小麦体细胞胚胎发生过程的研究

以小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）幼胚愈伤组织为材料，研究了小麦的体细胞胚胎发生过程．切片观察表明：小麦的胚状体发生有两种方式，表面发生和内部发生．胚状体来源于愈伤组织中的单个原始胚性细胞．胚状体的发育经历了单个胚性细胞、胚性细胞团、球形胚、心形胚、成熟胚阶段．木实验支持胚状体单细胞起源的学说．     

玉米茎尖培养研究(Ⅱ)--体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以玉米茎尖分生组织为外植体，在离体培养条件下诱导体细胞胚胎(胚状体)发生。组织细胞学观察表明，玉米茎尖分生组织在离体培养条件下可直接产生胚性愈伤组织，后者在继代培养中发生胚状体。多数胚状体起源于愈伤组织的表层细胞和表层之下的几层细胞，少数产生于愈伤组织的较深层。胚状体发生于单细胞，发育过程与合子胚大致相似。多数胚状体发育正常，具有一个芽端和一个胚根端。少数胚状体形成具多个芽端而共用一个胚根端的次生连体胚。胚状体发生不同步。胚状体只有在分化培养基上才能发育成熟。     

玉米愈伤组织的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了玉米愈伤组织在继代周期中的变化及其胚状体发生过程。结果表明,愈伤组织的胚性与表面结构有明显关系。继代半年和一年半的胚性愈伤组织表面结构无显著差异,均可产生大量正常和畸形胚状体。正常胚状体可通过类似合子胚的分化或不规则发育过程而成熟。畸形胚形态多样,其中多数盾片异常。根据观察认为,胚状体一般是多细胞起源的。     

杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生的扫描电镜观察

利用电子扫描显微镜(SEM)对杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生发育途径进行观察研究。结果表明,非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织在表面结构上存在着明显的差异。胚性愈伤组织细胞体积较小,大小均一,多以细胞团形式存在,呈球形;非胚性愈伤组织细胞体积较大,不易成团,细胞之间孔隙较多。胚性细胞迅速增殖,其中一些细胞形成体胚的原始细胞,依次经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚发育成完整植株,在体胚发育过程当中保持较好的同步性和独立性。杂交鹅掌楸组织培养产生的胚状体具有明显的两极性和相对的独立性,体细胞胚尤其是成熟体胚与愈伤组织结合较松,易自行脱落。     

小麦体细胞胚胎发生的细胞组织学研究

以小麦的幼穗为外植体，接种于Ｎ６Ｂ５ＭｓＩ培养基上，３０ｄ后可形成大量愈伤组织．该愈伤组织继代１次后即产生淡黄色颗粒状的胚性愈伤组织和白色致密状的非胚性愈伤组织．将此两种愈伤组织分别转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基上，２５ｄ后胚性愈伤组织分化形成大量体细胞胚．本实验从外植体接种后的０～２５ｄ及胚性愈伤组织转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基后的０～２６ｄ各分期取样固定，切片观察表明：小麦的幼穗诱导体细胞胚亦为间接发生，且多为外起源．但体细胞胚的发生既有来自于单个胚性细胞的，也有可能来自于多个胚性细胞或分生细胞团，经细胞分裂和分化发育而形成体细胞胚     

葡萄胚状体发生的初步研究

由葡萄(Vitis Vinisera L)花药愈伤组织产生的胚状体形成单倍体幼苗后,经4—5次继代培养,发现其表皮细胞具有形成胚状体和进一步发育成幼苗的能力。胚状体的表层也具有同样的能力。将这样的一棵幼苗,整株置于液体培养中,在黑暗中震荡培养一周,然后在光照下静止培养,可获得大量完整的小植栋。实验结果证明葡萄单倍体的体细胞具有再生完整植株的全能性。在植物组织和细胞培养中,通过胚状体再进一步形成幼植物具有繁殖数量多、成苗速度快和结构完整的特点。因此,对于胚状体发生的研究,已经引起人们广泛的注意。目前,在植物的组织培养中,记载有胚状体发生的植物已涉及到广泛的分类类群,产生胚状体的离体培养物也有多种多样。但是对于胚状体形态发生的详细研究报导甚少。在1965年,Konor和Nataraja利用石龙芮的下胚轴进行切片观察时,看到了一系列胚状体发生的组织学过程。1970年Backs-Hüseman,D等在胡萝卜的单细胞悬浮培养中,见到了游离单细胞发育成胚状体的过程,1974年,Sunderland等在烟草中,也报导了小孢子胚状体的发生过程。但是,在具有经济价值的木本果树中,尚无这方面的报导。本文以葡萄单倍体幼苗为材料,进行切片观察和培养,对葡萄胚状体的发生进行了初步的探讨。     

