神农架四种特色药用珍稀植物内生真菌的多样性研究

药用植物内生真菌是一类具有广泛的应用前景的微生物资源.本研究以神农架的特色药用植物红豆杉(Taxus Chinensis)、珙桐(Davidia involucrata Baill.)、白三七(Panax notoginseng)、七叶一枝花(Paris polyphylla.)为研究对象,利用rDNA-ITS序列对其健康组织的内生真菌多样性进行分析.结果表明,从这4种植物中共分离出97株归属于23个属具有丰富的生物多样性的内生真菌.其中从红豆杉中分离得到内生真菌70株,分属于21个属优势种属是镰刀菌属(Fusarium sp.)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis sp.)和拟茎点霉属(Phomopsis sp.);从白三七中分离内生真菌12株,归属于毛霉属(Mucor sp.)和镰刀菌属(Fusarium sp.),从七叶一枝花中分离内生真菌6株,归属毛霉属(Mucor sp.)、镰刀菌属(Mucor sp.)和青霉属(Penicillium sp.),从珙桐中分离内生真菌9株炭角菌属(Xylaria sp.)、炭团菌属(Hypoxylon sp.)、拟茎点霉属(Phomopsis sp.)、链格孢属(Alternaria sp.)、柄孢壳属(Podospora sp.)、间座壳属(Diaporthe sp.).     

蛇足石杉内生真菌的分离与鉴定

从健康蛇足石杉的茎中分离内生真菌,用PDA培养基分离纯化菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。从蛇足石杉的茎中分离出5株内生真菌,经鉴定它们分别属于链格孢霉属、镰刀菌属、无孢类群和青霉属。     

古籍书库空气真菌种属调查

对国家图书馆古籍书库中空气真菌进行采样培养,分离纯化出5种优势真菌。经形态学分析和分子生物学鉴定,发现古籍书库中的优势真菌为链格孢属的极细链格孢霉,拟青霉属的拟青霉SL95,枝孢霉属的枝孢样枝孢霉,隐球酵母属的大隐球酵母和曲霉属的杂色曲霉。书库空气真菌种类的确定可为古籍在书库中保存过程中发生真菌侵染时的防治工作提供依据。     

蛇足石杉内生真菌的分离和抗植物病原真菌活性

采用内生菌常规分离法对健康的蛇足石杉植株体内的内生真菌进行了分离和筛选.结果表明:从蛇足石杉的不同部位所分离到的内生真菌的数目有所不同,茎部最多,有100株;其次叶部73株;根部最少,仅7株.经初步鉴定,这180株菌分属于13属,即交链孢属(Alternaria)、头孢霉属(Cephalosporium)、球座菌属(Guignardia)、青霉属(Penicillium)、间座壳属(Diaporthe)、木霉属(Trichoderma)、茎点霉属(Phoma)、曲霉属(Aspergillus)、镰刀菌属(Fusarium)、轮枝孢属(Verticilliun)、组丝核菌属(Phacodium)、瓶梗青霉属(Paecilomyces)、刺盘孢属(Colletotrichum).采用抑制率法对所分离到的菌株稀释十倍的发酵液进行抗植物病原真菌实验,结果表明:部分菌株对病原菌有不同程度的抑制作用,其中对油菜菌核病菌抑制率达100%的有37株,对苹果炭疽病菌抑制率达100%的有27株.     

酿酒葡萄内生真菌群落及抗菌活性测定

从酿酒葡萄(Vitis vinifera.L)植株的各组织中共分离得到462株内生真菌,通过形态鉴定、排重、按比例缩取从中选取出64株内生真菌.采用ITS排序、系统树构建的方法对64株真菌的种属地位及发育关系进行了研究,并对植物病原真菌生长抑制能力进行了测定.系统发育树分析表明酿酒葡萄内生真菌分布于20个属,其中交链孢霉(Alternaria)17.24%,青霉(Penicillium)15.52%,镰刀菌(Fusarium)10.34%,曲霉(Aspergillus)、Discostroma、赤霉菌(Gibberella)、Passalora、Pestalotiopsis各5.17%,交链孢霉、青霉、镰刀菌是其中的优势种群.对植物病原真菌有抗性的菌株分布于15个属,其中镰刀菌属的6株菌对3种指示菌均有抑制作用,镰刀菌是酿酒葡萄植株主要抗植物病原真菌的活性物质来源之一.     

