津白3系（TA3）小鼠性别比例的观察与分析

津白３系（ＴＡ_３）小鼠性别比例的观察与分析陈凤萍，马友福天津实验动物中心（天津市东郊区军粮城３００３０１）我中心于１９８５年９月从天津医学院引进了ＴＡ３系纯系小鼠，属低肿瘤系。引种时为９０世代。在培育过程中发现各世代仔鼠性别比例明显失调，雄多于雌。?..     

无毛小鼠繁育及其特性的初步观察

在KM小鼠饲养过程中发现并培育了 19代无毛小鼠 ,该小鼠在二级环境条件下能存活 2 4个月左右 ,可能是一个新的突变系 ,因此 ,我们对该无毛小鼠的生物学特性进行了初步的观察。我们在KM小鼠饲养中发现同窝小鼠中有无毛小鼠雌雄各一只 ,后将其有意保留下来 ,对其后代采取同胞兄妹随机交配的方式进行繁殖 ,目前已经繁殖到 18— 19代。在传至 7— 9代时出现繁殖力下降的现象 ,采取堂兄妹交配的方式后逐渐恢复正常繁殖。通过观察和实验证明 ,该小鼠的脱毛现象与年龄老化、营养、环境和寄生虫感染无关 ,脱毛形状也无性别特点 ,母鼠有能力哺乳小…     

小鼠大脑皮质体积和表面积的体视学研究

小鼠是生物学、医学教学科研工作中常采用的实验动物,其生物学特征和解剖学特点,人们已经了解了很多。然而,由于受到研究方法的限制,有关小鼠大脑皮质的定量研究却一直是个空白。六十年代以来,随着体视学的兴起与发展及在生物学、医学研究中的逐步应用,使这一研究成为可能。本文应用体视学中最新提出的垂直截面法,对小鼠大脑皮质体积、表面积及其性别方面的异同进行了定量研究,现报道如下:     

10种常见SPF级实验大、小鼠血液学及生化指标正常参考值的探讨

目的建立10种常见SPF级实验大、小鼠血液及生化正常参考值。方法采用半自动生化测定仪及血球计数仪对不同周龄、不同性别的常见10种SPF大鼠的血液学指标及生化指标值进行测定。结果取得4周龄和8周龄不同周龄、不同性别大、小鼠血液学及生化值平均值及正常参考范围;多数生化指标受年龄及性别的影响,除了不同品系、年龄和性别的大、小鼠ALP呈现规律性变化,其他指标也与相关报道有差异。结论在基础生物学研究中,要充分考虑到性别和年龄对实验动物血液学及血清生化指标的影响。     

小鼠胚肝基质细胞在体外培养中的动态演化

胚肝基质细胞是研究胚肝造血调控的重要工具，本实验对小鼠胚肝基质细胞在体外培养过程中的生长、细胞类型组成及其组成比例的演变过程进行了观察．实验显示小鼠原代培养初期基质细胞是由平滑肌样上皮细胞、巨噬细胞以及成纤维样细胞、树突状细胞、内皮细胞构成的，经过多次传代后，巨噬细胞等类型的细胞逐渐丢失，平滑肌样上皮细胞和成纤维样细胞成为主体，表明体外培养的小鼠胚肝基质细胞在4代以内都能较真实的反映体内造血微环境的构成，适用于胚肝造血研究．此为进一步研究胚肝基质细胞在胚胎期造血过程中的作用奠定了工作基础．     

青春双歧杆菌和乳链球菌混合发酵的研究

对人体有益的肠道菌（青春双歧杆菌ＢＡ菌株和乳链球菌ＳＬ菌株）的双菌混合发酵进行了研究，选择了双菌混合发酵的最佳碳源，发酵周期，以及混合发酵的两种菌接种量的比例，在常温下保存３００ｄ，活菌体在１×１０６个／ｍＬ左右．并采用双菌混合发酵产物对小鼠进行了急性毒性测定，观察其对小鼠免疫器官重量的影响．     

