Ce(Ⅳ)化学发光反应体系测定酚妥拉明

酚妥拉明的测定在临床上具有重要意义,它可以用于治疗血管痉挛疾病,现发展用于治疗阳痿,测定酚妥拉明,中国药典规定用重量法,迄今文献中尚未见用化学发光方法测定酚妥拉明的报道实验发现,在酸性条件下,酚妥拉明与Ce(Ⅳ)反应产生化学发光,Rh6G可以增强其化学发光据此建立了一种简便、快速的用化学发光测定酚妥拉明的方法.     

酵母双杂交系统检测金属硫蛋白(MT)间的相互作用

金属硫蛋白-3(MT-3),又称神经生长抑制因子,为金属硫蛋白家族中惟一具有生物活性的成员。为了验证其在细胞内是否形成二聚或多聚体,构建酵母双杂交系统用于检测。结果表明：MT-3与MT-3之间在酵母细胞内能发生相互作用,进一步用酵母双杂交实验还表明MT-3与MT-1间也存在弱相互作用。由此提示,在机体细胞中,MT-3可以以同源或异源二聚体的形式存在。     

关于放射碘化胰岛素(I~(125)或I~(131))的制备

为建立放射免疫法测定胰岛素的含量和放射受体法测定胰岛素的活性,以便代替古老的小白鼠惊厥法和繁杂的兔血糖法,为胰岛素生产工艺改革和糖尿病的临床研究提供条件,首先必须制备高比强度的标记胰岛素,即在胰岛素分子上标记一种放射性物质。胰岛素是一种蛋白激素,在构成胰岛素分子中的酪氨酸的苯环可被碘化,且不影响其生物活性。我们采用国产的I125或I131制备成高比强度的碘化胰岛素,用于放射免疫或放射受体测定。 一、所用试剂及其配制 1. NaI125或 NaI131无载体 2.胰岛素溶液用0.05M pH7.4 Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液配制成每毫升含1毫…     

玻片凝聚胺交叉配血方法学评价

为评价玻片凝聚胺法交叉配血的安全性、准确性,对解放军总医院11例不规则抗体阳性的输血患者同时进行玻片凝聚胺法和经典凝聚胺法交叉配血。比较两种方法配血后主、次侧凝集强度。两种配血方法中,11例次配血结果中均出现主侧凝结,玻片凝聚胺法的凝集强度要弱于经典凝聚胺法,但无假阴性出现。说明玻片凝聚胺法可以检测出常见不规则抗体引起的配血不合,可用于特殊条件下的交叉配血。     

螺旋藻藻蓝蛋白提取及稳定性试验

藻蓝蛋白可用于配制化妆品及各种天然食品或荧光探针标记．本研究用氯化钾溶菌酶法或冻融法破碎螺旋藻细胞壁,盐析,提取藻蓝蛋白,并对其理化特性进行了测定．表明酶法破壁适应于大量藻蓝蛋白制备,冻融法只适应于小量制备．提取率为１３％左右,提取藻蓝蛋白在４０℃以下及ｐＨ４．０～８．５之间表现稳定,４５℃以上有变色现象,荧光性减弱,糖溶液可提高藻蓝蛋白对热的稳定性,光照对藻蓝蛋白影响较小     

糖脂康多糖的分离与纯化研究

目的:研究糖脂康多糖的提取、分离与纯化方法,并筛选出糖脂康多糖脱蛋白、脱色的最佳方法。方法:采用水提醇沉法提取分离糖脂康多糖,以提取多糖物质多糖损失率、蛋白质去除率为测定指标,分别考察不同实验方法对糖脂康多糖脱蛋白、脱色的影响。结果:三氯乙酸脱蛋白法为糖脂康多糖脱蛋白的最佳方法,活性炭脱色法对糖脂康多糖的脱色效果优于过氧化氢脱色法。结论:糖脂康粗多糖的纯化,脱蛋白、脱色方法的优化为进一步研究糖脂康多糖的生物活性提供了基础。     

