侵染油菜的黄瓜花叶病毒的初步研究

ＣＭＶ是侵染油菜的主要病毒之一。１９９５年武昌采集到一种（命名为ＣＭＶ－ＢＷ）引起油菜花叶畸形的样品，引起苋色藜局部枯死斑。ＣＭＶ－ＢＷ和ＣＭＶ－ＣＡ（花生株系）抗血清起强阳性反应，与同一病毒性的花生矮化病毒（ＰＳＶ）抗血清起阴性反应。基于以上性质，ＣＭＶ－ＢＷ经鉴定属于黄瓜花叶病毒。通过应用生物学（寄主反应和温度敏感性）实验与ＣＭＶ－Ｓ、ＣＭＶ－Ｄ对比，参试的分离物在３２℃下引起昆诺藜（Ｃ．ｑｉ     

草酸诱导甜瓜对南瓜花叶病毒的系统抗性

用草酸涂抹甜瓜叶片后,显提高了甜瓜对南瓜花叶病毒（ＳｑＭＶ）的系统抗性。最后处理的草酸浓度为３０ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１。挑战接种试验证明,草酸处理植株的感病症状显轻于对照植株,病毒的相对质量尝试仅为对照值株的４％,草酸处理植株的过氧化物酶活性为对照植株的６倍,且诱导出３种新的过氧化物酶同工酶;木质素相对质量浓度亦提高了８２．９％。结果表明,草酸对提高甜瓜过氧化酶活性和木质素相对质量浓度与诱导甜瓜对     

黄瓜花叶病毒研究进展

介绍了近年来对黄瓜花叶病毒(CMV)在生物学特性、血清学特性、基因组研究、卫星RNA以及该病毒的防治等方面的最新研究进展.此外,由于黄瓜花叶病毒株系众多,其株系的划分和分类对研究致病机理和各个株系之间的关系具有重要的作用,重点介绍了根据生物学、血清学以及最新的分子生物学研究结果对黄瓜花叶病毒株系的不同分类方法.     

一种新型手性含苯并噻唑基团的β-氨基酸衍生物诱导烟草抗TMV作用的研究

通过半叶枯斑法筛选得到一个抗TMV具有较好活性的新型手性含苯并噻唑基团的β-氨基酸化合物A,western blot实验验证该化合物喷雾处理烟草叶片可诱导烟草获得对TMV的抗性。将该化合物手性拆分后,将相同浓度的不同构型化合物处理烟草K326,并测定体内防御酶系的变化。结果表明:所有构型的化合物处理烟草均能使宿主体内的PAL、POD、SOD活性不同程度提高,表明化合物可诱导烟草对TMV的抗性,提高烟草的免疫能力,同时不同构型对活性的影响不明显。     

黄瓜离体雌核发育的过程及其早期生化变化研究

本首次研究了黄瓜离体雌核发育的形态及细胞学过程，以及培养早期生理、生化的变化．结果表明：雌核发育在培养的前6d即已开始，24d时形成胚状体，40d时形成成熟的胚状体．雌核发育的前6d，外植体POD酶活性急剧上升，SOD先上升后下降，Q酶活性明显上升但低于非雌核发育，Ca^2 -ATP酶和Mg^2--ATP酶活性变化较小且均低于非雌核发育．雌核发育的外植体IAA和ABA含量明显下降，iPA，Zr，CA3和CA4含量均有所下降并明显低于非雌核发育外植体．     

三类因子在烟草抗赤星病诱导中的作用

试验采用6种诱导接种法和叶片挑战接种法进行测定,结果表明,3种化学物质、非病原细菌的3个菌株和赤星菌6个菌株均可程度不同地诱导烟草对赤星病的系统抗性。化学因子中以IRD1抗性诱导效果最好,抗性诱导效应为54.5％,细菌因子以菌株C_2效果最好(39.2％),赤星菌株以TBA33最好(46.3％)。在茎部注射、叶部注射、伤口接种、灌根、叶面喷洒、叶面悬滴6种诱导接种方法中,化学、细菌因子以叶面喷洒和灌根效果较好,赤星菌株以叶面悬滴和叶面喷洒效果较好。     