BALB／cAnN小鼠体重与各脏器重之间关系的回归分析

在临床医学研究中，有时非常需要了解动物体重与各脏器重之间关系的有关数据，以便确定药物或其他实验物质在动物体内各部分的分布情况。但现有的文献中几乎没有有关小鼠较全面的数据可供参考＾「１，２」。本文对５３只２０－３８ｇ的ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮ小鼠的体重与各部分重量的关系进行了回归分析并计算出了相应的直线回归方程。     

野生小鼠体外受精技术实验初探

应用实验小鼠体外受精技术对Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ与ＤＢＡ／２杂交的Ｆ１代ＤＢＦ１小鼠进行了体外受精实验研究,就体外受精相关指标与国际常规工作做了比较;同时将这些技术应用于实验动物化中的ＴＷ（Ｔｉａｎｊｉｎ Ｗｉｌｄ）野生小鼠,就小鼠精子质量、野生小鼠体外受精情况及体外受精机理做了初步探讨。     

幼年小白鼠睾丸内精子出现的时间

用睾丸的分散细胞悬滴法制备玻片标本，观察幼年小白鼠睾丸内出现精子的确切时间。实验研究结果表明，小鼠出生后第３７ｄ于睾丸内见有精子出现，当小鼠出生后至第３８ｄ时，睾丸内的精子数量明显增多。     

中草药方剂对小鼠性别控制和产仔数量的影响

较系统的阐述了运用不同的中草药方剂对小鼠进行性别控制的方法和作用效果。通过对交配后的母鼠进行中草药拌料饲喂,中草药煎剂饮水以及药物熏蒸的方法来实施。通过这些途径使母鼠在交配后由于药物作用而改变其所产小鼠的性别比例并且提高母鼠的产仔数量,并运用到畜牧业实际生产中以此来达到提高畜牧业生产经济效益的目的。此次实验的七组中草药方剂中有四组在性别控制方面较为理想。其中三组方剂处理的母鼠所产的小鼠中公鼠所占比例高于对照组母鼠所产小鼠中公鼠所占比例。另一组方剂处理的母鼠所产的小鼠中母鼠所占比例高于对照组母鼠所产小鼠中母鼠所占比例。并且这四组方剂处理的母鼠在产仔数量上也高于对照组母鼠。     

幼年小白鼠睾丸内精子出现的时间

用睾丸的分散细胞悬滴法制备玻片标本，观察幼年小白鼠睾丸内出现精子的确切时间．实验研究结果表明，小鼠出生后第３７ｄ于睾丸内见有精子出现，当小鼠出生后至第３８ｄ时，睾丸内的精子数量明显增多．     

BXSB小鼠血清丙种球蛋白及尿蛋白的检测

BXSB小鼠是从美国Jackson实验室引进的自发系统性红斑狼疮(SLE)重组近交系实验动物模型,其发病与性别及年龄密切相关。我们对4、5、6月龄的雌、雄BXSB小鼠及部分C57BL/6小鼠的血清丙种球蛋白(丙球)及尿蛋白进行了检测,其结果表明,各月龄雄性BXSB小鼠的血清丙球水平及尿蛋白含量均高于同月龄雌性BXSB小鼠和C57BL/6小鼠的相应值,其差别有显著性。我们所测得雄性BXSB小鼠的这两项指标的异常表现,与文献中关于BXSB小鼠发病与性别及月龄关系的报道,以及我们在这些小鼠观察到的病理和免疫病理变化是一致的。鉴于此两项检测方法比较简便和可靠,故用其作为监测小鼠SLE发病的指标。可能对于研究小鼠SLE发病的影响因素或治疗措施有实际意义。     