棉铃虫致病菌分离、鉴定及高活力苏云金杆菌的筛选

从山东省棉田自然死亡的棉铃虫上分离到常见致病菌至少有8种,经鉴定为:苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、球孢白僵菌(Beauveriabassiana)、卵孢白僵菌(B.tenella)、青霉菌属真菌(Penicilliumspp.)、拟青霉属真菌(Paecilimycesspp.)和蛾霉属真菌(Nomuraespp.);得到一株对棉铃虫高毒的苏云金杆菌菌株Hu,其毒力比普遍使用的Bt菌系7216高,二者的LC50分别为15.1μg/mL和26.28μg/mL。蛾霉属真菌对棉铃虫有明显的拒食作用和杀伤作用,但人工培养时生长十分缓慢。     

程海的真菌

本文报道了对程海真菌的区系组成及其在湖体中的分布状况、季节变化和优势类群的研究结果。共分离鉴定了真菌20个属。与云南主要高原湖泊滇池、洱海比较,程海的真菌(尤其是鞭毛菌)类群较为贫乏,区系成分也有明显差别,分离到了根囊壶菌(Rhizophlictis)和丝枝霉(Abhanocladium)等属。底泥中的真菌类群具有相对稳定性,但总菌数在雨季明显增加。水中及周丛生物上的真菌类群季节变化明显,旱季里出现的真菌类群较雨季丰富多样,表现出与滇池、洱海相同的规律性。优势类群为细囊霉(Leptolegnia)、根生壶菌(Rhizophydium)、拟青霉(Peacilomyeces)、青霉Penicillium)和枝孢霉(Cladospouium)等属。     

芦苇根际土壤可培养真菌多样性的季节变化

以稀释平板法和形态学、分子生物学鉴定法对芦苇(Phragmites australis)进行了根际土壤可培养真菌的分离鉴定及季节变化对其种群结构影响的分析.结果表明:春、夏、秋、冬四季芦苇根际土壤可培养真菌菌落总数分别是5243、5003、6388和4970,种类数分别为9属21种、8属18种、11属22种和6属21种;真菌的多样性指数、丰富度指数值,从大到小的次序均为秋春夏冬,而均匀度指数为春夏冬秋,多样性指数和丰富度指数在秋季表现最高,但数值波动较大,均匀度指数差别较小.芦苇根际土壤中的真菌资源丰富,共分离出15属54种真菌,优势属为曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、拟青霉属(Paecilomyces)、木霉属(Trichoderma)和链格孢属(Alternaria);金孢属(Chrysosporium)、伏革菌属(Corticium)、粘帚霉属(Gliocladium)、踝节菌属(Talaromyces)和根霉属(Rhizopus)是无植被土壤中没有的菌属.芦苇对土壤真菌多样性具有较强的保护作用,其根际土壤真菌的种类是无植被土壤的1.2倍,数量是无植被土壤的4倍.     

食用菌污染真菌的调查研究

报道了食用菌制种及栽培中的污染真菌5科7属12种:毛霉科(Mucoraceae)1属2种,根霉属(Rhizopus),黑根霉(R.nigricans Ehrenb.),杭州根霉(R.hangchow Yamazaki.),点头根霉(R.reflexus Ehrenb.);长喙壳菌科(Ceratostomataceae)1属1种,毛壳菌属(Chaetomium Kunze et Schmidt),卷顶毛壳菌(C.murorumCda.);丛梗孢科(Moniliaceae)2属5种,青霉属(Penicillium)3种,皮落青霉(P.crustosumThom),葡酒色青霉(P.vinaleumGilman et Abhott.),类阿达青霉(P.adametzioides Abeex Smith.Br.),曲霉属(Aspergillus)2种,黄曲霉(A.flavusLink.),青霉状曲霉(A.penicilloidesSpegazzini);暗梗孢科(Dematiaceae)2属2种,链格孢属(Al-ternariaNees ex Wallr.)1种,细交孢链孢霉(A.tenuis Nees.),枝孢霉属(Cladosporium)1种,禾黑芽枝霉[C.herbarum(Pers.)Link];黑盘孢科(Melanconiaceae)1属1种,拟盘多毛孢菌属(Pestalotiopsis),拟盘多毛孢菌(Pestalotiopsissp.).其中,杭州根霉(R.hangchow),点头根霉(R.reflexus),卷顶毛壳菌(C.murorum),皮落青霉(P.crustosum),葡酒色青霉(P.vinaleum),类阿达青霉(P.adametzioides),青霉状曲霉(A.penicilloides),禾黑芽枝霉(C.herbarum)8种真菌为河南省食用菌污染真菌新记录.     

