黑麦B染色体显微切割和微克隆

显微分离出两条黑麦Ｂ染色体,经蛋白酶Ｋ处理,Ｓａｕ３ＡＩ酶切后,用ＬＡ－ＰＣＲ（ＬｉｎｋｅｒＡｄａｐｔｅｒＰＣＲ）方法进行扩增,得到０．２～２ｋｂ的ＤＮＡ片段．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析结果表明,此扩增产物来源于黑麦Ｂ染色体．将部分ＰＣＲ产物克隆到ｐＵＣ１９载体中,获得了５０００个克隆．为构建Ｂ染色体ＤＮＡ文库奠定了基础     

SLuCUT-A全自动激光显微切割系统植物染色体切割的研究

SLuCUT-A全自动激光显微切割是目前比较先进高效的染色体微切割、微分离和微收集系统。为使高精尖仪器设备在植物染色体遗传分析中广泛应用,此研究利用SLuCUT-A全自动激光显微切割系统对普通小麦"中国春"和中间偃麦草染色体进行了微切割、微收集和微克隆,并且以回收到的切割染色体(或染色体片段)为模板进行了DOP-PCRDNA扩增。     

激光切割植物染色体的研究

文章探索了短脉冲激光与微细玻璃针相结合对黑麦染色体进行切割、分离的技术。该技术具有操作简便,节省经费,容易掌握,能减少染色体DNA的损伤,且可对整个细胞进行分离的优点,有利于促进染色体或染色体片段分离技术在进行DNA扩增,建立相应的DNA文库方面的普及和应用。     

水稻染色体微切割及4号染色体酶解片段的扩增

通过细胞分裂的同步化,低渗,酶消化,瞬间固定和涂片等制片技术,快速制备水稻根尖体细胞染色体标本。该方法制备出的染色体标本,杂质少,染色体分散程度好,满足了染色体微切割用片的要求。染色体微切割和ＰＣＲ扩增技术,获得了水稻第４号染色体ＤＮＡ文库。     

水稻染色体的显微分离与克隆

对水稻染色体识别、显微分离与切割、PCR体外扩增和微克隆进行了研究 .利用改进的显微切割装置 ,可以在 1 0 0×油镜下进行染色体分离与微切割 ,不仅解决了水稻染色体的识别和显微分离的困难 ,而且可使染色体特定区微切片段缩小到 7Mb级 ;利用 SUP-PCR可使 fg级水稻染色体 DNA扩增到 μg级 .电泳检测结果表明 ,扩增片断在 80～ 60 0 bp左右 ,经与 p UC1 9连接 ,转化大肠杆菌 DH5a,一次分离的单条水稻染色体可以获得 9×1 0 4克隆 ,一个 7Mb级片段可以获得 3× 1 0 4克隆 ,经分析 ,插入片段大小在 80～ 50 0 bp范围 .该方法为直接从水稻单条染色体或染色体特定区 DNA文库中筛选分子标记奠定了基础 .     

应用PCR—SSCP技术从显微切割的人染色体17q11—12探针池批量分离单拷贝片段的研究

将ＤＮＡ单链构象多态（ＳＳＣＰ）检测的原理，应用于“显微切割的人染色体１７ｑ１１—１２探针池”批量分离单拷贝片段，取得了很好效果。从筛选出的７４个次级单拷贝中有效地鉴定出３７个非同源的单拷贝片段。这比传统的仅限于长度比较而确认的非同源单拷贝片段（１２个）多出２５个．其中部分已经ＤＮＡ测序证实。结果提示：采用ＳＳＣＰ技术区分相似分子量单拷贝片段的同源性，可显著地提高从“显微切割探针池”分离和克隆非同源单拷贝片段的效率。本文还将一部分单拷贝片段作为探讨，与人基因组ＤＮＡ的限制性片段作Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，结果均只显示单一杂交带，说明单拷贝ＤＮＡ片段的结论是可靠的。     

石蒜单染色体的显微分离及体外扩增

建立了石蒜单染色体的分离及体外扩增的方法。石蒜根尖经卡诺固定液固定后，再用果胶酶和纤维素酶酶解处理，制得标本，在倒置显微镜下，用自制的毛细管针挑取目的的染色体。将分离的石蒜染色体放入0．2mLEppedorf管中，经蛋白酶K处理后，进行DOP－PCR扩增，获得DNA片段。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物的长度大约为100－5000bp。此法为构建石蒜单染色体基因组库和筛选其特异性探针奠定了基础。     

一种改善激光切割表面质量的预估控制方法

激光切割质量的优劣是指切割尺寸精度高低和切割表面质量的好坏,而切割表面质量又以切口宽度及切口表面粗糙度、热影响区的宽度、切口断面的波纹和切口断面或下表面有无挂渣等为衡量指标.为进一步提高激光切割表面的质量,通过对激光切割的加工件表面轨迹进行数据采集和分析,提出了随加工物件平整度动态调整激光切割喷嘴位置的系列预估控制算法,以达到补偿提高切割精度的目的.并利用计算机仿真实验,验证了该方法能够有效地修正实际切割轨迹,从而提高激光切割的精度和质量,证明该方法可行.     

单纯形法的一种改进

为减少转换次数,节省计算时间及工作量,给出了线性规划问题单纯殂法的一种改进方法。     

一种改进的频繁集挖掘方法

为了有效解决关联规则挖掘中最关键的一步即频繁集的产生,构造了一个新的频繁树结构,以存储数据库中频繁项的信息,且基于该频繁树给出挖掘频繁集的算法．该方法能够避免重复扫描数据库,避免产生大量的候选集,大大地减少搜索空间．     

一种改进的模糊相似选择方法

本文对由“距离”比所决定的模糊相似选择方法作了一定的改进,使其能直接根据海明距离的大小对元素按优劣程度排序,从而能够减少大量的计算工作量。     

一种改进的简单一步彩虹全息法

本文提出一种改进的简单一步彩虹全息法，根据光的衍射理论，分析采用狭缝光源照明物体记录彩虹全息图的可能性，并讨论了彩虹像的单色性、色模糊、线模糊、分辨率及视角．最后给出实验结果．这种方法具有分辨率高，光能利用率高和操作简单等特点．     

计算子空间载荷响应的一种改进方法

多台不同转速的压缩机同时在一个管系的不同位置工作时,由于流体脉动产生的激振力属于子空间载荷类型。本文介绍一种求这类子空间载荷响应的改进方法,它是Wilson(1982)思想的推广;同时由于采用单个向量迭代的方式,所以比Pnild(1985)方法的计算工作量少,并便于编制程序。文中导出了它的基本计算公式,并进行了精度分析和给出了实用的载断准则,文后分析了一个实例。     

改进的迁移子结构方法

把迁移子结构方法推广应用于子结构之间具有不同对接方式的情况,从而扩大了该法的适用范围。几个算例验证了它的可行性和有效性。     

二茂铁乙炔合成方法的改进

二茂铁乙炔是合成一些二茂铁衍生物的一种重要中间体,由于二茂铁相对于苯环具有较大的空间位阻,所以它的制备不同于常见的芳香族乙炔的制备,相对来说比较复杂.本文以二茂铁为原料,通过三步合成了二茂铁乙炔.     

5—硝基—8—羟基喹啉合成的新方法

以—8羟基喹啉为原料,以盐酸和碳酸盐为主要辅助原料、以草酸为氧化阻止剂制备5—硝基—8羟基喹啉的一种新方法。