四种电化学底物伏安酶联免疫分析法检测烟草花叶病毒

分别以对苯二胺，间氨基酚，邻联茴香胺和硫酸对氨基N，N－二乙基苯胺为辣根过氧化物酶（HRP）的电化学底物，这四种物质在HRP的催化下能够被H2O2氧化生成具有电化学活性的酶催化反应产物，可以用线性扫描二阶导数极谱法进行检测。将该法与抗原直接包被间接法（DAC－ELISA）相结合，应用于烟草花叶病毒（TMV）的检测，取得了较好的结果。     

用催化动力学法由一次实验同时测定铬（Ⅲ）和铬（Ⅵ）

用H2O2氧化邻-联（二）茴香胺的反应作为指示反应可用催化动力学法经一次实验同时测定Cr（Ⅲ）和Cr（Ⅵ），但多元线性回归法不能用于此体系，因为其表现反应级数不是常数.用“速率谱”的概念可用主成分分析处理数据.实验证明对Cr（Ⅲ）和Cr（Ⅵ）的同时测定H2O2和邻-联（二）茴香胺的最佳浓度分别为0.6和6×10-3molL-1，pH为4.0.可测（1～6）×10-5molL-1的Cr（Ⅲ）和2×10-6～1×10-5mol·L-1的Cr（Ⅵ）.误差不超过10％.     

辣根过氧化物酶催化抑制法测定维生素C

在辣根过氧化物酶(HRP)催化下,H2O2氧化对氯苯酚、4-氨基安替比林发生偶联反应,反应产物醌型染料在505 nm处有最大吸收本研究依据维生素C对辣根过氧化物酶催化对-氯苯酚与4-氨基安替比林偶联反应体系有强烈的抑制作用,在一定范围内,其抑制作用与维生素C浓度成正比[2],建立一种辣根过氧化物酶催化抑制法测定维生素C的方法.     

利用过氧化物模拟酶催化化学发光法检测钾离子

K+存在时,富含鸟嘌呤(Guanine)的特定序列单链DNA会发生构象变化形成G-四联体结构,从而能够与氯化血红素(hemin)结合生成具有过氧化物酶活性的模拟酶,对鲁米诺-H2O2化学发光体系具有强的催化作用.据此,提出了利用G-四联体-hemin-鲁米诺-H2O2化学发光体系测定K+的新方法.探讨了DNA浓度,he...     

水溶性有机介质中漆树酶催化氧化对茴香胺

采用分光光度法,考察不同水／水溶性有机溶剂体系中漆树酶的催化氧化性能,以及影响反应的因素．研究结果表明,漆树酶在醇溶剂中的活性要强于在非醇溶剂中,醇分子中羟基数量对漆树酶活性也有影响．在温度45℃,pH值为7．5,体积比为1：1的水／丙三醇溶液中,漆树酶的活力最高,活力比达150％以上,超出漆树酶在纯水中的活性．以漆树酶催化氧化对茴香胺,采用TLC和HPLC分离纯化反应产物．根据光谱分析法,鉴定主要产物为偶氮茴香醚．     

ODA—H2O2—HBsAg—HRP伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表…

提出了一种偶合反应伏安酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗体（ＨＢｓＡｂ）的新方法。该法将ＨＢｓＡｇ－ＨＲＰ催化Ｈ２Ｏ２氧化邻联茴香胺（ＯＤＡ）的反应与邻联茴香胺的氧化产物在电极上的反应相偶合，在ＢＲ缓冲溶液中，在－０．５６Ｖ（ＳＣＥ）左右产生灵敏的极谱波，根据测定标记在乙型肝炎表面抗原上的ＨＲＰ的量，求得发生免疫反应的乙型肝炎表面抗体的含量。本法对ＨＢｓＡｇ－ＨＲＰ及ＨＢｓＡｂ测定的灵敏度均高于     