基因工程法制备15N标记的蛋白质样品

为了用多维核磁共振方法解析蛋白质溶液构象奠定基础,在用基因工程法使天花粉蛋白在大肠杆菌中获得高效表达的基础上,用１５Ｎ标记了这种蛋白质并通过亲和层析方法进行纯化得到电泳纯的蛋白样品;测定了此蛋白对中期妊娠小鼠的止孕效应;在核磁共振波谱仪上测得了此蛋白的１Ｈ－１５Ｎ异核相关谱（ＨＳＱＣ）。结果表明,上述方法可以用于制备１５Ｎ标记的蛋白质样品。     

四氮杂环蕃分子识别及红外光谱研究

目的合成四氮杂环蕃CP44并对二茂铁或氮杂环化合物进行分子识别,研究其红外吸收光谱。方法用高度稀释法合成了1,6,16,21-四氮杂[6．1．6．1]对环蕃CP44,在酸性条件下与具有生物活性的咪唑类或二茂铁氮进行反应,IR和MS对包结物的结构进行测定。结果得到7个主-客体包结物。结论由IR中N-H伸缩频率可以研究四氮杂环蕃与含氮杂环的分子识别行为。     

生物活性环糊精衍生化蛋白质的合成

合成了2种新型的环糊精衍生化蛋白质.将牛血清白蛋白和胰酶分别与β-环糊精以乙二醇二缩水甘油醚为交联剂,在pH=8.7的硼酸缓冲液中进行反应,反应温度为37 ℃,反应时间为4 h,反应后的衍生化蛋白质具有生物活性.产物应用红外光谱及质谱进行结构测定.实验证明,这种新型的衍生物可以作为手性选择剂用于手性化合物的分离.     

用改进的CTAB法提取肉苁蓉基因组DNA

研究了肉苁蓉(Cistanche deserticola)基因组DNA的分离提取方法.由于肉苁蓉组织内含有大量的多糖类及蛋白等物质,严重干扰DNA的抽提,在对其进行若干预处理之后,采用改进的CTAB法提取基因组DNA.根据外观、琼脂糖凝胶电泳检测、D260/D280的测定和PCR扩增表明,用改进的CTAB法提取肉苁蓉基因组DNA,所得DNA无论是纯度还是完整性都比较好,可以直接用于RAPD反应体系.     

应用放射受体法测定胰岛素效价的初步探讨

一般测定胰岛素生物活性的方法主要通过生物检定,利用小白鼠惊厥法或兔血糖法,但这两种方法操作繁琐,误差范围较大不能满足生产测定的需要。我们遵照毛主席“教育必须为无产阶级政治服务,必须同生产劳动相结合”的教导,克服重重困难,与有关单位协作,开展了用放射受体法定量测定胰岛素生物活性的工作,摸索了试验条件,现将放射受体法的基本原理,实验方法和初步结果分述于下: 一、基本原理 目前比较多的工作认为蛋白质多肽激素类的作用首先与靶细胞膜上的特异受体相互作用,传递信息,引起细胞内一系列化学传递和转换,最后产生激素引起的生理效应…     

植物环肽

首先简要地介绍了植物环肽的定义、研究历史、结构分类、生物活性与生物功能等,最后以石竹科类型环肽和环蛋白为例详细介绍其检测方法、结构研究方法、化学合成或生物合成等.     

一种蛋白-药物结合常数的测定方法

目的建立一种蛋白-药物结合常数的测定新方法。方法以固定化牛血清白蛋白为固定相,磷酸盐缓冲溶液为流动相,获得不同进样量下药物的液相色谱保留参数,以溶质进样量与保留值的关系方程进行拟合,计算蛋白-药物结合常数(直接进样法)。结果测定了咖啡酸(CA),汉黄芩素(WO)和木犀草素(LU)3种药物与固定化牛血清白蛋白(BSA)在人体生理条件(37℃,pH7.40)下的结合常数,其数值高于竞争置换法,但与相关文献数据接近。结论直接进样法可作为一种新方法用于研究蛋白-药物的相互作用。     

