脑中心房肽基因的表达及盐负荷与脱水对它的影响

心房肽(Atriopeptin,心房利钠肽Atrial Natriuretic Peptide,ANP)是首先自心房中分离纯化的肽类激素,具有舒张血管、促进水盐排出维持体液平衡等重要作用。后来经免疫组织化学等方法证实,部分心房外器官如心室、肺、脑、肾、脾等组织中也有心房肽,但不能完全排出组织中心房肽来自血液循环。只有用分子杂交法证实组织中有心房肽基因转录产物,才能确切肯定该组织是心房肽产生器官。迄今为止对影响心房肽基因表达、心房肽合成和分泌的因素,仍有待进一步阐明,特别是脑组织中心房肽情况所知甚少。本文报道互补RNA探针的制备及用分子杂交法证实脑是心房肽产生器官,并且水盐平衡显著影响它的心房肽基因表达。     

大鼠肺心房肽免疫组织化学研究

心房肽是近年从心房肌中提取的一类多肽。放射免疫研究证明肺内含有心房肽样物质,为了了解其在肺内的存在位置和分布特点,本文用辣根过氧化物酶-抗辣根过氧化物酶(PAP)免疫组织化学方法,观察了大白鼠肺。肺组织经4％多聚甲醛固定,冲洗和脱水后,常规石蜡包埋。切片厚6μm。抗     

α-人心钠素单克隆抗体的制备及其特性的鉴定

α-人心钠素(α-human atrial natriuretic peptide,α-hANP)是人心房肌细胞产生和分秘的一种循环激素,具有强大的利钠、利尿、扩张血管和降低血压的作用。已证明它在高血压、心功能不全、肺水肿等临床疾病的发病机制中具有重要意义。α-hANP多克隆抗体是研究心钠素及其与疾病关系的一种重要工具,但它不能区分人的心钠素与大鼠的心钠素,因而影响心钠素放射免疫测定、免疫组织化学定位及生物活性鉴定等检测手段的特异性和稳定性。自     

大鼠脊髓灌流液中CCK-8含量与电针镇痛个体差异性的关系

电针镇痛具有个体差异性,可将不同针效的大鼠分为优针效和劣针效２个群体,实验选择了优针效大鼠（ＨＲ）和劣针效大鼠（ＬＲ）为实验对象,用放射免疫分析法,对优／劣针效鼠在电针前和电针期间脊髓灌流液中八肽胆囊收缩素样免疫活性物质的含量进行比较。结果表明,劣针效大鼠电针前及电针期间脊髓灌流液中ＣＣＫ－８水平均高于优针效鼠,且针效与电针期间脊髓灌流液中ＣＣＫ－８的含量呈负相关。以上结果说明,电针期间脊髓ＣＣＫ     

大鼠心瓣膜神经肽Y免疫活性神经纤维的分布

早已有人报道,哺乳类心辦膜有肾上腺素能和胆碱能神经纤维分布,新近有人证明,心瓣膜内有P物质免疫反应阳性神经纤维,并认为这些神经纤维从心壁延伸而来,心血管系统有丰富的NPY(Neuropeptide Y,神经肽Y)阳性神经支配,一些作者用放射免疫测定技术证明哺乳动物心脏内NPY含量很高,免疫组织化学研究显示,心壁内NPY阳性神     

大鼠脑NOV蛋白免疫反应阳性神经元的发育

用免疫细胞化学结合图象分析研究了Ｅ８￣Ｐ３００大鼠脑ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元的分布和发育规律。结果显示,出生前大鼠脑末检测到ＮＯＶ蛋白免疫反应阳性神经元。出生后早期较少,而后逐渐增加,出生后１￣２月间出现发育高峰,阳性神经元数量最多,分布范围广泛,阳性信号强。随年龄的增长,阳性神经元数量逐渐减少,分布范围逐渐减少小,阳性神经元主要分布于大脑扣带皮质,纹状皮质,海马,下丘脑,小脑和脑干。结果表明     

小鼠囊胚内细胞团置换

运用显微操作和免疫手术法, 对昆明鼠和C₅₇BL/6鼠的囊胚进行内细胞团置换. 以切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层为受体, 注射免疫手术得到的昆明鼠或C₅₇BL/6鼠的内细胞团, 获得两种重构胚. 一种是由不同昆明鼠个体的滋养层和内细胞团构建的同品系异体重构胚, 共构建192枚. 移植入17只昆明鼠受体后, 生下2只昆明小鼠. 另一种重构胚是由切除内细胞团的昆明鼠胚胎滋养层与C₅₇BL/6鼠胚胎内细胞团构建的异品系重构胚. 对此重构胚的成活率、细胞骨架和细胞数目进行了分析, 说明至少从这3个方面来说, 这种重构胚具有一定的发育潜能. 但将115枚异品系重构胚移植入昆明鼠受体后, 目前还没有后代出生. 说明来自不同个体胚胎的同品系滋养层和内细胞团重组后能够建立细胞连接, 进行信息传递并发育为正常个体, 而异品系重构胚发育能力较低. 这项研究有可能为解决动物克隆中着床率低和胎盘异常等问题提供参考方法.     