用2,4—二氯苯酚测定葡萄糖氧化酶活性的探讨

测定葡萄糖氧化酶(GOD,E.C.1.1.3.4)最广泛使用的方法,是利用葡萄糖氧化酶—辣根过氧化物酶—邻联茴香胺偶联反应,用分光光度法测定;但邻联茴香胺是致癌物,有必要选择毒性较低、灵敏度较高的新染料代替之。国外曾有报道,邻联甲苯胺、邻甲苯胺及2,6-二氯苯酚等一些染料可作为邻联茴香胺的代用品,但前二种仍有致癌性。国内虽有利用GOD酶法、用4-氨基安替比林偶联酚测定血清中葡萄糖含量(Trinder反应)的报道,并指出Barham及Trinder1972年提出用2.4-二氯苯酚代替酚,灵敏度更高,但直接用以测定GOD活性的方法尚未见报道。本文根据Trinder反应原理,选用2,4-二氟苯酚和苯酚共同做为该偶联反应的氧供体,选择了最佳测定条件,并进行了方法学评价。     

二价铜离子和2,2′-联咪唑促进下的二芳基胺类化合物的合成

以芳胺和碘代芳烃为起始原料,在CuCl2.2H2O和2,2′-联咪唑催化体系中合成了二芳基胺类化合物.此催化体系首次被我们使用,并且高收率地得到目标产物.产物结构经1H NMR和MS得到了确证.     

过氧化物酶催化的硝化反应研究进展

过氧化物酶是一类广泛存在于动植物体内的氧化还原酶,可催化多种反应;在H2O2／NO^- 2体系下,过氧化物酶可以催化酚类以及其他芳香族化合物的硝化,对过氧化酶用途、催化的硝化反应及其硝化机理做简要的综述。     

伏安酶联免疫分析中一类新的HRP底物体系的初步研究

提出了以酚红、1,2,5,8－四羟基蒽醌、1,8－二羟基蒽醌三种染料类物质作为电化学酶免疫分析中辣根过氧化物酶（FRP）催化氧化反应的底物,这三种具有电化学活性物质,在HRP的催化作用下,被H2O2氧化生成非电活性的产物,导致测定的电流下降,其减少程度和HRP的浓度有一定的关系,从而建立了三种底物测定HRP的新体系,比较了它们测定HRP的灵敏度,对酶催化反应机理进行了初步的探讨。     

HRP催化对苯二胺合成苯胺低聚物

目的以辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,简称HRP)为催化剂,研究酶促合成低聚苯胺。方法以对苯二胺为单体,HRP为催化剂,过氧化氢为氧化剂,二氧六环/水的混合溶液为反应环境,合成低聚苯胺(PANI)。结果HRP/H2O2在有机介质环境中催化氧化对苯二胺可得到低聚苯胺,,n=4~9。结果表明,此低聚苯胺溶解性较好。结论生物酶催化反应在有机溶剂与水共混的反应环境中不仅可以完成,而且聚合度、产率相比都优于单一水或有机物作为溶剂的环境,同时实验表明,有机溶剂浓度也会影响聚合物的产率,并且运用UV-Vis、FT-IR、GPC对产物进行了结构表征与分析,证明得到了低聚苯胺。     

酵母中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的分析

分解H2O2和有机过氧化物的含硒谷胱甘肽过氧化物酶(Se-GSH-Px)活性和只分解有机过氧化物的不含硒谷胱甘肽过氧化物酶(non-Se-GSH-Px)活性都存在于酵母中.酵母在无氧的条件下培养,Se-GSH-Px活性减弱,non-Se-GSH-Px活性增强;在含有H2O2或CuSO4的培养基中生长,两种形式的谷胱甘肽过氧化物酶的活性均增加;在含硒的培养基中生长,只有Se-GSH-Px活性增加.实验结果表明,GSH-Px在酵母抗氧化作用中起着重要的作用.     