以仿生思想造出新型骨修复材料 临床骨修复有了新方法

正我国每年由各类骨疾病、交通伤等意外伤害引起骨组织缺损或坏死的病人有数百万之多,骨修复材料有着巨大的临床需求。华南理工大学教授王迎军及其团队以仿生思想为指导,制备出磷酸钙类生物活性陶瓷骨修复体,并实现临床应用。其成果"磷酸钙类生物活性陶瓷和骨修复体模板法仿生制备新技术及临床应用",也获得了2013年度国家技术发明奖二等奖。     

整数规划的凝聚函数法

传统的代理约束方法虽可加速分支定界法或割平面法的求解速度,但往往会扩大原问题的可行域,不能保证得到原问题的最优解.考虑到代理约束乘子的取值特点,利用极大熵原理对传统代理约束方法进行了改进,给出求解整数规划问题的凝聚函数法,并研究了其理论可行性.当参数取适当大时,该方法得到的问题与原问题完全等价,从而可以通过该方法得到原问题的最优解,且无需对偶计算.算例结果阐释了凝聚函数法的有效性和可行性.     

乳铁蛋白的分离纯化方法研究

牛初乳中含有板丰富的生物活性糟质,是提取和利用乳饺蛋白的曩适来源之一。乳铁蛋白的分离纯化方法较多,本文概速了盐析和有机溶剂法,超滤法、离子交换色谱法,隶和色谱法,吸附色谱法,固定化单克隆抗体法和混合模式扩张床吸附法等,扰其工业化生产的前景进行了分析。     

水泥-粉煤灰系统中粉煤灰水化活性的定量测定

前言粉煤灰是一种具有细分散作用和火山灰作用的物质,它可以改善混凝土的使用性能、降低水化热、改善其防水性能和增加混凝土的长期强度。因此,粉煤灰正越来越多地用于生产粉煤灰水泥或用作混凝土的配合料以代替部分水泥。所以,在水泥一粉煤灰系统中粉煤灰水化活性的测定是十分有意义的。目前,国内外测定粉煤灰活性的方法归纳起来有以下几种:石灰吸取法、活性组分浸出法、量热法及电导率法、苏联国家标准法、ISO法和强度实验法。这些方法有的很难反映出粉煤灰的真正活性,有的虽然反映出粉煤灰具有活性,但不能     

植物分子的电分析化学研究(IX)——马钱子碱的电分析化学行为及含量测定

由于马钱子碱和硝酸反应后生成的产物具有电化学活性,因此,可以微分脉冲极谱法对马钱子碱进行测定.选择了马钱子碱氧化的最佳条件,并用循环伏安法研究了其氧化产物的电化学行为.微分脉冲极谱法的方法灵敏度高,可用于测定植物样品中马钱子碱的含量.     

吸管法测定抗生素生物活性研究

以大蒜素对土壤细菌、真菌的敏感性测定为例,研究了采用一次性无菌塑料吸管代替牛津杯测定抗生素生物活性的可行性,结果表明:吸管法可以测定抗生素的抑菌谱、最小抑菌浓度、生物效价,克服了牛津杯在反复使用中由于难于清洗造成的抗生素残留与交叉污染问题,方法相对简便、准确,试材来源广泛、价格低廉,可供大中学校师生进行相关生物学教学实验、科学研究时选用。     

分光光度法测定双组分蛋白含量的波长选择

分光光度法测定多组分蛋白含量,快速简便,极具应用价值,但其测定波长的选择缺乏研究与指导。本研究以牛血清白蛋白和牛血红蛋白的混合样品为研究对象,对双波长分光光度法测定波长的选择进行了分析。结果显示:BSA与Hb的相互干扰程度受测定波长的影响显著;采用两组份最大吸收波长为测定波长,或以BSA等吸收波长作为测定波长,又或单纯选择单组份标准样品相关系数较高的波长为测定波长,均不能获得令人满意的测定结果。以RSDBSA+RSDHb最小为判断依据,获得的最佳测试波长(235nm,410 nm)可以兼顾BSA与Hb的测定,在此条件下BSA的回收率为(101.25±1.03)%,Hb的回收率为(99.26±1.39)%。上述研究结果可用于BSA-Hb双组分蛋白样品的快速检测,并对多波长分光光度法测定波长的选择具有参考价值。