黑米花青素延缓果蝇衰老作用研究

探究黑米花青素延缓衰老的能力及其作用机制。以2d龄的野生型果蝇模型生物为研究对象,饲喂添加不同质量浓度(0、1、5mg/mL)黑米花青素的培养基,采用寿命实验、饮食量检测和逆重力爬行实验方法研究黑米花青素对果蝇平均寿命和健康寿命的影响;采用蓝精灵实验检测黑米花青素对果蝇肠道完整性的影响;用荧光实时PCR测定果蝇体内抗氧化基因SOD、CAT、Rpn11 mRNA表达量的变化。研究发现,饲喂黑米花青素后果蝇平均寿命和健康寿命均高于对照组;黑米花青素对果蝇肠道有一定的保护作用;抗氧化基因mRNA表达水平显著提高(Cu/Zn-SOD,P<0.01;Mn-SOD、CAT和Rpn11, P<0.05)。研究认为,黑米花青素延缓衰老的作用可能是通过上调内源性抗氧化基因来实现的。     

虎杖提取物体内抗氧化作用

为研究虎杖提取物对小鼠体内抗氧化力的作用以及对果蝇的延缓衰老作用,分别以高(0.4 mL)、中(0.2 mL)、低(0.1 mL)3个剂量虎杖提取物(质量浓度为1 g/L)灌胃昆明种小鼠4周,取眼球静脉血,测定血清的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,分别以4个不同浓度虎杖提取物(质量分数0.1%、0.2%、0.4%、0.8%)的基本培养基连续喂养果蝇,每24 h记录1次果蝇死亡数,记录果蝇存活天数.结果表明高剂量虎杖提取物显著提高了小鼠血清中的T-AOC活力,血清MDA含量也显著降低,但血清SOD活力提高不明显.质量分数0.2%虎杖提取物极显著延长雌雄果蝇寿命,对雌果蝇平均寿命延长率为31.68%,对雄果蝇平均寿命延长率为43.25%,对雌果蝇最高寿命延长率为39.05%,对雄果蝇最高寿命延长率为41.62%;添加质量分数0.4%和0.8%虎杖提取物的雌雄果蝇寿命显著延长.虎杖提取物作用于小鼠和果蝇体内,有一定的抗氧化和延缓衰老的作用.     

山慈菇正丁醇提取物对NR8383细胞分泌的IL-1β和TNF-α水平的影响

为了探讨山慈菇正丁醇提取物对NR8383细胞(大鼠肺泡巨噬细胞)分泌的白介素-1β(interleukin-1,IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响,通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)法检测TNF-α和IL-1β的mRNA水平,利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immune sorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中TNF-α和IL-1β的蛋白含量。结果显示:与空白对照组相比,终浓度1. 25 mg/m L的山慈菇正丁醇提取物可极显著降低R8383细胞分泌TNF-αmRNA水平和蛋白含量(P 0. 01);与空白对照组相比,终浓度1. 25 mg/m L山慈菇正丁醇提取物能极显著升高IL-1β的mRNA水平和蛋白含量(P 0. 01),同时0. 012 5 mg/m L山慈菇正丁醇提取物能极显著降低IL-1β的mRNA水平和蛋白含量(P 0. 01)。说明终浓度为1. 25 mg/m L的山慈菇正丁醇提取物可极显著调控NR8383细胞分泌的TNF-α和IL-1β的基因和蛋白含量。     

玫瑰花提取物抗衰老作用的研究

以果蝇为动物模型,对玫瑰花提取物(F21)进行抗焕衰老的研究.通过大样本、高重复的寿命实验,证明了F21能显著提高果蝇的平均寿命和最高寿命.用F21饲养(培养基给药浓度0.2%)果蝇后,其处理组果蝇体内的脂褐素含量明显下降、飞行频率有明显的升高趋势;同时,果蝇体内抗氧化酶CAT和SOD的活力均有明显提高.     