核酸适配体氯化血红素比色法检测牛奶中的氯霉素

利用一种基于适配体氯化血红素(hemin)比色分析法快速检测牛奶中的氯霉素(chloram-phenicol,CAP)含量.设计两条DNA链,其中一条为CAP的核酸适配体,在其3′端修饰氯化血红素;另一条为CAP核酸适配体的互补链(cDNA),在其5′端修饰hemin.当体系中无CAP时,两条DNA单链杂交形成DNA双...     

有机氯化物的固定化酶处理技术研究

研究了Ｆｅ３Ｏ４固定辣根过氧化物酶的吸附特性、贮存稳定性,考察了固定化酶浓度、ｐＨ值、Ｈ２Ｏ２浓度对催化氧化反应的影响。对均相与非均相酶处理氯酚的效果进行比较,显示固定化酶处理有机氯化物具有很大的优越性。     

酚类化合物酶处理反应机理初探

研究了辣根过氧化物酶处理酚和氯酚的反应机理和动力学特征。根据酶反应动力学特征判断辣根过氧化物酶催化酚和氯酚氧化耦合反应属于乒乓双双反应机制。阐明了Ｈ２Ｏ２抑制机理,测定了酶反应中Ｈ２Ｏ２抑制的动力学参数。通过测定不同底物酶反应的动力学参数,比较了取代基数目及取代位置对酶反应的影响。     

还原气氛和脉石成分对氧化球团还原膨胀的影响

以Fe2O3粉为原料,分别配加SiO2,CaO及MgO制备氧化球团,系统研究了H2和CO两种还原气氛及不同脉石成分对氧化球团还原膨胀的影响,并进行了理论分析.研究表明,还原气氛中H2含量的增加,有利于降低球团的还原膨胀率,还原后球团晶体结构完整,品质较好;Fe2O3球团中配加少量CaO,有利于焙烧时产生少量液相而改善球团的冶金性能,但CaO含量不宜过大;在保证产品质量前提下,适当控制球团矿品位,含有少量SiO2等脉石杂质,有利于焙烧时产生渣相连接,提高球团的强度,降低还原膨胀率;球团中添加MgO有利于形成稳定的晶体结构,从而改善球团的性能.     

四羧基钴酞菁催化氧化邻苯二胺测定过氧化氢

在pH值为9.0的Britton-Robinson缓冲溶液中,以四羧基钴酞菁作为过氧化物模拟酶催化过氧化氢与邻苯二胺的反应,建立一种测定微量过氧化氢的新方法。结果显示,反应的产物2,3-二氨基吩嗪在421nm处有一最大吸收峰,其吸光度值随过氧化氢加入量的增加而增加,吸光度差值与过氧化氢浓度在0～2.07×10-4mol/L范围内呈线性关系,检出限为1.36×10-5mol/L。该方法简单,适用于微量过氧化氢含量的测定。     

小分子对氯化血红素催化性能的影响

以氯化血红素(hemin)催化H2O2氧化邻苯三酚红反应为指示反应,研究了氨基酸、有机碱、表面活性剂等多种小分子对hemin催化性能的影响．发现,L-精氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸、L-色氨酸对hemin的催化性能有明显的增强作用．并使其最适pH更接近天然过氧化物酶的最适pH;具有芳香结构的阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠胶团(SDBS)也可提高hemin的催化性能,且与L-精氨酸、L-组氨酸、L-苯丙氨酸有明显的协同效应．该结果可为hemin与保守氨基酸衍生表面活性荆胶团模拟过氧化物酶研究提供科学依据．     

硒化合物毒性的自由基机理

本文认为在类似生理PH条件下,在谷胱甘肽和氧或过氧化氢都过量时,微量的亚硒酸钠能使鲁米诺产生稳定的化学发光.SeO_8~(2-),Ebselen和Lambda-硒化角叉菜胶都能催化产生活性氧.实验结果表明,硒化合物的毒性可能与其在体内催化产生活性氧自由基有关.本文还用ESR方法进一步证实上述体系产生了活性氧自由基.