在单细胞水平建立原位PCR基因鉴别技术平台——以精子基因型鉴别为例

目的精子发生是一个包括有丝分裂和减数分裂的精细调控过程,这一过程是从精原干细胞开始在雄性睾丸的曲细精管中完成的,由哺乳动物雌雄性比例接近1∶1这一现象可以推知:受精时带X基因的精子和带Y基因的精子比率应该是1∶1,但事实上精子发生的过程中,分化出来的X、Y精子的比例是否也为1∶1并不清楚,因为精子发生过程中并不是所有细胞都能最终形成精子,然而要研究雌雄出生比率就需要先研究精子本身是否严格地按照1∶1形成,因此本实验通过建立快速可靠原位PCR技术平台为进一步研究精子发生的调控过程提供支持。步骤用HSL基因优化荧光原位PCR实验方案,包括蛋白酶K作用时间和浓度,原位PCR前先对精子进行解聚,再用SRY基因对精子进行原位PCR鉴定。结果在荧光显微镜下可清楚地看到精子头部的荧光信号,头部有绿色荧光信号的精子为带有SRY基因的Y染色体精子(Y精子),实验检测到昆明小鼠精子共493个,有信号的共273个,X∶Y=55.37%,经卡方检验,X精子与Y精子的实验结果趋近于1∶1。结论可利用荧光原位PCR技术在单细胞水平快速鉴定精子"性别",理论上可用于任何细胞的任何基因的鉴定。     

在SCID小鼠体内建立人急性早幼粒细胞白血病腹水模型（scid－APL－A）

人急性早幼粒细胞白血病动物模型，至今尚未见报导。我们将体外培养的人急性早幼粒白血病细胞袜ＮＢ４细胞（Ｍ３型）１×１０￣６，接种在ｓｃｉｄ小鼠腹腔内，种后一个月，腹腔内长出腹水，以后每间隔３周用腹水传代，各代小鼠接种成活率为１００％，目前已传３５代．各代小鼠存活期稳定，平均存活时间为２１，６±２．３天。对ｓｃｉｄ－ＡＰＬ－Ａ细胞作生物学特性观察，其形态学、免疫学、细胞遗传学及分子学都有体外培养的ＮＢ４细胞的特点。用全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）治疗ｓｃｉｄ－ＡＰＬ－Ａ小鼠时，产生诱导分化作用，腹水细胞的ＮＢＴ还原反应及细胞膜表面分化抗原均有所增加，同时治疗组的ｓｃｉｄ小鼠平均存活时间较对照组的明显延长。此外还观察到治疗ＡＰＬ常用药物阿霉素对ｓｃｉｄ－ＡＰＬ－Ａ也有较强的生长抑制作用。上述结果表明。己建成的ｓｃｉｄ－ＡＰＬ－Ａ可以用于评价新药或巳知治疗ＡＰＬ药物的动物模型。     

运用HSV－tk／ACV系统进行肿瘤基因治疗研究

构建了含ｐｇｋ启动子驱动的ＨＳＶ－ｔｋ基因的反转录病毒载体ｐＬＮＴＫ，将ＨＳＶ－ｔｋ基因转移至人脑胶质瘤ＳＨＧ４４细胞（命名为ＳＨＧＬＮＴＫ）及小鼠黑色素瘤细胞Ｂ１６（命名为Ｂ１６ＬＮＴＫ）．体外实验证实核着类似物ＡＣＶ对ＳＨＧＬＮＴＫ细胞和Ｂ１６ＬＮＴＫ细胞的杀伤敏感性分别高于亲本细胞１０００和４００倍．转ＨＳＶ－ｔｋ基因细胞与亲本细胞按不同比例共培养时，亲本细胞对ＡＣＶ的敏感性明显增高，存在旁观者效应．首次应用人脑胶质瘤细胞株进行裸鼠体内实验，结果表明：ＡＣＶ能完全抑制ＳＨＧＬＮＴＫ细胞在裸小鼠体内肿瘤的形成，对裸小鼠体内已形成的ＳＨＧＬＮＴＫ肿瘤的治疗效果与对照ＳＨＧ４４肿瘤相比，肿瘤体积缩小８０％；用Ｂ１６ＬＮＴＫ细胞接种同系Ｃ５７／ＢＬ小鼠，经ＡＣＶ治疗后，Ｂ１６ＬＮＴＫ组小鼠的肿瘤较对照组Ｂ１６肿瘤小９５％．ＨＳＶ－ＴＫ／ＡＣＶ系统原位基因转移治疗ＳＨＧ荷瘤裸小鼠、Ｂ１６荷瘤小鼠，原位注射病毒悬液／ＡＣＶ治疗组的ＳＨＧ肿瘤、Ｂ１６肿瘤分别较对照组肿瘤小５０％，４３％，原位注射ＰＡ３１７／ＬＮＴＫ细胞，ＡＣＶ治疗的ＳＨＧ肿瘤较对照组肿瘤小９０％，以上实验结果，统计学上差异极显著，Ｐ＜０．０１．实验     

