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相似文献
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1.
扩增并克隆了JD病毒的gag 基因片段(位于300nt~564nt,编码基质蛋白MA)和pol基因片段(位于3467nt~3691nt,编码反转录酶RT),测定其序列并同BIV、BFV 和BLV 的相应基因进行比较.所建立的方法能够特异性扩增JDV序列,适用于JDV的检测  相似文献   

2.
光合细菌Chromatium vinosum可溶性氢酶小亚基基因的克隆   总被引:6,自引:2,他引:4  
光合细菌C.vinosum可溶性氢酶由52kDa和21.5kDa两个亚基组成。该酶大亚基N-末端氨基酸序列为:SRTITIEPVTRXEGHAR,小亚基N末端氨基酸序列为:STQPKITVATXLDG。根据大、小亚基N-末端氨基酸序列设计两套引物,Primer1:5’gAT(gTgAT(g/C)gTgAT(g/C)gT(g/A)Cg3’和Primer2:5’AgC AC(C/g)CAgCC(C/g  相似文献   

3.
斜纹夜蛾NPVp74基因的克隆及部分序列分析   总被引:6,自引:0,他引:6  
以含p74基因的AcNPVEcoRⅠ-P片段作探针,与SlNPV基因组在非严格条件下进行Southern杂交,将SlNPVp74基因定位于4900bp的SlNPVXhoⅠ-P片段.对SlNPVXhoⅠ-P片段中的一段940bp的DNA片段进行序列测定,通过internet经BLAST与Gen-Bank中的database比较分析发现,序列中的一段243nt序列与AcNPVp74基因有60%的同源性,一段81nt序列与AcNPVp74基因的同源性高达79%.与CfNPVp74相比,2段264nt和100nt序列分别有60%和71%的同源性.测得序列中的部分序列与BmNPV、OpNPVp74基因也有高达58%~78%的同源性.同时,这部分序列编码的氨基酸与AcNPV及OpNPVP74蛋白的氨基酸序列也有很高的同源性.结果表明所测序列的一部分为SlNPVP74蛋白C-端的编码序列.  相似文献   

4.
参照人的BDNF基因序列设计了一对引物,利用聚合酶链式反应(PCR),从小熊猫基因组DNA中扩增和克隆到BDNF基因。序列分析表明,小熊猫和人的BDNF基因核苷酸序列同源性为93%,而与大熊猫BDNF基因的核苷酸序列同源性高达98%。在推导的多肽序列中,除在前导肽区有两个氨基酸的差异外,小熊猫BDNF的成熟区与人和其他报道的哺乳动物BDNF成熟区的氨基酸序列完全一致,显示了极高的保守性。  相似文献   

5.
三种不同方法检测鸡马立克氏病毒的效果比较   总被引:3,自引:0,他引:3  
研究比较了核酸斑点杂交技术、多聚酶链反应(PCR)扩增和病毒分离技术在检测MDV中的效果和相关性,试验结果表明:以PCR扩增I型MDV132bp重复序列或以此序列标记的Digoxigenin探针进行Dot-DNA分子杂交检测MDV,均具有较好的效果,灵敏度比常规病毒分离高近万倍,其特异性较强,并能快速鉴别MDVⅠ型毒,使诊断时间缩短了许多。  相似文献   

6.
一种非洲番茄黄化曲叶病毒DNA的克隆   总被引:5,自引:2,他引:3  
用PCR获得了非洲塞内加尔番茄黄化曲叶病毒(TYLCV-SEN)的全长DNAA,并进行了克隆和部分序列分析,DNA序列分析的序列并1359bp,包括外壳蛋白基因,AV1基因,基因间区(IR)及部分复制酶基因,计算机分析显示:TYLCV-SEN与其他亚组III及生理病毒相比,外壳蛋白氨基酸同源性为67%~83.4%,AV1基物氨基酸同源性为61%~84%,IR最大同源性为60%~68%,且与非洲和中  相似文献   