乌头赤石脂丸汤方对心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及其可能的分子机制

为了观察乌头赤石脂丸汤方含药血清对H9C2细胞氧化应激损伤的保护作用与可能的分子机制,采用过氧化氢处理H9C2细胞构建氧化应激损伤模型:以乌头赤石脂丸汤、参附汤连续灌胃SD大鼠1周,制备含药血清.将H9C2细胞随机分成空白对照组、模型组、阳性对照组、实验组、空白抑制剂组、模型抑制剂组、阳性抑制剂组、实验抑制剂组。过氧化氢造模浓度为400μmol/L,GDC-0994浓度为1μmol/L,分组给药后培养4h。用CCK-8法检测各组细胞活力,用Western blot法检测细胞中Erk1/2、p-Erk1/2、Nrf2、HO-1蛋白表达水平。实验结果显示:(1)与空白对照组比,模型组的细胞活力显著降低(P0.01),Erk1/2磷酸化的水平降低,Nrf2、HO-1蛋白的表达降低(P0.01);(2)与模型组相比,实验组、阳性对照组细胞活力显著升高(P0.01),Erk1/2磷酸化水平降低,Nrf2、HO-1蛋白的表达降低(P0.01);(3)与阳性对照组相比,实验组细胞活力显著升高(P0.01),Erk1/2磷酸化水平,Nrf2、HO-1蛋白的表达升高(P0.01);各组之间Erk1/2总蛋白表达无差异。(4)GDC-0994能够抑制乌头赤石脂丸汤方对细胞活力的保护作用(P0.01),抑制乌头赤石脂丸汤方对p-Erk1/2,Nrf2,HO-1表达的上调作用(P0.01)。研究表明乌头赤石脂丸汤方可以通过抑制氧化应激途径发挥对H9C2心肌细胞的保护作用,对抗再灌注引起的心肌细胞损伤。该作用是通过促进Erk1/2磷酸化,增强Nrf2、HO-1蛋白的表达,活化Erk1/2/Nrf2/HO-1信号通路进行的。本研究为阐明乌头赤石脂丸的心血管保护作用及治疗急性心肌梗死的作用提供了实验依据。     

紫甘薯提取物对果蝇的紫外辐射保护作用

研究紫外线诱导后(20,W紫外灯下照射40,min)紫甘薯提取物对果蝇辐射损伤的保护作用.在紫外线氧化损伤果蝇模型中添加紫甘薯提取物后,果蝇寿命显著提高,且有剂量依赖性.紫甘薯提取物提高了紫外线氧化损伤果蝇体内的超氧化物歧化酶(SOD)比活力和过氧化氢酶(CAT)比活力,降低了丙二醛(MDA)水平.说明紫甘薯提取物具有抗氧化损伤、延缓衰老的作用,为紫甘薯提取物更好地应用于营养食品、保健食品中提供理论依据.     

黄芪多糖对脂多糖诱导肠上皮细胞IPEC-J2氧化应激和炎症反应的缓解作用

为探究黄芪多糖对脂多糖诱导IPEC-J2细胞炎症反应的影响.将IPEC-J2细胞分为对照组、LPS处理组、ASP处理组和ASP+LPS处理组,分别检测各组细胞活力、抗氧化指数、相关炎症因子含量和mRNA表达水平.结果表明当10 mg/L LPS作用细胞12 h后,显著降低了细胞活力.当100 mg/L ASP预处理细胞4 h后显著提高了细胞的存活率.与对照组相比,LPS组显著提高了MDA含量并降低了SOD,CAT酶活力,显著上调细胞上清液中IL-6,IL-8和TNF-α的含量以及细胞内三者基因mRNA的表达水平,显著下调了IL-10基因mRNA的表达.而采用ASP预处理4 h后可显著降低细胞内MDA含量及提高SOD和CAT酶活力,且显著下调IL-6,IL-8和TNF-α的含量和细胞内三者基因mRNA的表达及显著上调IL-10基因的表达.试验表明ASP可缓解LPS引起的氧化应激和炎症反应,抑制IL-6,IL-8和TNF-α含量及其基因表达,促进IL-10基因表达,从而发挥抗氧化和抗炎作用.     

