铁皮石斛不同生长阶段遗传稳定性的RAPD分析

利用从20个随机引物筛选出来的3个稳定性较好的10碱基引物对已继代12到13次仍然维持在不同生长阶段、来自同一蒴果的铁皮石斛T31种群进行RAPD检测其遗传稳定性,发现不同生长阶段内遗传相似系数较高,在89．36％和100％之间,其中原球茎期的变异比萌芽期、一叶期、两叶期、开花期要显著,但程度都极其微弱．     

铁皮石斛野生居群研究(Ⅳ):RAPD反应体系的构建与优化

为获得铁皮石斛RAPD的最佳反应体系,本文对影响RAPD反应的模板含量、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶浓度、扩增程序及退火温度等多种因子进行了构建与优化.通过各因子的组合研究,我们得到铁皮石斛RAPD反应最适扩增体系是:25μLPCR反应体积,10×Buffer 2.5μL,2.5 mmol/L MgC l2,dNTP 2.5μL(各2.5mmol/L),模板DNA为30 ng,Taq聚合酶1.5 U,随机引物12 pmol,ddH2O 14.2μL.最佳扩增程序:94℃预变性3m in,94℃变性50 s,38℃复性1 m in,72℃延伸2 m in,循环40次;最后72℃延伸5 m in.4℃保存.     

疣蝗5个种群间遗传分化的RAPD分析

利用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术，在ＤＮＡ分子水平上对疣蝗５个种群间的遗传差异进行了研究。在２３个引物中有６个引物出现稳定的扩增带，扩增总带数为６６条，其中５３条具多态性，占８０．３％，平均每个引物８．９条。利用Ｎｅｉ ＆ Ｌｉ相似系数和ＵＰＧＭＡ聚类法对结果进行分析，发现用该法检测到的遗传差异从南向北是连续性梯度差异，因而建议所研究地区疣蝗是一个单型种。     

应用RAPD和同工酶遗传标记鉴别彭泽鲫中的克隆

应用随机扩增多态性DNA(RAPD)和同工酶检测技术检测分析了18尾彭泽鲫，从样品鳍条提取基因组DNA，水平式淀粉凝胶电泳法检测同工酶，结果显示，肝脏GPI、肌肉GPI和肝脏EST3种同工酶均有变异出现，3种同工酶组合后可将实验鱼划分为遗传组成各不相同的8种克隆，6种引物PCR扩增的RAPD电泳图谱与同工酶的划分结果一致。     

疣蝗5个种群间遗传分化的RAPD分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术,在DNA分子水平上对疣蝗5个种群间的遗传差异进行了研究.在23个引物中有6个引物出现稳定的扩增带,扩增总带数为66条,其中53条具多态性,占80.3%,平均每个引物8.9条.利用Nei & Li相似系数和UPGMA聚类法对结果进行分析,发现用该法检测到的遗传差异从南向北是连续性梯度差异,因而建议所研究地区疣蝗是一个单型种.     

水杉自然居群遗传多样性的RAPD研究

用随机扩增多态性方法对四川、湖南、湖北交界处的２７个水杉样本进行了基因组ＤＮＡ多态性分析．１１个随机引物共获得ＲＡＰＤ谱带１２１条,多态性谱带占５３％．聚类分析结果表明：水杉个体间的遗传距离与这些个体的地理分布相关,即相同产地个体间的遗传距离较小,不同产地个体间的遗传距离较大．与松柏目其它类群相比,水杉居群的遗传多样性程度高于银杉（３２％）,而在所处的大类群中则处于中等水平．初步结果表明,尽管孑遗物种水杉的自然种群的目前分布范围和个体数目非常有限,但是它仍然保持着中度的遗传多样性水平．可推测,孑遗植物的遗传多样性水平具有一定的变异范围     

铁皮石斛的组织培养及快速繁殖

铁皮石斛的外植体在MS 6BA0.5 mg/L-2 mg/L NAA0.25 mg/L~0.4 mg/L或2,4-D0.25 mg/L培养基中能诱导分化丛生芽3~5倍。原球茎分化丛生芽10~15倍。壮苗后在1/2MS NAA0.2 mg/L~0.5mg/L诱导生根,生根率达90%以上。     

松枯梢病菌RAPD分子水平遗传距离分析

对来自中国、美国、英国、南非和智利的松枯梢病菌23个菌株进行RAPD分析。用12个引物共扩增出135个RAPD标记,其中多态性标记占96.3%。各菌株间的Nei相似系数UPGMA法聚类结果表明,国内外23个菌株可大致分为3个类群:来自智利的CWS41与所有菌株的遗传关系最远;来自中国的F2和J2次之;其他的国外菌株与国内菌株的遗传关系则较近。此次实验未将来自美国的B型菌株与其他菌株区分开。     

铁皮石斛种子试管苗的大量繁殖

本文报导了铁皮石斛种子试管苗的产生及大量繁殖,并介绍了一种施加营养液代替“转瓶”的简便方法。     

利用RAPD技术研究方形臂尾轮虫(Brachionus quadridentatus)种群遗传结构

尝试利用RAPD技术对武汉东湖水果湖区和郭郑湖区中的方形臂尾轮虫的DNA进行种群遗传结构分析,结果显示其群体内遗传多样性所占的比例要远远高于群体间遗传多样性所占的比例,2个湖区之间形成了由遗传分化较大的基因型个体组成的随机分布的种群遗传结构.     