7.
对伪狂犬病毒湖北地方株(PRV HB株)糖蛋白H基因片段进行了扩增、克隆、序列测定和分析,比较了该序列与PRV Ka株及NIA-3株三之间的同源性。结果显示,克隆片段长1396bp,G+C含量75.6%包括糖蛋白H(gH)N端283个氨基酸编码区及上游调控序列和胸苷激酶端13  相似文献   

8.
根据国外报道的JEV(Japanese encephalitis virus)基因组全序列,针对JEV E基因5′端设计合成一对特异引物,以日本脑炎病毒内蒙古分离株M73-1RNA为模板,经RT-PCR扩增,获得366bp的JEV E基因cDNA片段。将此片段重组于质粒pUC19中,并转化大肠杆菌DH5α,经PCR扩增,酶切及序列分析,结果表明JEV M73-1 5′端126个核苷酸序列与JEV日  相似文献   

9.
用PCR(多聚酶链式反应)扩增方法测定白头叶猴、黑叶猴和菲氏叶猴各1只的线粒体DNAND4整个基因(1377bp)和D-环500多bp序列。黑叶猴与菲氏叶猴的ND4基因序列碱基差异数高达123,基于ND4基因的遗传距离值为8.9%;白头叶猴与黑叶猴ND4基因序列间碱基差异数为25,遗传距离值为1.8%。在D-环区域,白头叶猴与黑叶猴间的遗传距离为4.3%,而白头叶猴、黑叶猴两者与菲氏叶猴间的遗传距离则分别高达26.4%和26.0%。分析结果表明,白头叶猴恐怕还只是黑叶猴的一个亚种。从保护遗传学角度看,白头叶猴应被看作一个进化显著性单元(evolutionarysignificantunits,ESU),在动物的保护行动中应得到充分的重视  相似文献   

10.
斜纹夜蛾核多角体病毒egt基因的克隆和部分序列分析   总被引:7,自引:0,他引:7  
用AcMNPVegt基因中的保守区部分片段为探针,通过Southern杂交确定SlMN-PVegt基因的位置在PstⅠ4970bp和XbaⅠ2600bp的片段上.采用双链DNA序列分析方法测序,在2600bp片段上的EcoRⅠ位点两侧得到594bpDNA碱基序列,用计算机DNASIS和PROSIS软件,将594bpDNA碱基序列所推测的氨基酸序列与AcMNPV和SliMNPV的egt基因氨基酸序列进行同源比较,其同源性分别为45%和86.5%.  相似文献   

11.
腺病毒同源重组子的鉴定   总被引:1,自引:0,他引:1  
携带入IFN-γcDNA序列的E1区缺失的腺病毒载体pAdl2/RSV-IFN-bpA与pJM17质粒,通过磷酸钙沉淀法共转染293细胞,经同源重组,共获得6个病毒噬斑。病毒噬斑感染293细胞,至出现完全细胞病变效应(CPE)后,抽提细胞内的病毒DNA,经XhoⅠ酶切后走凝胶电泳,出现重组腺病毒圾的3.5kb大小的DNA条带,^32P标记的探针pAdl2/RSV-IFN-bpA与XhoⅠ酶切过的病  相似文献   

12.
用分子生物学的实验方法对非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)进行胰岛素基因检测。从NIDDM患者外周血的白细胞中提取DNA,以胰岛素基因5′-末端上游的某一DNA序列为引物,对特定的靶序列进行体外扩增,即TaqDNA聚合酶链式反应(PCR),将其扩增产物进行电泳分离,在紫外分析仪下观察结果并与正常人对照,发现16例NIDDM患者胰岛素基因有所改变,提示此型糖尿病患者的胰岛素基因改变可能与NIDDM的发生有关。进一步说明遗传因素在此型糖尿病中的作用。  相似文献   