红菇提取液抗衰老作用初探

目的:研究红菇提取液对果蝇寿命的影响,初步探讨红菇提取液的抗衰老作用.方法:以3隐性果蝇为对象,通过果蝇的生存试验主要统计其平均寿命、半数死亡时间和最高寿命,比较1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml和15mg/ml四种不同浓度红菇提取液对果蝇寿命的影响.结果:从平均寿命看,1mg/ml时雄、雌果蝇分别延长6.94%、11.14%(P均<0.01);5mg/ml时雌果蝇延长7.14%(P<0.01).从半数死亡时间看,1mg/ml时雄、雌果蝇分别延长7.51%、8.45%(P均<0.01);5mg/ml时雌果蝇延长7.38%(P<0.01).从最高寿命看,5mg/ml和10mg/ml时雌果蝇分别延长13.47%和16.37%(P均<0.01).结论:红菇提取液对果蝇有一定的抗衰老作用,其中1mg/ml的红菇提取液效果最好.     

几种常用分子生物学试剂对果蝇寿命的影响

不同的分子生物学实验试剂对果蝇寿命都具有极显著降低的作用.含有20 mmol/L Tris的培养基中的果蝇的成活天数比对照降低了52.4 %,含有10 g/L SDS的培养基中的果蝇寿命缩短了73.6 %,10 mmol/L的EDTA能使果蝇寿命降低50.1 %,含有5 mL/L的酚仿醇分离液的培养基中果蝇平均寿命仅为3.5 d.随着药剂浓度的增加,果蝇的寿命多呈对数曲线下降的趋势.     

酶解复合氨基酸对果蝇寿命及繁殖力的影响

以米曲霉(Aspergillus oryzae)R6发酵豆粕,利用米曲霉自身的蛋白酶系降解豆粕,得到酶解复合氨基酸.将8h内羽化的成虫果蝇(Drosophila melanogaster)随机分组,分别饲喂酶解复合氨基酸(2,4和8 g/L),饲喂基础培养基的果蝇为对照,每天定时记录死蝇数量,直至果蝇全部死亡.结果表明,中质量浓度组果蝇的平均寿命和最高寿命极显著延长,且果蝇子代成虫数量也极显著增加.表明酶解复合氨基酸对果蝇具有一定的延缓衰老及提高繁殖力的功能.     

油橄榄叶提取物对非酒精性脂肪肝小鼠脂肪酸β氧化限速酶CPT-1表达的影响

探讨油橄榄叶提取物(olive leaf extract,OLE)干预非酒精性脂肪肝(NAFLD)的分子机制.将50只健康小鼠分正常组、模型组、OLE低剂量组、OLE中剂量组和OLE高剂量组.用高脂饮食9周建立小鼠NAFLD模型.造模第2周起用OLE(250mg/kg、500 mg/kg、1 000 mg/kg)进行灌胃治疗8周.利用定量PCR和免疫组化法检测肝组织脂肪酸β氧化限速酶肉毒碱棕榈酰基转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT-1)的表达水平.结果显示,与正常组相比,模型组小鼠肝组织CPT-1表达水平极显著降低(P0.01).与模型组比较,OLE干预后,肝脏CPT-1表达水平显著升高(P0.05,P0.01).OLE可通过提高CPT-1表达水平来调控肝细胞脂肪酸β氧化发挥作用,抑制NAFLD损伤的进展.     

肝细胞生长因子对体外缺血/再灌注星形胶质细胞氧化应激的影响

目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)对体外缺血/再灌注导致的星形胶质细胞氧化应激的影响.方法:取体外培养的大鼠大脑皮层星形胶质细胞,建立缺血/再灌注损伤细胞模型.用HGF预处理星形胶质细胞后,进行缺血/再灌注.测定细胞活力、活性氧簇(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及谷胱甘肽(GSH)含量.RT-PCR检测细胞Nrf2 mRNA的表达,Western blotting检测胞浆和胞核Nrf2蛋白的表达.结果:星形胶质细胞缺血/再灌注后,细胞活力降低,ROS水平及MDA含量升高,SOD活性及GSH含量降低.Nrf2 mRNA及胞浆、胞核Nrf2蛋白水平均下调.HGF能明显升高细胞活力,降低ROS水平及MDA含量,升高SOD活性及GSH含量,上调Nrf2 mRNA及胞浆、胞核Nrf2蛋白的表达.结论:HGF能减轻体外缺血/再灌注导致的星形胶质细胞氧化应激损伤,可能与HGF调节Nrf2表达及核转位水平、调控氧化/抗氧化系统的平衡有关.     