香蕉内生真菌、放线菌类群分析

采用内生菌分离法对华南种植的健康香蕉根、叶内生真菌、内生放线菌进行分离研究表明：叶内部的内生真菌主要为盘长孢刺盘孢菌物Colletotrichum gloeosporioides占60.77％；而根内部曲霉Aspergillus spp. ，青霉Penicillium spp.，拟青霉Pacecilomyces spp.的分离频率较高，共占70．4％。在根、叶内生放线菌中灰红紫类群链霉菌分离频率最高，分别占65.2％与78．2％；在整个植株中玫瑰浅灰链霉菌Streptomyces roseogriseolus的分离频率最高(占57．7％)，叶中该种链霉菌占69.0％，根中占43．5％。对峙实验表明：内生真菌在体外对香蕉枯萎病的病原菌(尖孢镰刀菌香蕉专化型)不显示明显的拮抗作用而内生放线菌则显示明显的拮抗活性，玫瑰浅灰链霉菌中有42．5％的菌株显示拮抗作用，该种链霉菌在提高香蕉植株对香蕉枯萎病的抗性中的作用值得重视。     

巴氏杆菌对烟草根结线虫的生物防治

巴氏杆菌(Pacteuria penetrans)是根结线虫天敌中的优势种群,该菌能有效控制烟草根结线虫危害,提高烟叶质量和品质.本文阐述烟区巴氏杆菌的生物学、生态学及分布特征,提出了利用巴氏杆菌进行综合防治的关键技术,从而达到减少、控制根结线虫危害的目的.     

淡紫拟青霉IPC土壤抑菌作用影响因子分析

 用土壤平板法测定了云南省24个县代表性植烟土壤对根结线虫生防菌淡紫拟青霉IPC菌株平板培养孢子和液体培养孢子的孢子萌发率的影响,结果不同土样普遍存在抑菌作用,且土样间存在差异,液体培养孢子萌发率高于平板培养孢子萌发率.通过对7种抗生素、8种有机添加物和6种化学农药对该生防菌土壤抑菌作用影响的分析,结果表明添加7种抗生素、6种化学农药和米糠、蚕豆秸杆、玉米秸杆和烟草秸杆能部分解除该生防菌的土壤抑菌作用.     

东北地区保护地土壤真菌多样性的研究

对采集的200余份样品采用稀释平板法、土壤平板法分离,获得近千个菌株,共鉴定出真菌49属98种,其中中国新记录属3个,新记录种11个.初步明确了土壤中常见真菌类群,如曲霉属Aspergillus、镰孢菌属Fusarium、青霉属Penicillium、木霉属Trichoderma等真菌的数量与分布.     

楸树根结线虫病及其病原线虫的初步研究

作者自1986年5月至1987年11月对山东蒙阴县境内天麻林场等地的楸树根结线虫病的感染率、危害、症状及其病原线虫种类进行了调查,并通过对病原的雌虫、雄虫和二龄侵袭期幼虫的形态观察、测量、寄主反应及北卡罗来纳鉴别寄主试验,确认中山寺林场楸树根结线虫病病原为爪哇根结线虫(Meloido-gyne javanica(Treub,1885),Chitwood,1949),杨庄苗圃病原为北方根结线虫(M.hapla Chitwood,1949),而天麻林场与蒙阴县苗圃病原主要为以上二种根结线虫,其中以爪哇根结线虫为优势种,偶见极少量南方根结线虫(M.incognita Chitwood,1949)。本文还对二种主要病原线虫的重要鉴别特征作了较详细的描述,为楸根结线虫病的防治提供了必要的基础资料。     

普可尼亚厚垣菌生物防治应用价值的室内初步评估

通过对8株普可尼亚厚垣菌（Pochonia chlamydosporium)的产厚垣孢子能力、在植物根际的定殖能力、分生孢子对土壤抑菌作用的敏感性及真菌对线虫Panagrellus redivivus的固定率等10项评价指标的测定，初步评估了这8株普可尼亚厚垣菌对线虫的生物防治潜力．结果表明366及284菌株各项指标均优于其它菌株，可以作为研制线虫生防制剂的出发菌株．此外，对普克尼亚厚垣菌的室内生防评估方法进行了分析．     

