抗癌药物L-天冬酰胺酶摇瓶发酵研究

对大肠杆菌 Ｌ－ 天冬酰胺酶的摇瓶发酵进行了研究。在最适条件下发酵 １２ｈ，可使产酶达到６０ｕ／ｍ ｌ。在培养基中添加 ００１％ 硫酸亚铁和 ２％ 的 Ｗ 试剂可分别提高产酶能力 １５％ 和２８％ 。该发酵过程是一个耗氧很大的过程。     

大肠杆菌的培养及L-天冬酰胺酶活力的测定

讨论了大肠杆菌L-天冬酰胺酶发酵液酶活力的影响因素，筛选了大肠杆菌产酶的优化条件。发现了发酵液酶活力的最适pH随缓冲介质的变化而变化；甘氨酸介质中，pH6．50～9．50均适于酶活测定，且pH8．00时酶活最高；硼酸、Tris、磷酸介质中，在pH8．50时，酶活力依次下降；酶反应的适宜温度40～50℃．对菌株培养的研究表明，葡萄糖对产酶有抑制作用，适当提高摇床转速可使发酵液酶活力由原来的136U／mL增至145U／mL，在确定的最优培养条件37℃，pH7．00，250r／min下，产酶稳定期可持续12h。     

pH对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其控制

pH对大肠杆菌L-天冬酰胺酶的产生有很大的影响.通过对不同缓冲体系试验和对摇瓶发酵过程pH变化的分析,了解摇瓶发酵过程中pH对L-天冬酰胺酶合成的影响.采用流加磷酸自控L-天冬酰胺酶发酵过程的pH,可延长发酵周期,有效地防止菌体的过早自溶,大大促进L-天冬酰胺酶的合成,较分批发酵提高产酶83%,达到110 u/mL.发酵动力学特性分析表明,该发酵方式L-天冬酰胺酶的合成与菌体生长不相关,控制比生长速率μ为0.15～0.30 h-1,均有利于L-天冬酰胺酶的合成,可使比产酶速率的最大值Qpmax达到3 922 u/(g h).     

用活化的单甲氧基聚乙二醇修饰L-天冬酰胺酶

使用活化的单甲氧基聚乙二醇（mPEG2）对L－天酰胺酶进行修饰,修饰过程中加入底物L－天冬酰氨保护酶的活性中心。得到的修饰酶抗体结合能力消失,保留酶比活力32．8％,酶的常温稳定性和热稳定性均有显著提高。荧光胺法科氨基数目得出酶分子的92个自由氨基中有51个被修饰剂结合。     

偶联酶法检验L-天冬酰胺酶的动力学分析

根据McClure偶联酶反应理论,通过实验对偶联酶法检验L-天冬酰胺酶活力的反应条件进行了动力学分析,确定了合理的附加酶用量,建立了偶联酶法检验此酶活力程序。用该程序测定的底物K_m值和产物的抑制常数K_1值与文献值相符。     

重组E.coli L-天冬酰胺酶的克隆及表达与纯化

以大肠杆菌菌株(E.coli AS 1.357)基因组为模板,PCR扩增L-天门冬酰胺酶Ⅱ基因(ans B),构建p MD18-Tans B重组克隆载体和p ET-22b-ans B重组表达载体,转化大肠杆菌BL21宿主菌株,重组工程菌经IPTG诱导表达Ans B蛋白,利用重组His-tag,通过Ni-NTA亲和层析纯化Ans B蛋白,利用SDS-PAGE定性分析Ans B蛋白,考马斯亮蓝法测定Ans B蛋白含量,获得纯化的质量浓度为62.7 mg/L的Ans B表达蛋白。重组L-天门冬酰胺酶的纯化收率为42.28%,酶活达137 IU/m L,较原始菌株的(6.87 IU/m L)提高近20倍,并排除大肠杆菌自身L-天门冬酰胺酶本底表达背景。     

固定化L-天冬酰胺酶间歇催化反应的动力学模型

测定了３７°Ｃ下以固定化Ｌ－天冬酰胺酶为催化剂,５０μｍｏｌ／ＬＬ－天冬酰胺的Ｔｒｉｓ缓冲液（ｐＨ＝７．４）为底物的时歇反应转化率,并用建立的数学模型对反应过程进行拟合。计算结果表明,提出的传质－催化反应动力学模型能较好地描述反应过程,并揭示固定化酶的传质－催化过程受扩散作用控制。     

流加葡萄糖对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其动力学特性

着重讨论了葡萄糖对Ｌ－天冬酰胺酶发酵过程的影响,并对其发酵动力学特性进行了分析。采用自动流加葡萄糖控制发酵ｐＨ的工艺,可使Ｌ－天冬酰胺酶活力达到６４ｕ／ｍｌ,比添加葡萄糖的摇瓶发酵提高了１４６％。流加葡萄糖控制ｐＨ的Ｌ－天冬酰胺酶发酵是生长相关的;维持２～５ｍｇ／ｍｌ和１．２～１．４ｍｇ／ｍｌ的葡萄糖浓度,可分别使比生长速率和比产酶速率达到０．８１／ｈ和１２００ｕ／ｇ．ｈ。     