烟草植株间传递的抗病化学信号物质研究

用Tenax作为吸附剂,通过吸附,热脱附的方法和GC－MS分析,测定了烟草幼苗在接种烟草花叶病毒（TMV）后产生的挥发物的组成变化,发现了多种与烟草感病过程密切相关的化合物,并对其中的化合物水杨酸甲酯（MeSA)进行了定量研究;实验表明,TMV接种后,MeSA的释放量从感病前低于1ng/(株．3h)增加到30ng/(株．3h)的水平,并能维持数天,经MeSA诱导处理的植株与对照植株相比MeSA的释放量平均增大了4倍,接种72h后枯斑平均直径减小了61％,表明该化合物是一种植株间传递的抗病化学信号物质。     

苜蓿花叶病毒RNA2 3‘端cDNA转基因烟草植株的抗病性分析

将人工合成的与苜蓿花叶病毒（ALMV）RNA2互补的寡核苷酸进行放射性同位素（γ-p^32ATP）标记，制备成探针。用ALMV攻毒转基因烟草和未转基因烟草，提取总RNA，用上述探针分析植珠体内病毒增殖情况，做抗病性分析。实验表明：转基因植珠（李颖同学做的转基因植株）有较强的抗病性，而未转基因的对照株却无抗病性。     

烟草花叶病毒单克隆抗体的制备和鉴定

经工程菌表达与纯化,得到了纯度95%以上的TMV-CP-F重组蛋白,配合提取的TMV天然病毒颗粒作为免疫原.通过杂交瘤技术获得了14株能分泌特异针对TMV外壳蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株.经鉴定14株细胞所分泌的抗体亚类为IgG1型,抗体轻链均为κ型.经ProteinA一步法亲和层析纯化所得抗体经鉴定相对分子质量在149.36～157.23 ku之间,抗体纯度在80%以上.经间接ELISA测定,14株抗体均与TMV-CP重组蛋白和TMV病毒有良好特异性反应.所制备的抗TMV抗体的特异性高,可用于与其相关的免疫检测研究和应用.     

壳聚糖混剂的诱抗性研究

研究了壳聚糖混剂对于番茄幼苗各种防御酶系——苯丙氨酸解氨酶(PAL),过氧化物酶(POD),多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)的影响.结果表明:经壳聚糖混剂作用过的番茄幼苗中各防御酶系均有酶活高峰提前出现的情况,从而提高植株的抗逆性,阻止病原菌入侵.     

不同温度条件下氟乐灵对茄子黄萎病的诱抗效果

研究了诱抗剂氟乐灵在不同温度条件下对茄子黄萎病的诱抗效果.结果表明,氟乐灵对茄子黄萎病具有较好的诱抗效果,持效期在24d以上.温度对诱抗效果和持效期具有显著影响,氟乐灵在20℃和25℃诱抗防效较佳,持效期长;而30℃时诱抗效果较差,持效期较短.控制适宜的温度可以提高诱抗剂的防效,并延长持效期.     

青霉菌灭活菌丝体对烟草生长及黑胫病防治的影响

我们在云南的两个地区进行了田间小区试验以检测青霉菌灭活菌丝体(Dry mycelium of Penicillium chrysogenum DM)作为有机肥,在促进烟草生长及防治烟草黑胫病方面的作用.结果表明青霉菌灭活菌丝体(DM),可以显著提高烟草的叶面积、茎围和产量,但留叶数和株高并无显著差异.而且在两个试验地点DM处理组对烟草黑胫病都具有很好的防治效果,防治效果最高可达63.8%.病原菌拮抗试验表明,青霉菌灭活菌丝体(DM)对两种烟草黑胫病病原菌菌株并没有拮抗作用,所以DM的防病作用并不是通过抑制病原体的生长和繁殖,而是诱导烟草病原体对病原体产生抗性发挥作用的.     