云南江城雪茄烟根结线虫病的病原鉴定及生物源氨气熏蒸的防治效果研究

雪茄产业是近年来中国烟草行业新的经济增长点,雪茄烟种植中根结线虫病危害严重.然而,目前国内外雪茄烟病原线虫的种类尚未明确,对该病害的绿色防控也鲜有报道.基于雌虫、雄虫和二龄幼虫的形态特征、PCR扩增特异性条带及科赫法则验证结果,将普洱市江城县雪茄烟叶“云雪1号”品种上发生的根结线虫病病原鉴定为爪哇根结线虫（Meloidogyne javanica）.评估了4种食用菌（金针菇、杏鲍菇、香菇、姬菇）菌渣脲酶催化尿素释放氨气熏蒸土壤对雪茄烟叶爪哇根结线虫病的防治效果.结果表明：致死100%二龄幼虫（J2）所需的NH3最低质量浓度为136.8 mg/m3;将含4%尿素的4种菌渣分别与土壤按质量比为1∶18的比例混合,在水分含量约60%、28℃下放置3 d时,各处理组释放的氨气质量浓度在130.9～218.7 mg/m3,对根结线虫病的防效在75.7%～92.3%.研究结果显示“菌渣+尿素”熏蒸土壤对防控雪茄烟根结线虫病具有很好的应用潜力.     

Egg recognition and counting reduce costs of avian conspecific brood parasitism

Birds parasitized by interspecific brood parasites often adopt defences based on egg recognition but such behaviours are puzzlingly rare in species parasitized by members of the same species. Here I show that conspecific egg recognition is frequent, accurate and used in three defences that reduce the high costs of conspecific brood parasitism in American coots. Hosts recognized and rejected many parasitic eggs, reducing the fitness costs of parasitism by half. Recognition without rejection also occurred and some hosts banished parasitic eggs to inferior outer incubation positions. Clutch size comparisons revealed that females combine egg recognition and counting to make clutch size decisions--by counting their own eggs, while ignoring distinctive parasitic eggs, females avoid a maladaptive clutch size reduction. This is clear evidence that female birds use visual rather than tactile cues to regulate their clutch sizes, and provides a rare example of the ecological and evolutionary context of counting in animals.     

厦门海区浮游桡足类卵形态与孵化率的研究

在厦门海区,调查了19种常见的自由产卵的浮游桡足类卵型及其孵化率。发现卵有二种基本型:卵表光滑和具附属刺或鞘结构。卵的形态随种类而异,即使同种也常不同。卵径大小(D)似与产卵雌体大小呈正相关;而与海区水温(t)呈负相关,并可拟合为D=a·t~b。卵孵化率具有明显的季节变化,但和卵型的相关与否则依种的不同而异,这可能与种群不同的生态适应性有关。     

Ovicidal activity of two fungal pathogens （Hyphomycetes）against Tetranychus cinnabarinus （Acarina：Tetranichidae）

The carmine spider mite, Tetranychus cinna-barinus, is an economically important pest that devastates varieties of crops worldwide and develops significant resistance to common chemical pesticides, most of which lack ovicidal activity. In the present study, two isolates of entomopathogenic fungi, Beuaveria bassiana SG8702 and Pae-cilomyces fumosoroseus Pfrl53, were bioassayed against T. cinnabarinus eggs at 25 ℃ under a photophase of 12 : 12 (L:D). Infected eggs on Vicia faba var. minor leaves failed to hatch due to distortion and shrinkage and had fungal outgrowths when maintained under moist conditions. Sprays of B. bassiana conidia to T. cinnabarinus eggs (on leaves) at the concentrations of 58, 298 and 1306 conidia/mm2 (3 replicates per concentration and 35-65 fresh mite eggs per replicate) resulted in corrected egg mortalities of 20.4±4.2%, 36.0±7.6% and 64.6±12.5% (F=43.14, P <0.01), respectively; sprays of P. fumosoroseus at 129, 402 and 2328 conidia/mm2 caused egg mortalities of 16.1±11.1%,     

山东长清栝楼及丹参根结线虫病原虫种类研究

分离鉴定危害栝楼和丹参的植物根结线虫，为两种药用植物根结线虫的防治提供理论依据。采用贝曼漏斗法自采集来的丹参和栝楼根中分离根结线虫，分离后采用光学显微镜观察其形态。结果发现了6种植物根结线虫，其中丹参中分离到5种，即咖啡短体线虫（Pratylenchus coffeae）、南方根结线虫（Meloidogyne incognita）、穿刺短体线虫（Pratylenchus penetrans）、美洲剑线虫（Xiphinema americanum）、纤毛棘刺线虫（Helicotylenchus apiculus）。栝楼中分离到2种，即美洲剑线虫（Xiphinema americanum）、假强壮螺旋线虫（Helicotylenchus pseudorobustus）。该研究可为山东长清地区栝楼及丹参根部病害的防治提供参考依据。