氧载体对L-天冬酰胺酶发酵过程影响的研究

以抗癌药物L－天冬酰胺酶生产为应用背景,针对发酵过程中存在的严重耗氧问题,研究了氧载体对发酵过程的影响。通过对几种氧载体的筛选,认为正十二烷最适合该发酵过程。随后以产物L－天冬酰胺酶活性、菌体浓度以及溶氧水平为主要指标,考察了氧载体在发酵过程中的作用,实验表明,发酵基质中5％正十二烷的添加量为最佳浓度,这种氧载体的加入,明显地提高了发酵介质中的溶氧水平,改善了供氧条件,增加了菌体浓度,提高了L－天冬酰胺酶发酵水平,在优化条件下,可使发酵液最终酶活提高21％左右。     

中国稀土药物研究进展

综述了近10年来中国在稀土药物合成和药理作用方面的研究进展及发展趋向。研究现状反映出：参与药物合成的配体以杂环化合物类为主，稀土元素以镧、镨、钕、钐为多；药理作用研究主要表面在抗肿瘤、抗突变、抗菌、抗病毒以及对消化系统和内分泌系统的影响等方面。     

多不饱和脂肪酸及其抗癌作用研究进展

随着人们生活水平的不断提高,尤其是环境和饮食结构（食用较多动植物油脂）的改变,癌症、高血脂、糖尿病和肥胖等疾病的发病率明显增加;为此,国内外相继开发出一系列具有保健和预防疾病作用的深海鱼油、亚麻籽油、胡桃仁油和花椒籽仁油等新型油脂,其主要成分为具有抗癌、降胆固醇、降血脂、抗炎等功效作用的多不饱和脂肪酸;现就膳食脂肪中具有特殊生物活性的多不饱和脂肪酸的分类、来源、抗癌作用和生理作用进行综述.     

聚酰胺酯的研究进展

扼要介绍了聚酰胺酯的制备方法,重点讨论了聚酰胺酯的研究进展及其结构与性能的关系。在聚酯中引入酰胺基可制得多种类型的改性聚酯,如提高模量,增加原聚酯的吸湿性,改善熔融行为等,并可制得弹性纤维。聚酰胺酯是兼具聚酯和聚酰胺两者优良性能的一类材料。     

蒙药协日嘎-4片利尿作用的实验研究

目的：观察蒙药协日嘎-4片的利尿作用.方法：运用大鼠钟罩法和小鼠滤纸称重法,观察尿量、排尿次数并做尿液分析.结果：蒙药协日嘎-4片明显增加大鼠和小鼠排尿量和排尿次数.结论：蒙药协日嘎-4片有明显的利尿作用而且对尿液成份没有影响.     

水杨酸对植物的生理作用(综述)

综述了近年来水杨酸对植物生理作用的研究进展.水杨酸是植物体内普遍存在的内源信号分子之一,已被确认为是一种植物激素,具有重要的生理功能.研究表明,水杨酸在植物的抗病、抗低温、抗旱和抗盐等方面,以及对果实成熟、园艺产品保鲜和种子萌发等具有明显的作用.     

硝酸酯类药物的耐药性及影响因素与对策

使用硝酸酯类药物常可产生耐药性，耐药性的产生与长期使用、加大药物的剂量有关。其机制可能是，细胞巯基耗竭，使鸟苷酸环化酶活化降低，致血管平滑肌松驰作用减弱。此外，神经体液系统被激活，血容量增加，超氧阴离子增加，也起着一定的作用。防治措施主要采用间歇疗法，补充疏基供体（如乙酰半胱氨酸、蛋氨酸），抗氧化剂的使用。     

药物靶点预测中类别不平衡问题的研究进展

针对药物靶点预测中类别不平衡的问题,归纳总结相关学者提出的各种处理方法,力求改善药物靶点预测中类别不平衡状况,为药物靶点预测的相关研究提供有利的参考和借鉴。以中国知网、维普、万方数据和PubMed作为主要文献检索平台,查询整理相关文献,对药物靶点预测中类别不平衡问题的研究进行综述。共检索到相关有效文献81篇,结果显示类别不平衡问题主要从数据层面、学习算法层面和构造负样本层面着手处理。其中,数据层面的方法主要通过减少或增加一定的数据来平衡数据集;学习算法层面的方法主要利用半监督学习和集成学习思想来使分类算法适用于不平衡数据或构造出平衡数据集;构造负样本层面的方法则是采用一些策略从大量未标记样本中筛选出高可靠的负样本。药物靶点预测中类别不平衡问题的处理方法较多,不同的方法均有特色,但各方法之间无明显差异,都可一定程度上提高药物靶点预测水平,从而为药物靶点预测相关研究提供有力的技术支持。     

凹凸棒粘土比表面改性方法的研究

利用不同的化学试剂和不同的加热时间等方法,对改进凹凸棒粘土的比表面积进行了研究.结果表明,在5%硫-磷混酸并加热一定时间的条件下,凹凸棒粘土的比表面积由原来的140 m2/g增加到400 m2/g.经过XRDI、R、SEM测试,发现其结构和构型均未变化.     

脂质体在药物控释中的应用研究进展

综述了药物控释用脂质体的研究进展情况。介绍了脂质体药物在体内的输送原理,指出了传统脂质体的优缺点,并重点阐述了两类最具发展潜力的脂质体,即空间稳定化脂质体和靶向脂质体。介绍了载药脂质体的应用,尤其是对肿瘤的治疗。