13.
报道啤酒酵母菌株V25T线粒体15SrRNA基因全长1651bp核苷酸序列,并与已发表的啤酒酵母其他四株菌株的线粒体基因一级结构进行了比较。  相似文献   

14.
根据人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14(hCD14)基因的核苷酸序列,设计hCD14基因5'端和3'端的两个引物.以人血中提取的基因组总DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术特异性扩增该基因1245加的编码序列.扩增产物经Xbal、KpnⅠ双酶切后,克隆到pUC18质粒XbaI-KpnI位点间,随后转化大肠杆菌JM109.用PCR方法筛选出重组菌落.经酶切和序列分析方法检测后,证明获得了含hCD14基因的重组克隆pHCD14.巳测出的插入片段5'端部分中包含着人CD14基因488bp的序列,与巳报道的相应DNA序列相比具有99%的同源性.  相似文献   

15.
等离子化学气相沉积硬膜技术研究   总被引:3,自引:2,他引:1  
用等离子体化学气相沉积(PCVD)技术制备了TiN、TiC、Ti(CN)和(TiSi)N膜及其组合的多层膜。PCVD具有很好的覆盖性,PCVD-TiN具有很好的耐磨、蚀性,膜与基体结合良好,因而用PCVD法在高速钢刀具、模具及轴承上沉积TiN可大大提高其使用寿命。PCVD-TiN和Ti(CN)膜无明显柱状晶,其显微硬度高于TiN亦可用于高速钢刀具、模具上提高其使用寿命。PCVD-(TiSi)N,晶  相似文献   

16.
皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅰ氨基酸序列初步研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
中国皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodonacutus)毒出血毒素I(AaHI)氨基酸序列得到初步测定.AaHI的N端13个残基序列为STEFQRYMEIVIV.序列比较表明AaHI与其它种属来源的低分子量(20~24kD)蛇毒出血毒素和金属蛋白酶有较高的同源性.  相似文献   

17.
制备了5′端共价连接EDTA的寡聚核苷酸与生命金属的螯合物ODN-5′-EDTAM(n+),其中M(n+)为Fe(Ⅱ),Co(Ⅱ)或Cu(Ⅱ);分析、计算了这3个螯合物形成的最佳pH值范围,ODN-EDTAFe(Ⅱ)为pH5.8~8.6,ODN-EDTACo(Ⅱ)为PH4.6~8.1,ODN-EDTACu(Ⅱ)为pH3.4~5.7;在此条件下,剪切反应必须的Mg2+并不与Fe(Ⅱ),Co(Ⅱ)或Cu(Ⅱ)竞争EDTA,也不会形成沉淀;讨论了ODN-EDTAM(n+)切割DNA双链的反应机理:修饰寡核苷酸通过氢键在DNA双链的大沟结合形成三链体,在O2和还原剂DTT作用下,Fe作为催化剂,产生羟基自由基,氧化糖环,切割EDTAFe(Ⅱ)附近的DNA双链.  相似文献   

18.
定义了核苷酸序列的有序片段(X1X2…Xk)n,Xi表示碱基的嘌呤嘧啶分类或强弱键分类,n为重复次数.通过统计分析6.8Mbp资料找出全部k=2,3的有序片段,发现若干有序片段的含量具有较好的进化相关性.  相似文献   

19.
根据人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14基因的核苷酸序列,设计hCD14基因5'端和和3'端的两个引物。以人血中提取的基因组总DNA为模板,利用聚合酶链式反应技术特异性扩增该基因145bp的编码序列。  相似文献   

20.
D—氨基葡萄糖β—萘酚醛席夫碱及其Cu(Ⅱ),Zn(Ⅱ)…   总被引:8,自引:0,他引:8  
报导了D-氨基葡萄糖与β-萘酚醛形成的席夫碱(NG)及其铜(Ⅱ)「Cu(Ⅱ)NG」、锌(Ⅱ)「Zn(Ⅱ)NG」配合物的合成方法,通过元素分析、IR、UV-Vis、^1HNMR、^13CNMR等手段对配体及配合物进行了表征,初步推配合物具有准四面体结构。  相似文献   

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