CXA－1重组近交系小鼠生物学特性研究Ⅰ、皮肤移植Ⅱ、毛色基因测试Ⅲ、血液学常规值

对培育成功的ＣＸＡ－１重组近交系小鼠进行部分生物学特性观察：（１）皮肤移植；（２）毛色基因测试；（３）血液学常规值，结果表明，同系异体植皮观察１００天以上，未见排斥现象，毛色基因测试，Ａ、Ｂ位点均为纯合，基因型为ａａｂｂｃｃＤＤ，血液学常规和血清蛋白质均在正常范围内，本观察所得结果可为ＣＸ－１重组近交系小鼠在科学实验中应用提供资料。     

IVC系统和屏障系统对SPF级小鼠繁殖能力影响的比较研究

目的比较相对洁净环境下使用独立通风笼盒（IVC）系统和传统屏障饲养环境条件对SPF级BALB/c和C57BL/6两种近交系小鼠繁殖性能和生长发育的影响。方法将8周龄的SPF级BALB/c和C57BL/6小鼠以雌雄2∶1比例随机饲养在IVC饲养环境和传统屏障饲养环境下7个月,观察比较两种品系小鼠不同胎次产仔数、不同周龄的体质量变化、离乳率和交配间隔时间等繁殖和生长能力指标。结果在IVC饲养环境下两种品系的小鼠不同胎次产仔数、哺乳期及离乳后仔鼠体质量,离乳存活率和交配分娩间隔时间等指标与传统的屏障饲养环境下的相同指标相比无显著差异（P〉0.05）。结论在相对洁净环境下使用IVC系统与屏障环境相比,小鼠繁殖能力无显著差异,小规模的实验动物可以在IVC系统中进行生产繁殖。     

CXA—1重组近交系小鼠生物学特性研究

对培育成功的ＣＸＡ－１重组近交系小鼠进行部分生物学特性观察（１）皮肤移植：（２）毛色基因测试；（３）血液学常规值，结果表明，同系异体植皮观察１００天以上，未见排斥现象，毛色基因测试，Ａ、Ｂ位点均为纯合，基因型为ａａｂｂｃｃＤＤ，血液学常规和血清蛋白质均在正常范围内，本观察所得结果可为ＣＸＡ－１重组近交系小鼠在科学实验中应用提供资料。     

泥鳅和大鳞副泥鳅性腺细胞H－Y抗原的检测

以雄性小鼠脾细胞为抗原，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，获得了高滴度的抗Ｈ－Ｙ抗原抗体．在此基础上，利用细胞毒性实验，对泥鳅和大鳞副泥鳅的性腺细胞进行了Ｈ－Ｙ抗原的检测．结果表明，泥鳅中雌雄性腺细胞均含有Ｈ－Ｙ抗原；大鳞副泥鳅中，Ｈ－Ｙ抗原仅存在于雌性性腺细胞中，提示其为ＺＺ／ＺＷ型性别决定．     

泥鳅和大鳞副泥鳅性腺细胞H－Y抗原的检测

以雄性小鼠脾细胞为抗原，免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，获得了高滴度的抗Ｈ－Ｙ抗原抗体．在此基础上，利用细胞毒性实验，对泥鳅和大鳞副泥鳅的性腺细胞进行了Ｈ－Ｙ抗原的检测．结果表明，泥鳅中雌雄性腺细胞均含有Ｈ－Ｙ抗原；大鳞副泥鳅中，Ｈ－Ｙ抗原仅存在于雌性性腺细胞中，提示其为ＺＺ／ＺＷ型性别决定．