大鼠淋巴细胞中存在神经肽降钙素基因相关肽

降钙素基因相关肽(calcitonin gene-relatedpeptide,CGRP)是于1982年在人和哺乳动物神经系统中发现的一种含37个氨基酸残基的神经肽。它具有广泛的生物学效应,对心血管、消化、呼吸、骨胳肌、泌尿、生殖以及免疫等系统均有调节作用。近年来,在免疫细胞中发现了20余种神经内分泌多肽,但迄今为止尚未见CGRP在免疫系统中合成和释放的报道。本文选用大鼠胸腺和肠系膜淋巴结的淋巴细胞,通过放射免疫分析和反相高效液相色谱(HPLC)分析,测定这些淋巴细胞中降钙素基因相关肽免疫活性物质(CGRP-like immunoreactivity,CGRP-LI)的含量,并鉴定其化学性质。     

大鼠胰腺LPLRF-NH_2免疫组织化学的初步观察

LPLRF-NH_2(亮-脯-亮-精-苯丙-胺基)是一种含有5个氨基酸的调节肽,最初由Dockray从鸡脑中分离和纯化,它在哺乳动物胰腺内的分布及生物学活性目前尚无报道。我们曾用放射免疫测定法对它在大鼠胰腺中的含量进行了测定,本文使用免疫组织化学法,对其在大鼠胰腺组织中的分布特征进行了初步观察。 5只150—200 g Wistar大鼠经乙醚麻     

膜片钳法研究镧对心肌细胞钾通道的作用

用全细胞膜片钳技术研究了 La³⁺对大鼠心室肌细胞钾通道的作用机理. 灌流法酶解得到单个大鼠心室肌细胞, 给细胞施一跃迁电压可引出一非钙依赖性电压激活的外向钾电流. 将不同浓度的 La³⁺加入细胞外液后, 非钙依赖性电压激活的外向钾电流明显减小, 且随着浓度增加抑制作用增强. 心肌细胞钾通道电流作为心肌动作电位的主要复极化电流, 受到 La³⁺的抑制作用, 这提示在研究稀土生物效应时应该重视它对心脏功能的影响.     

大鼠延髓最后区内生长抑素mRNA阳性神经元分布的原位杂交组织化学研究

最后区(AP)位于脊髓中央管与第四脑室的移行部位,是机体的一个重要室周器官,具有感受化学性刺激、调节血压、参与呕吐反射及脑-脑脊液间信息交换等多种功能.免疫组织化学研究已证明大鼠最后区内有含有脑啡肽、P物质、胆囊收缩素、神经肽Y、神经降压肽等的神经肽能细胞或纤维终末.但最后区是否存在生长抑素样免疫反应阳性神经元,特别是从分子水平研究生长抑素mRNA(SOMmRNA)阳性细胞尚未见报道,而阐明这一问题可以为进一步探讨和解释最后区的生理机能提供新的形态学资料.     

新型HLA-A2限制的B, C型HBV特异性CTL表位的筛选及鉴定

乙型肝炎病毒(HBV)特异性CD8+ T细胞(CTL)介导的细胞免疫应答在控制HBV感染和病毒清除中至关重要, 已鉴定的T细胞表位绝大多数都来自A, D基因型的乙肝病毒, 而在我国流行的B, C型病毒表位研究较少. 本研究合成重叠九肽肽库, 通过细胞结合试验和体外重折叠实验系统筛选和鉴定B型和C型HBV核心蛋白表位, 发现一个在60位氨基酸由L变异成V(L60V)而产生的新表位HBcAg60-68. 表位肽能在HLA-A2/K^b转基因小鼠体内激发特异性CTL细胞免疫反应. 检测HLA-A2阳性乙肝患者表位特异性CTL证明该九肽序列为体内自然加工的表位, 这为研究HBV感染中特异性CTL免疫应答提供新的依据.     