EMS对枇杷花药胚状体细胞有丝分裂的影响

采用不同浓度的EMS对枇杷花药胚状体进行离体诱变,并以未诱变的材料作对照,对其引起的细胞学效应进行了研究．结果表明：在EMS诱变过的材料中均观察到一定数量的染色体畸变;球胚细胞中随着EMS浓度的升高有丝分裂指数降低,而染色体畸变率升高．胚性细胞与球胚细胞中有相同的变化趋势,但各自的分裂指数和染色体畸变率并不相同．     

沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)体内、外胚胎发育的比较研究

本文应用经典制片法和离体培养法。对沙枣体内、外胚胎发育的各阶段做比较研究。主要区别于原胚期:1)、形态发生:体内只有一种方式,即两极分化方式。而离体的有二种方式,即器官发生和胚状体发生途径。2)、胚性细胞起源:体内只一种起源(即起源于受精卵),离体的胚性细胞的起源有三种方式:a由紧邻表皮细胞的单个薄壁细胞产生;b由表皮细胞横分裂产生和c由表皮及其下的薄璧细胞共同参与产生。3)胚性细胞的细胞学特征:体内发生的合子具明显的极性分化,细胞质、淀粉粒和细胞核集中在合点端。它第一次分裂后,顶、基细胞在细胞学特征上具明显区别。而离体条件下的胚性细胞第一次分裂后无典型的顶、基细胞之分。故也缺乏典型的胚柄细胞。胚分化和成熟期、二者在形态学特征上基本相同     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究：Ⅰ.胚状体发生的组…

以葡萄的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程。结果表明：１．葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生。２．胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞。这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞，３细胞，多细胞原胚等阶段发育为成     

葡萄离体培养中胚状体发生的研究Ⅰ.胚状体发生的组织细胞学观察

以葡萄（ＶｉｔｉｓｖｉｎｉｆｅｒａＬ．）的花药和花丝为实验材料，观察了葡萄离体培养中胚状体的发生发育过程．结果表明：（１）葡萄的花药和花丝经诱导都可形成胚性和非胚性两类不同的愈伤组织，与外植体来源无关，胚状体经胚性愈伤组织产生．（２）胚状体多起源于胚性愈伤组织表层或表层以下的单个细胞，这些细胞核大，细胞质浓，染色深，在表层者易于脱落而处于单个离散状态，它们的第一次分裂有均等分裂，也有不等分裂，经２细胞、３细胞、多细胞原胚等阶段发育为成熟的胚状体．（３）葡萄胚状体具有与双子叶植物合子胚相似的发育过程     

石刁柏花药培养中根、茎及胚状体的形态发生研究

利用扫描电镜及组织学方法观察了石刁柏(Asparagus of ficinalis)的花药愈伤组织及由该愈伤组织产生的根、茎和胚状体。愈伤组织可分为三种,其表面形态及将来的发育方向都有差异。胚状体有内、外两种起源方式,胚状体的发生是不同步的,其发育顺序及结构与合子胚大体相似,有少数胚状体形成了植株。茎端最早是在愈伤组织表层产生,茎端具典型的原套原体结构,原套细胞仅一层。培养产生的根、茎与自然生长的根、茎在形态结构上有显著的差异。     

虎耳草幼花轴培养中胚状体的诱导及其细胞组织学观察

本文报道从虎耳草幼花轴培养中诱导出胚状体并再生为完整植株所需的条件。对影响胚性愈伤组织生长和胚状体形成的几种因素作了初步探讨。并描述了胚状体发生过程中的细胞组织学观察结果,发现了一些与合子胚发育类似或不同之处.     

仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体,成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织,胚性愈伤组织的形态有两种:微棕红色松软愈伤和松脆愈伤.显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团,而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个.细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞,进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现,大多数体胚60～90 d可发育成完整的小植株.     

仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体,成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织,胚性愈伤组织的形态有两种：微棕红色松软愈伤和松脆愈伤.显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团,而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个.细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞,进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现,大多数体胚60～90 d可发育成完整的小植株.     