蚯蚓冻干粉对高血脂小鼠胆固醇逆转运相关基因的调节作用

以高脂饲料饲喂昆明种小鼠构建高血脂小鼠模型,灌胃给予高、中、低剂量(0.4,0.2,0.1g/kg)蚯蚓冻干粉,每天1次,同时饲喂高脂饲料,以仅饲喂高脂饲料组小鼠为对照,共饲养10周.提取小鼠肝脏总RNA,应用半定量RT-PCR技术检测实验组与对照组小鼠胆固醇逆转运相关基因卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol acyltransferase,LCAT)和脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达水平.结果表明,蚯蚓冻干粉极显著提高实验组小鼠LCAT mRNA表达水平(P0.01),显著提高LPL mRNA表达水平(P0.05),提示这是蚯蚓冻干粉能够降低高血脂小鼠血浆胆固醇水平的原因之一.     

短柄五加叶片总皂苷对果蝇繁殖力影响的研究

研究了短柄五加叶片总皂苷对果蝇繁殖力的影响. 用含总皂苷(0.06 mg/mL、0.12 mg/mL、0.24 mg/mL)和标准培养基饲喂果蝇,在一段时间内统计已羽化的F1、F2代果蝇数量. 结果表明:在处理早期,中、高浓度组F1代果蝇数量比对照组有显著增加(P<0.05),其增值率分别为17.15%(0.12 mg/mL)和35.75%(0.24 mg/mL),但随处理时间延长,皂苷处理组子代果蝇数量均比对照组极显著降低(P<0.01). F2代果蝇数量统计显示:不论是皂苷处理果蝇全部发育期还是仅幼虫发育期,皂苷处理组F2代羽化果蝇数量与对照组相比降幅均达极显著水平(P<0.01). 以上结果说明,短柄五加叶片总皂苷具有显著抑制果蝇繁殖力的作用,这一结果可为短柄五加叶片皂苷开发新型生物农药提供一定理论依据和研究方向.     

乳苣水提取物对人肺癌细胞SPCA-1生长的影响

为了探讨乳苣水提取物对体外培养的肺癌细胞SPCA-1的影响,分别用质量浓度为0.5、1、1.25和1.5 g/L(mg/m L)的乳苣水提取物处理SPCA-1细胞,24 h后通过CCK-8法检测发现,与对照组(未处理)相比,处理组细胞增殖活力均显著下降(P0.001).流式细胞仪检测(AnnexinⅤ-FITC/PI染色)发现随着处理浓度的增加,处理组细胞凋亡率都显著提高(P0.05),且呈剂量依赖关系.为了探索乳苣是否对体内肿瘤有抑制作用,构建了SPCA-1细胞的裸鼠皮下瘤模型,通过观察喂食乳苣水提取物后皮下瘤的生长情况发现,与未喂食乳苣水提取物的对照鼠相比,喂食5周后的实验组的瘤体得到明显的抑制.实验结果表明乳苣水提取物能够抑制体外和体内生长的SPCA-1细胞,可以作为一种潜在的预防和治疗肺癌的药物做进一步研究.     

博落回提取物对湖羊瘤胃体外发酵和甲烷排放的影响

试验旨在研究博落回提取物不同剂量对湖羊体外瘤胃发酵特性和甲烷(CH4)影响,筛选出适合的剂量。试验选用4头装有永久性瘤胃瘘管的湖羊提供瘤胃液,通过体外产气量法模拟瘤胃发酵试验,研究了0 mg/100m L、0.5 mg/100m L、5.0 mg/100m L、25 mg/100m L和50 mg/100m L博落回提取物添加剂量对湖羊瘤胃体外发酵参数与CH_4产量影响。结果表明,随着剂量的增加,产气量、CH_4、氨态氮(NH3-N)和微生物蛋白(MCP)均呈先升高后降低变化趋势,剂量为5 mg/100m L时,MCP含量达到最高,随后逐渐下降。与对照比较,剂量≥25mg/100m L显著降低了产气量和CH_4(P0.05),pH随着剂量增加缓慢下降(P0.05)。总挥发性脂肪酸(VFA)呈现先下降后上升趋势,剂量为0.5 mg/100m L处理中总VFA最低。乙酸百分比和乙酸/丙酸比值随着博落回剂量增加逐渐下降,丙酸百分比则逐渐提高(P0.05)。结果提示,适当添加博落回提取物可以有效降低甲烷的生成,并且改变瘤胃的发酵模式,向丙酸发酵型转变。     