不同基质和容器对铁皮石斛生长和生理特性的影响

以树皮和水苔为栽培基质,黑色营养杯、白色营养杯和穴盘3种容器进行铁皮石斛组培苗移栽生长研究,通过植株形态、光合色素、蛋白质以及多糖含量等生理特性变化,筛选出适宜铁皮石斛组培苗生长的栽培基质和容器.结果表明:树皮基质能显著提高铁皮石斛的鲜质量、干物质质量分数、株高和节间距等生长指标,提高铁皮石斛叶片和茎干的蛋白质质量分数;而水苔基质能显著提高叶片中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素质量分数以及类胡萝卜素的质量分数,促进铁皮石斛多糖质量分数的提高.3种容器中以6cm×6cm规格的黑色营养杯最有利于铁皮石斛植株的生长和多糖的形成.     

笼养蓝孔雀两个种群的随机扩增多态DNA分析

利用随机扩增多态DNA技术对英吉利孔雀场和广州动物园两个蓝孔雀Pavocristatus种群进行了分析。用 2 3个随机引物 ,共获得 173和 15 7个扩增片段 ,多态率分别为 47 40 %和 9 5 5 %     

几种动物RAPD指纹图谱反应条件的分析

用随机排列碱基顺序的寡核苷酸引物，对蚕、鱼、蛇、家猪等动物的基因组ＤＮＡ扩增，获得了这些动物的随机扩增多态ＤＮＡ指纹图谱，对影响扩增结果的几个因素进行了分析，对动物随机扩增多态ＤＮＡ反应的适宜条件进行了讨论。     

六种蝗虫基因组DNA多态性的RAPD标记研究

运用随机扩增多态 DNA技术对斑翅蝗科 Oedipodidae中三属六种蝗虫基因组DNA进行了多态性比较 ,共扩增出 2 2条特异性片断 ,分子量大小为 650～ 1 990 bp之间 ,并根据各种间片段共享度构建了 UPG聚类关系图 .研究结果表明 ,大垫尖翅蝗和甘蒙尖翅蝗的片段共享度为 0 .375;红翅皱膝蝗和鼓翅皱膝蝗的片段共享度为 0 .2 86;亚洲小车蝗和黄胫小车蝗的片段共享度也为 0 .2 86     

适于RAPD分析的三种基因组DNA提取方法比较

通过对 3种基因组DNA提取方法的实验比较 ,找到了一种既能够满足RAPD实验要求 ,又简便快捷、经济的基因组DNA提取方法 ,经RAPD试验检测与电泳结果分析表明 :DNA扩增效果良好     

黄连基因组DNA提取与RAPD-PCR体系的正交优化研究

采用改进的SDS方法提取黄连基因组DNA,利用正交设计研究方法建立黄连RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出黄连RAPD的最佳方案为:25μL反应体系中包括dNTPs0.12mmol.L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA 40ng,Taq酶1U,Mg2+2mmol.L-1,10×buffer缓冲液2.5μL,其余部分用无菌超纯水补平.PCR扩增循环为95℃3m in,38℃1m in,72℃2m in 1次循环;94℃1m in,38℃1m in,72℃2m in,45次循环,最后72℃延伸10m in.     

马氏珠母贝与解氏珠母贝的随机扩增多态DNA分析

用OPM组20种碱基随机引物对采自海南洋浦的马氏珠母贝（Pincada martensii）和解氏珠母贝（P.chemmitri）天然群体进行RAPD分析,其中6种引物扩增有效,这6种引物对马氏珠母贝和解氏珠母贝的总扩增带数分别为52条和58条。每一引物的扩增带数为3～16条,同一引物对两种贝类的扩增带数不同（OPM19B除外）,对两贝类的扩增带型也有较大差异。群体内的各个个体（实验个体为10个）RAPD扩增带谱全部呈多态,表明在同一群体中,各个体存在着明显的个体特征带,由于样品数量及引物数均少,2种贝类各自种群的共同特征尚未能确定。     

极端嗜热纤维素分解菌分子特征

从云南邦拿掌温泉中采集样品，经过多次富集、筛选，最后分离出6株高温严格厌氧纤维素分解细菌，通过随机扩增多态性DNA(RAPD)分析，研究了这6株形态、生理、代谢特性相似的高温严格厌氧纤维素分解茵的遗传多样性，并根据实验统计数据作出6株茵的亲缘关系图，同时对产酶活性较高的B7细菌进行16SrDNA序列分析，确定了其系统分类地位。