可可茶子叶培养中体细胞胚状体形成及植株再生

用含有０．５ｍｇＬ－１２,４－Ｄ或０．５ｍｇＬ－１２,４－Ｄ加２ｍｇＬ－１ＰＣＰＡ的ＳＨ培养基（含ρ（蔗糖）＝３％）培养可可茶的未成熟子叶,２周后即可从合子胚的下胚轴诱导出胚状体,５～７周后可以从子叶表皮直接诱导出胚状体．在含０．２ｍｇＬ－１２,４－Ｄ的培养基中,子叶外植体在培养４周内即能分化出胚状体且分化频率较高．培养１５周后把培养物转接至含２ｍｇＬ－１ＢＡ加上０．２ｍｇＬ－１ＩＢＡ的培养基中（含ρ（葡萄糖）＝２．５％）可以诱导出“种子状胚”、“芽状胚”和“杯状胚”,并可使“种子状胚”和“芽状胚”转化成苗．另外,还可诱导出丛芽并使丛芽转化成无根苗．若把“芽状胚”转移到含５ｍｇＬ－１ＧＡ－３和１ｍｇＬ－１ＩＡＡ的培养基中,“芽状胚”转化成无根苗的频率较高．     

玉米花粉无性系分化能力的变化和染色体数目的不稳定性

胚性细胞在胚性细胞团、胚状体和再生植株的根部均可以发生。在胚性细胞团表面产生的胚性细胞发育成新的胚性细胞团,在胚性细胞团内部产生的胚性细胞形成许多细胞分裂中心,由这些分裂中心进一步发育成新的胚性细胞团。新的胚性细胞团即可以保持分化能力,也可能丧失分化能力。胚性细胞发育成胚状体的过程与玉米合子胚的形成基本相似。成熟胚状体具有胚芽、胚根、盾片等结构。无性系胚性细胞团具有染色体数目不同的细胞壤嵌存在的特性。由胚性细胞团中的胚性细胞发育成的胚状体,其整倍体细胞占优势,而在丧失正常分化能力的细胞团中,非整倍体细胞占优势。     

胡罗卜(Daucus carota L.)的体细胞胚胎发生——Ⅰ某些胡罗卜品种在细胞培养中的胚胎发生和内源激素的关系

自从Steward(1958a, b;1964),Reinert(1958,1959)首先在胡罗卜细胞培养中发现了离体的体细胞胚的发生后,很多实验室曾用栽培和野生胡罗卜植株的不同部位在离体培养过程中获得了大量的体细胞胚,并在控制胚状体形成的因素方面作了大量的工作。有关这方面的研究V. Raghavan(1976)和H. W. Kohlenbach(1976)曾作了评述。但是,直到目前为止,有关培养细胞中的体细胞胚胎发生的组织学、胚状体早期发育的生物化学特性及遗传学基础还远未被人了解,而且某些胡罗卜品种或者很难诱导胚状体发生,或者根本诱导不出。为了探讨这一问题的遗传因素,包括其胚状体发生的组织学及生物化学特性,在本文中选用八个不同的胡罗卜品种,筛选其胚胎发生的潜能,并用其中两个品种第一次尝试测定胚状体发生与内源激素系统间的关系。实验证明这一系统在体细胞胚发生的调节上起着重要作用。     

旱芹人工种子内培养物的形态发生和生理生化的研究

本文讨论有关旱芹人工种子内部培养物由体细胞脱分化产生胚性细胞、胚状体,直到成株的过程中形态发生的问题,对胚性细胞所处的状态、胚状体筛选和畸形胚、胚性细胞(团)或子叶胚包裹人工种子及其萌发特点、播种基质等等方面进行了分析比较,并提出一些有关旱芹人工种子研制的基本结论。 实验对培养物的叶绿素含量和过氧化物同工酶谱进行了测定,并得到了水溶性蛋白和过氧化物酶的培养时间曲线,以期从生化指标探讨人工种子这一特定条件下培养物的生理生化变化。     

关于虎眼万年青体细胞胚的细胞起源和发育过程的初步研究

本文以虎眼万年青鳞片小切段为外植体，对体细胞胚的发生途径，起源模式及发育过程作了系列切片和扫描电镜观察，结果表明大量体细胞胚直接发生于外植体近轴面的表面细胞或薄壁细胞。有些体细胞胚起源于单细胞，另一些起源于几个细胞构成的胚胎发生单元，但始终未见起源于十多个甚至几十个细胞的细胞学证据。有不少体细胞胚发生于肿块样突起物上，这地局部区域表皮细胞的增生加厚。明显不同于胚性愈伤组织，在胚胎发育过程中胚体侧面     

诸葛菜外植体直接体细胞胚胎发生的研究

离体条件下诱导了诸葛菜和毛果诸葛菜的子叶片、真叶片、下胚轴、叶柄外植体直接发生体细胞胚状体，并长成小植株。在ＭＳ、改良ＭＳ附加ＢＡ及附加ＢＡ与ＧＡ３的几种不同培养基上，各组织切段发生胚状体的频率均为１００％。ＢＡ能强烈地诱导胚状体的发生；ＧＡ３对胚状体的发生并不是必需的，只对胚状体长成小植株有利。硝酸铵能促进胚状体的发生，但铵离子并不是必不可少的。