积雪草苷对缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的研究

为探讨积雪草苷对缺血再灌注损伤的保护作用及机制。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血再灌注24 h后,观察积雪草苷(80、40、20 mg/kg)对脑缺血再灌注大鼠神经功能评分,组织形态学变化和神经细胞凋亡的影响。并测定缺血脑组织抗氧化物酶超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量,Real time-PCR检测缺血脑组织Caspase-3、Bcl-2和Bax m RNA表达变化。结果显示,与模型组比较,积雪草苷能显著降低缺血再灌注大鼠神经功能评分,抑制神经细胞凋亡,改善组织病理学损伤,提高脑组织SOD、GSH-Px、CAT活性,降低MDA、蛋白质羰基水平,降低Caspase-3、Bax m RNA表达,提高Bcl-2 m RNA表达。由此可知,积雪草苷对脑缺血再灌注大鼠有显著保护作用,可能与其抗氧化、抗凋亡活性有关。     

低氧胁迫对日本沼虾呼吸代谢和抗氧化能力的影响

为阐明低氧胁迫对日本沼虾呼吸代谢和氧化代谢的影响,并初步探讨其作用机制及日本沼虾的抗氧化响应机制,将日本沼虾暴露于低氧((2±0.2)mg/L,8 h)而后恢复常氧水平((7±0.2)mg/L,2.5 h).结果显示:与对照组(保持常氧水平)相比,随着低氧暴露时间延长,日本沼虾肝胰腺和肌肉组织细胞色素氧化酶(CCO)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活力显著下降(p0.05),延胡索酸还原酶(FRD)和乳酸脱氢酶(LDH)活力显著上升(p0.05);总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)活力显著上升(p0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降(p0.05).恢复常氧阶段,CCO,SDH,FRD,LDH,CAT和SOD活力逐渐恢复到正常水平,T-AOC在恢复常氧1 h时显著降低(p0.05),而后恢复到正常水平.低氧胁迫使得有氧代谢减弱,无氧代谢增强,以维持机体能量需求;T-AOC和CAT活力增加而SOD活力降低,是日本沼虾适应低氧环境所采取的一种抗氧化策略.     

赖氨酸蛋氨酸配比模式对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响

以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,研究赖氨酸蛋氨酸配比模式对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白合成的影响。试验采用因子试验设计,以蛋氨酸(0.4、0.5、0.6 mmol/L)和赖氨酸(1.0、1.2、1.4、1.5、1.6 mmol/L)的混合物作为试验处理。试验期为48 h,每个处理3个重复,试验重复3次。通过ELISA方法检测添加蛋氨酸和赖氨酸混合物后细胞中酪蛋白的合成量。得出最佳的赖氨酸蛋氨酸配比模式,并采用Real-Time PCR技术检测此水平下乳蛋白基因、与乳蛋白合成转录和翻译相关的基因以及与赖氨酸、蛋氨酸相关的转运载体CAT-1和ASCT-2的表达。结果表明:蛋氨酸(0.4 mmol/L)和赖氨酸(1.2 mmol/L)混合添加时奶牛乳腺上皮细胞总酪蛋白合成量最高为2.95 ppm,并差异极显著。当赖氨酸和蛋氨酸以1.2 mmol/L和0.4 mmol/L即3∶1混合添加时在不影响赖氨酸、蛋氨酸相关的转运载体CAT-1和ASCT-2基因表达的条件下均能极显著地促进乳蛋白基因的表达如:CSN1S1、CSN1S2、CSN2、CSN3和LALBA基因表达均上调,且CSN1S1和LABA表达量最高。与乳蛋白转录相关的STAT5-JAK2信号通路基因的表达均显著上调;与乳蛋白翻译相关的mTOR信号通路的相关基因除EIF4E-BP1显著下调,m TOR和S6K基因的表达均上调且mTOR差异极显著。