猪心脏中一些小肽的分离、顺序测定、合成和生物活性鉴定

近年来,许多实验室致力于哺乳动物心房活性肽的分离与功能研究。这些心房活性肽具有显著的利钠,利尿作用,并能扩张血管与降低血压,提示它们可能在调节细胞外液量和保持体内电解质平衡中起重要作用。除了具有上述作用的肽外,Aonuma等从牛心房中分离     

去甲肾上腺素在胚泡着床中的作用

儿茶酚胺是神经递质中一类主要的物质,其中去甲肾上腺素(NE)在生殖的调节中已证明起着颇为重要的作用。据报道,NE广泛存在于大鼠、兔、豚鼠、羊和人的子宫。最近又报道了胎盘绒毛组织有NE的存在。我们实验室利用体外培养,进一步证明妊娠早期入胎盘绒毛不仅能分泌还能合成NE。本研究为探明胚泡着床过程中是否有NE参与,故利用大鼠子宫局部注射NE及其拮抗剂——α-甲基酪氨酸(α-methyl-dl-p-tyrosine methylester,α-MPT),以观察其对大鼠胚泡着床的效应,为进一步研究胚泡着床机理和控制生育提供依据。     

多肽研究(Ⅱ)——α-人心房肽带保护基六肽片段(11—16)的合成

α-人心房肽具有强大的利尿、扩张血管、降低血压等作用。为满足人们对其药理及生理作用的深入研究及临床实验,我们用溶液法成功地合成了该28肽。但在文献[3]报道α-人心房肽带保护基的5个片段合成中,其中1个六肽片段(11—16)的总收率不够理想,这样将会影响到α-人心房肽的大量合成。为此,我们对该六肽片段的合成又作了进一步的研究。首先按原路线改用N-羟基苯骈三唑活泼醋法进行缩合(合成路线见图1)。     

第四脑室底尾侧部NT-LI神经成分的光镜和电镜免疫细胞化学观察

近年来的研究表明,脑脊液与脑组织之间存在着交流信息的途径,即神经-体液回路,其中接触脑脊液神经元构成了这个途径的重要组成部分。已有研究报道接触脑脊液神经元可含有CCK,OXT等生物活性肽。本研究发现大鼠第四脑室底尾侧部室管膜内及周围含有神经降压肽(NT)样免疫反应(NT-LI)神经元胞体、纤维和终末,这为脑-脑脊液神经体液回路提供了新的形态学资料。     

人胎盘绒毛5-羟色胺受体的显微亚微定位及定量研究

用免疫组织化学和原位杂交法对人胎盘绒毛５－ＨＴ受体进行显微亚微定位及量研究。结果显示,胎盘绒毛两层滋养层细胞,绒毛中轴毛细血管内的白细胞既呈５－ＨＴ受体免疫反应阳性又有５－ＨＴ１Ａ受体ｍＲ－ＮＡ杂交信号。     

鸡胚卵黄囊造血期淋巴样细胞E花环、ANAE试验及其形态学观察——(Ⅱ)扫描电镜、透射电镜下

在报告Ⅰ中,叙述了发育48—68h鸡胚血中淋巴样细胞存在能与绵羊红细胞形成E花环及ANAE阳性反应细胞,反映了在胚肝、脾发生之前的卵黄囊造血期鸡胚血中已存在T淋巴细胞阳性标志的细胞。这对认识免疫活性细胞的发生、功能的获得具有重要的意义。本文将叙述总体E花环形成细胞(E_t RFC)的扫描电镜及透射电镜的观察结果。     

心钠素(ANP)免疫学的初步研究

心钠素(Atrial natriuretic peptide,ANP)是de Bold在1981年发现的一种由心肌细胞分泌的多肽纪素,具有利尿、利钠、降血压和抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统的作用.ANP(99～126)由28个氨基酸组成,第105,121位的2个Cys以二硫键连接成1个包括17个氨基酸的环状结构.不同种属的ANP保守性很强,人与大鼠的ANP之间只有1个氨基酸的差异.大鼠心房肽(rat atriopeptin Ⅲ,rAPⅢ)是大鼠体内ANP的1个具有活性的较短的存在形式,由24个氨基酸组成.     

基因工程鼠技术的又一创新

近几年来,科学家已经能用“敲除”鼠染色体上某种特殊基因的方法,产生模拟某些疾病的新品系.遗传学家首先在体外使早期胚细胞的某种基因失活,然后再把这些基因重新加到发育中的鼠胚体内.于是这些胚鼠后代的该基因或者丢失或者丧失其应有的功能. 现在,这类基因工程正在进一步地得到改进与完善.利用新技术,科学家能