44具有较好的促生和防病效果。在小区试验中,S37和S44对棉苗立枯病的防治效果分别为47.8%和57%,与化学种衣剂福多甲的效果相当。在新疆兵团143团和148团的大田试验中,S37对棉苗立枯病的防治效果均为37.5%,也与福多甲的防治效果相当。通过菌落形态特征观察和16S rDNA分析,对防病和促生效果最好的2株拮抗菌S37和S44进行了鉴定,结果表明,这2株拮抗菌均为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

烟草赤星病菌孢子萌发和侵染条件的研究

用烟草赤星病菌两个菌株进行测定,孢子在烟草叶面萌发能力最强;其次是在1％的葡萄糖溶液中;在蒸馏水中萌发最弱。在侵染试验中,用丙酮和70％酒精清洗的幼苗叶片发病加重;露天放置的烟苗较生长在温室内的烟苗发病重。在3种接种方法中,以孢子悬滴法效果最好。侵染和接种方法中的幼苗,其叶面微生物在种类和数量上均以处理的不同而有差别。     

凤梨内生菌筛选鉴定及拮抗效果评价

以凤梨叶片为筛选材料,通过平板对峙培养法筛选出3株对蔬菜软腐病菌菊迪基氏菌有拮抗效果的生防细菌,结合生理生化及分子生物学鉴定,以及拮抗效果评价试验,结果表明,这3株内生菌分别为:Bacillus amyloliquefaciens F-2,Bacillus megaterium F-3-1,Bacillus subtilis F-3-2,皆为革兰氏阳性菌。其中F-2对菊迪基氏菌和丁香假单胞菌的抑菌效果最好,抑菌圈分别为24. 67 mm和28. 83 mm; F-3-1对病原真菌燕麦镰孢菌、胶孢炭疽菌、互隔交链孢霉,抑菌率分别为70. 83%、91. 67%、65. 56%. F-3-2对丁香假单胞菌和黄单胞菌属的抑菌效果最好,抑菌圈分别为20. 75 mm和20. 00 mm。另外,通过生化鉴定研究发现,这3株优良内生菌还具有很好的解磷固氮和产纤维素酶能力,这对内生菌的筛选及内生菌对植物抗病促生作用的研究提供了一定的参考价值。     

枇杷叶围微生物分离及灰斑病菌拮抗菌筛选

从健康“解放钟”枇杷叶上分离采集微生物,以筛选枇杷灰斑病拮抗菌。结果表明：在枇杷的叶围微生物中,细菌占74%以上,属优势菌群,其次是真菌,放线菌比例最少;微生物总量的季节变化趋势是春季＞夏季＞秋季。其中XI-6和XI-8两菌株对灰斑病病原菌菌丝生长及孢子萌发均有较强抑制作用,经鉴定两菌株为芽孢杆菌属（Bacillus）。     

果实采后病害拮抗菌的筛选及鉴定

从水果、叶片表面及果园土壤中分离到76株细菌和26株酵母菌，通过平板对峙法和果实接种法筛选到1株细菌2株酵母菌，对梨黑斑病菌（Alternaria kikuchiana）、柑橘青霉病菌（Penicillium italicum）都表现出显著的拮抗效果．根据其形态特征和生理生化特性以及细菌的16SrDNA序列的进化树分析，初步鉴定这3株菌分别为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），假丝酵母（Candida sp．）和克勒克酵母（Kloeckea sp．）．     

烟草赤星病菌生长和产孢性状变异的研究

采用连续培养和连续接种的方法,研究了烟草赤星病菌致病力不同的6个菌株生长和产孢特性的变化。病菌在连续23代继代培养和连续11代继代接种过程中,菌落型、生长量和产孢量等培养性状基本保持稳定。     

培养条件对烟草赤星病菌产孢能力的影响

用烟草赤星病菌13个菌株分别测定了3种基本条件对病菌产孢能力的影响。当病原真菌在8个温度梯度下生长时,产孢指数—温度曲线近S型,产孢的最低、最适、最高温度范围分别为12～16°、24～28°、32～36℃。当病菌在17个pH梯度下生长时,产孢指数—pH梯度曲线也近S型变化,最低、最适、最高pH范围一般分别为pH3.5～4.0、6.5～7.5、9.5～10.0。在三种光照条件下测定表明,暗处理可以明显增强病菌的产孢能力。另外,菌丝体损伤对产孢能力不发生明显影响。     

一株拮抗纹枯病菌放线菌的筛选及鉴定

从采自金华市各地的68份土样中分离得到了放线菌406株,以水稻纹枯病菌为指示菌,利用平皿对峙法筛选到42株具有较好拮抗作用的放线菌菌株．其中,Sh-43菌株的拮抗作用最强,抑菌带宽度为28．3mm．根据培养特征、形态特征、生理生化特征及16S rDNA序列比对分析,鉴定Sh-43菌株为吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）．     

黄瓜枯萎病菌内生拮抗细菌的筛选与鉴定

采用平板对峙法从黄瓜体内筛选对黄瓜枯萎病菌具有拮抗作用的细菌.结果表明,黄瓜体内的细菌数量为2.9-25.6×103cfu· (g·FW)-1,其中,植株不同器官的内生细菌数量不同,以叶中的细菌数量最多,其次为花,最少的为果实;从所分离的细菌菌株中筛选到20株对黄瓜枯萎病菌具有不同程度拮抗作用的菌株;选择拮抗效果较好的10株菌株,用革兰氏染色、鞭毛染色、芽孢染色和生理生化测定等进行鉴定,发现其均为芽孢杆菌属(Bacillus spp.).     