外源亚精胺对黄瓜幼苗盐胁迫逆境的诱抗作用机理

为明确外源亚精胺对黄瓜幼苗盐胁迫逆境的诱抗作用机理,采用根部基质注射结合叶面喷施的诱导方法,研究了不同质量浓度(50,100,150,200,250 mg.L-1)外源亚精胺对200 mmol.L-1NaCl胁迫条件下黄瓜幼苗生长及其生理生化特性的影响。结果表明:外源亚精胺各质量浓度处理能够显著降低幼苗盐害指数,最高降低幅度达28.7个百分点,抗盐效果最高达47.5%;显著提高幼苗茎粗、株高、第3真叶长、展开叶数、全株鲜重、全株干重及壮苗指数,壮苗指数最高提高幅度达26.3%;显著增强叶片过氧化物酶、过氧化氢酶活性,但对超氧化物歧化酶活性表现抑制作用;50~150 mg.L-1处理能够显著降低叶片丙二醛含量和电解质渗出率;200~250 mg.L-1处理能够提高叶片游离脯氨酸含量;对可溶性糖含量的作用比较复杂,但在盐胁迫后11 d各处理对可溶性糖含量均有显著的提高作用。说明施用适宜质量浓度的外源亚精胺,可以提高黄瓜幼苗的抗盐能力,可以减轻和缓解盐伤害。     

钙对热激诱导黄瓜幼苗抗冷性的影响

用CaCl2和钙的螯合剂ZGTA浸种，研究了热激诱导黄瓜幼苗抗冷性过程中的钙效应.结果表明：热激处理能够提高冷胁迫条件下黄瓜幼苗的主要抗氧化酶SOD，POD和CAT活性，降低膜脂过氧化产物丙二醛的含量和质膜透性，因而增强了黄瓜幼苗的抗冷性；钙处理可增强热激诱导这一效应，但由钙的螯合剂EGTA处理的效果则相反，这说明钙参与了热激诱导黄瓜幼苗抗冷性的调控.     

基于正则极限学习机的烟草病毒病预测

为了对烟草病毒病的病情指数进行建模研究,采用了一种正则极限学习机算法：通过引入惩罚因子来权衡结构风险与经验风险的大小,进一步增强网络的泛化性．针对烟草病毒病的众多影响因素,采用灰色关联度算法选取主要影响因子．使用某地1984—1995年病情资料、相关虫情和气象资料,经过数据挖掘、建模仿真,将正则极限学习机应用于烟草病毒病预测中,效果较好,对烟草病毒病的防治具有指导意义．     

近红外光谱分析技术在烟草化学分析上的应用研究

应用傅立叶变换近红外漫反射光义,对具有代表性的300个烟草样品建立了近红外光谱与总糖、还原糖、尼古丁、总氮4种主要成分含量间的关系模型,经分析样品检验模型,结果表明,各成分近红外预测值与实测值之间的平均相对误差均小于5％,近红外光谱分析技术可初步用于烟草常规化学成分的快速定量分析。     

复制酶基因介导的抗病毒烟草植株的研究

将构建的携带烟草花叶病毒（ＴＭＶ）５４ＫＤ蛋白基因及黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）３’端缺失０．９Ｋｂ的１．６Ｋｂ片断复制酶基因植物表达载体ｐＢＩＣＴ，导入根癌农杆菌３１１ＳＥ系，用叶圆盘法转化烟草，在含有卡那霉素的选择性培养基上诱导生芽、生根，得到２８株成活苗．移入大田后，随机挑选４．株植物，提取植物总ＤＮＡ，经ＰＣＲ扩增、Ｓｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测，结果４株植物中都有复制酶基因的整合，而未经转化的对照组植物则没有．转基因植株在大田试验中表现了良好的抗烟草花叶病毒及黄瓜花叶病毒能力．