胎儿甲状旁腺在裸鼠体内培养的研究

移植前组织培养能延长移植物在终宿主体内的存活时间,目前较普遍的是采用组织液培养,但这种培养方法有许多缺点:培养环境难以稳定,培养液易受污染,移植物易交性坏死,因此,有必要寻找一更可靠的培养方法。裸鼠是一种无胸腺鼠,没有T淋巴细胞,对异种移植物不排斥,近年广泛地被用于肿瘤学及免疫学研究,但应用于器官移植尚不多见。 Sollinger等人发现成人甲状旁腺(PTG)在裸鼠体内培养120天,PTG结构完好,但作为较理想的供体胎儿PTG能否在裸鼠体内存活尚无人知。本实验将胎儿PTG 23块分别在裸鼠肾包膜下培养10—30天,通过光镜及电镜观察,发现PTG结构完整,无变性坏死,无淋巴细胞浸润。应用裸鼠体内培养14天的胎儿PTG行临床移植治疗甲状旁腺功能低下症三例,移植疗效良好,证明经裸鼠体内培养14天的胎儿PTG仍可发挥较好的功能。另外,发现一例甲状旁腺瘤在裸鼠体内培养42天,其结构完整,无淋巴细胞浸润,与培养前的新鲜组织无明显差别。我们认为裸鼠可作为PTG移植物的一种理想培养工具,为移植体内培养开辟了一个可靠的新途径。     

绿色荧光裸鼠部分免疫学指标的测定及分析

摘要: 目的检测绿色荧光蛋白( Green Fluorescence Protein,简称GFP) 转基因裸鼠的部分免疫学指标,分析GFP 转基因裸鼠与其他小鼠在免疫学方面的优缺点,为将来的研究提供基础参考值。方法① 实验选用6 ～ 8 周GFP 转基因裸鼠、BALB/c 裸鼠和BALB/c 小鼠,活体称体质量,剖取脾脏称其质量,之后进行脾淋巴细胞增殖能力的测定。② 取外周血,测定部分血常规指标及免疫球蛋白指标。结果① GFP 转基因裸鼠脾脏质量、脾脏系数以及T、B 淋巴细胞增殖反应与BALB/c 裸鼠相近,但与BALB/c 小鼠差异显著。② GFP 转基因裸鼠、BALB/c 裸鼠两种裸鼠品系外周血白细胞水平、淋巴细胞以比例及免疫球蛋白IgG、IgM 都远低于BALB/c 小鼠,差异显著。结论从脏器系数、白细胞水平,免疫球蛋白水平等角度发现,GFP 转基因裸鼠和BALB/c 裸鼠的免疫系统水平较BALB/c 小鼠相弱,其中GFP 转基因裸鼠的免疫系统水平最为低下。     

净化室与层流架相结合饲养繁殖裸鼠经验

为创造一个净化环境饲养裸鼠,我们将旧动物房改造成11M~2和9M~2两间净化室,一间为裸鼠繁殖室,一间为裸鼠实验室。净化室空气经过初、中、高效三级过滤,由鼓风机送风,室内保持正压,净化室内放层流架饲养繁殖裸鼠。进入净化室的一切物品经过严格消毒后由传递窗传入,层层拆包进入层流架,工作人员洗澡后更换无菌服进入净化室。经过一年多的使用,取得了一定的效果。裸鼠繁殖平均产仔数6.8只,平均成活率80％,一年内进行了四次空气菌落检测,均达到100级净化标准。此外,还在实验室进行了裸鼠肿瘤实验,均取得满意的效果。通过一年的裸鼠繁殖,实验证明在外环境条件比较差的情况下,利用旧房屋改造建立裸鼠室是可行的。只要严格管理,合理操作,同样能取得满意的效果。     

CD71人-鼠嵌合抗体抗移植排斥反应裸鼠模型发生肺不典型增生的研究

目的研究裸鼠移植排斥反应模型发生肺不典型增生的形态学基础.方法将人外周血单个核细胞(PBMC)注射到裸鼠体内建立移植物抗宿主动物(人外周血-裸鼠)模型,通过注射Hanks液设立模型对照组,12天后处死.再将实验裸鼠随机分成3组,分别通过注射抗CD4人-鼠嵌合抗体、抗CD71人-鼠嵌合抗体及Hanks液,构建CD4抗体组和CD71抗体组及模型组,20天后处死.搜集裸鼠各脏器组织,10%缓冲福尔马林固定,常规石蜡包埋,HE染色,镜下观察形态学改变.结果①裸鼠模型对照组肺、胃、肠、皮肤内有少量淋巴细胞浸润,同模型组相比,各器官淋巴细胞浸润程度较轻;②存活裸鼠上皮细胞的异型增生阳性率54%,其中,46%发生不同程度的不典型增生,8%发生肺癌;20天饲养裸鼠不典型增生发生阳性率为71%,明显高于12天饲养的裸鼠(17%).结论人外周血-裸鼠移植排斥反应模型促进肺不典型增生及肺癌的发生,有可能成为研究用的原发性肺癌动物模型.     