拮抗烟草青枯病菌的烟草内生细菌系统多样性及趋化性分析

 从来自3个烤烟品种NC297、红大、K326的600株内生细菌中,以烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)为靶标,共筛出55株拮抗菌,其对烟草青枯病菌的抑菌圈直径在1~16 mm之间.对这55株拮抗性内生细菌的16S rRNA基因序列进行RFLP分析共产生6种带型.根据RFLP带型选取16株进行16S rRNA基因序列测定和系统发育分析.结果表明这55株拮抗性内生细菌属于Firmicutes和Proteobacteria两大类群的6个种:Bacillus amyloliquefaciens subsp.plantarum,Bacillus methylotrophicus,Bacillus tequilensis,Brevibacillus parabrevis,Brevibacillus brevis和Pseudomonas aeruginosa.利用cheA基因检测方法和平板检测方法共筛选到3种具有趋化性的拮抗性内生细菌:Brevibacillus parabrevis,Brevibacillus brevis和Pseudomonas aeruginosa.     

弧菌拮抗菌的筛选

用平板划线或点种法602株海洋细菌进行筛选,得到4株对海水养殖动物（鱼、虾、贝）的病原菌有拮抗作用的细菌。并对拮抗菌QJ2的拮抗作用进行了研究,结果为：QJ2有广泛的弧菌抗菌谱,对37株弧菌的抗菌阳性率达到89．2％（33．37）;用活菌平板计数法和O．D．600nm研究了QJ2培养物的去细胞上清液（CFS）与病原菌W－1的作用动力学,15min时W－1的细菌数便开始减少,4h时细菌数最少,6h后开始增加,而对照组的细菌数呈逐渐上升趋势;QJ2对自身的拮抗物质不敏感;QJ2抗性物质的分子量不大于8000Da;经常规生理生化方法和API－20细菌快速鉴定系统鉴定,QJ2为气味黄杆菌（Flavobacterium odoratum)。     

棉花黄萎病拮抗内生菌的筛选鉴定及抗菌物质研究

从棉株中分离筛选到一株对棉花黄萎病菌具有较强拮抗作用的内生细菌BSD-2.通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌.平板对峙试验表明,BSD-2对多种植物病原真菌有抑制作用.BSD-2培养液以50 %硫酸铵沉淀所得的拮抗物粗提液,具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,对胰蛋白酶、蛋白酶K和胃蛋白酶均不敏感,对氯仿敏感,能够有效抑制黄萎病菌孢子萌发.     

清江流域及环神农架烟区烟草赤星病菌观测与发生规律研究

2007年在湖北咸丰高乐山镇核桃园村、房县桥上乡西坪村进行了烟草赤星病菌观测与发生程度相关性研究,结果显示:1)咸丰观测点未发现孢子散发,叶片上仅有零星病斑出现,病情指数8月上旬为0.2,8月下旬达1.2;2)房县观测点病菌孢子分布在0.5~1.5m高度,7月中旬至8月下旬田间可见孢子散发,0.5m高度孢子数量最多,其次为1m,1.5m孢子数量相对较少,叶片上病斑较多,病情指数4.1~25.34.     

山葵墨入病拮抗菌的筛选鉴定及发酵条件的优化

从山葵种植土中分离筛选获得一株山葵墨入菌(Phoma wasabiae Yokogi)的强拮抗菌株B12.对其进行形态特征、培养特征、生理生化特征与16S rDNA 序列分析,初步将其鉴定为短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis). 通过单因子实验和均匀设计研究发现该菌的最佳培养条件和摇瓶发酵配方为: 起始pH 7.0、30 ℃、180 r/mim、摇瓶培养3 d , 牛肉膏1.5%、蛋白胨0.9%、可溶性淀粉0.6%. 其抑菌率提高28.88%.     

水稻白叶枯病菌的拮抗菌的筛选及其抗菌物质的研究

从稻飞虱肠道中分离，筛选出对水稻白叶枯病菌有抑制作用的拮抗菌，初步鉴定为芽孢杆菌进一步的分析表明其抗菌物质是一种蛋白质。     

油茶病原菌拮抗菌筛选

通过拮抗实验,研究了59个野菊内生真菌菌株对油茶炭疽病及油茶稍枯病病原菌的拮抗性.结果表明:89.8%供试真菌菌株对油茶病原菌孢子萌发或菌丝生长有抑制作用.拮抗菌株在代谢过程中能产生抑制病原菌生长发育的抑菌物质,这些物质存在于菌丝内或分泌于菌丝外.筛选得到2个油茶病原菌强拮抗菌株,大茎点霉菌Y11和Y29.