病理组织切片中常见问题及解决方法

组织切片方法是教学、科研、病理检验工作中广泛应用的一种实验技术。文章对整个实验过程中操作程序、可能出现的问题、相关的原因及具体的解决方法进行了归纳总结,对实验步骤和操作方法等细节进行了改进,使组织固定完全,脱水彻底,透明适度,浸蜡充分,切片较薄,染色良好,为广大同行提供了一种切实可行的技术方案,并得到满意的实验结果。     

气功外气对人鼻咽癌细胞株裸鼠成瘤的影响

应用细胞培养技术,以裸鼠为实验动物,按双盲法进行了两次实验,第一次实验由气功师发放外气作用于人鼻咽低分化鳞癌细胞株(CNE-2),然后将受功组和非受功组(对照组)细胞分别接种于裸鼠(NC-Z裸鼠),结果受功组成瘤受到明显抑制,两次实验的抑制率均为100％(3/3和4/4)。两次实验组织病理检查证实:受功组裸鼠接种癌细胞部位的组织均未见癌,肝、肺组织也未见癌;非受功组裸鼠瘤组织均为低分化鳞癌,除第一次实验的2号鼠见肺转移癌外,其余各鼠肝,肺均未见癌。本研究提示有进一步研究气功外气抑瘤及其机理的必要性和可能性,同时也为气功外气治疗鼻咽癌提供有意义的资料。     

应用裸鼠移植瘤模型作实验性抗鼻咽癌治疗研究

自1969年Ryard首次将人结肠癌在裸鼠体内移植成功至今,该技术及其应用有了飞速的发展。与传统的小鼠肿瘤相比,运用人癌裸小鼠移植瘤模型进行抗肿瘤药物药效学评价有以下优点：(1)强调药物对实体肿瘤的作用：(2)具有更多证实对某一特定人类肿瘤有较强作用的新化合物的机会：(3)实验结果与临床实际情况较吻合。目前人癌裸鼠移植瘤模型已成为抗癌药物评价和实验性肿瘤研究必不可少的工具．     

远端联动叶片自锁髓内钉治疗股骨骨折的生物力学研究

设计了一种可以远端自锁的髓内钉。对股骨干骨折行远端联动叶片髓内钉固定和交锁钉固定后,对其生物力学进行测试。了解髓内钉治疗股骨骨折的生物力学性能。选6个青壮年男性尸体取双侧完整股骨,中间做成横断骨折,然后用远端联动叶片自锁髓内钉和国产传统交锁髓内钉固定。对股骨-髓内钉复合体进行力学测试。实验结果用SPSS17.0统计软件进行分析。在三点弯曲及扭转实验方面,远端联动叶片自锁髓内钉较国产交锁髓内钉无明显差异。抗轴向载荷时较国产交锁髓内钉差,但满足在肢体非负重状况下生物固定。说明股骨型远端联动叶片髓内钉力学稳定性好,在治疗股骨简单骨折有一定优势。     

应用层流柜饲养裸鼠的体会

裸鼠是先天性胸腺缺陷动物 ,T细胞缺乏 ,是现今进行人癌异种移植的理想动物。然而由于裸鼠的饲养条件要求较高 ,使其应用受到了很多的限制。我们教研室经过几年的探索 ,在无菌实验室内使用层流柜 ,再加上比较严格的管理制度 ,成功地饲养裸鼠 18批次 ,5 6 0余只 ,都顺利地完成了实验。所以 ,在实验室条件下使用层流柜短期饲养裸鼠是可行的     

人肿瘤细胞悬液裸鼠皮下接种及影响移植成功的因素

根据文献报道及作者实验中的体会 ,对人肿瘤细胞悬液裸鼠皮下接种方法及影响移植成功的因素从瘤细胞、裸鼠和操作者等三方面进行综述。较好地认知人肿瘤细胞悬液裸鼠皮下接种的具体操作程序和影响移植是否成功的多方面因素 ,为人肿瘤裸鼠皮下移植模型成功建立提供参考