大理地区精神病患者弓形虫感染情况调查

目的：了解大理地区精神病患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神疾病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验对219例精神病患者及91例健康体检者进行血清弓形虫IgG抗体检测。结果：精神病患者弓形虫抗体阳性率为31．96％,健康体检者为20．88％,两者之间差异显著（P〈0．05）。结论：本地区精神病患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群。临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况．对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测。     

吉林地区孕妇弓形虫感染的免疫学检测临床研究

目的探索吉林地区孕妇弓形虫感染情况.方法运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测196例孕妇(妊娠8周～7个月)静脉血中弓形虫(Toxoplasma godii,TO)抗体,即Tox-IgG抗体和Tox-IgM抗体.结果发现有猫犬接触史(指现在或曾经养过猫犬的)的孕妇弓形虫感染率明显高于无猫犬接触史的孕妇(P<0.01),两者有显著性差异;但城市与乡镇孕妇弓形虫感染率无显著性差异(P>0.05);而首次妊娠孕妇与非首次妊娠孕妇弓形虫感染率有显著性差异(P<0.05).结论有无猫犬接触史是孕妇感染弓形虫的主要因素,二者相关性显著.     

弓形虫pcDNA3-ROP1 DNA疫苗免疫小鼠诱导体液免疫应答及保护性的初步观察

目的 观察弓形虫pcDNA3-ROP1 DNA疫苗免疫BALB/C小鼠诱导其体内产生的体液免疫应答及抗虫感染的免疫保护作用.方法 重组质粒用生理盐水稀释后,肌注免疫BALB/C小鼠.分别于免疫后5周和10周用ELISA法测定IgG抗体滴度;免疫鼠腹腔注射弓形虫速殖子攻击感染.结果 经两次检测,均可测到特异性IgG抗体,且抗体的滴度随免疫时间的延长而增高;弓形虫速殖子腹腔攻击感染免疫组小鼠的平均存活时间较对照组延长,统计学有显著性差异(P<0.01).结论 弓形虫pcDNA3-ROP1质粒 DNA疫苗能诱导BALB/C小鼠产生特异性体液免疫应答及部分抗虫免疫保护作用.     

用聚合酶连反应检测异常妊娠妇女弓形虫感染

探讨异常妊娠与弓形虫感染的关系。PCR方法可以用于临床上弓形虫感染的检测。     

弓形虫SAG1,ROP1基因及其复合抗原基因的核酸免疫研究

目的 检测混合SAG1和ROP1编码基因真核表达质粒疫苗诱导小鼠的免疫应答,评价其抗弓形虫感染的保护性免疫效果.方法 将SAG1和编码基因片段克隆入pEGFP-N3表达载体,构建重组质粒;RT-PCR体外验证重组质粒在NH3T3细胞中的表达;通过检测抗体、抗体分型及细胞因子来评价体液免疫和细胞免疫;腹腔内注射毒性株弓形虫速殖子攻击免疫小鼠.结果 RT-PCR结果显示重组质粒能在哺乳动物细胞内表达;SAG1和ROP1混合重组质粒疫苗诱导小鼠产生很强的体液免疫和细胞免疫,对于毒性株弓形虫感染攻击具有保护作用.结论 不同候选抗原编码基因重组质粒能够诱导小鼠产生抗弓形虫感染保护性免疫,提示含有多种成分的混合DNA疫苗的研制可作为核酸免疫研究的策略之一.     

老鼠和人对抗弓形虫感染的先天免疫应答研究概况

白细胞介素12(IL-12)和干扰素γ(IFN-γ)是弓形虫感染刺激机体先天防御系统所产生的两个关键性细胞因子,其信号是通过To1l样受体(TLR)介导的髓样分化因子(MyD88)依赖途径来激活早期的先天免疫反应.研究证实TLR 11在应答弓形虫感染过程中起着主要作用,但是它在人体中仅仅只是个假基因.因此,在缺失TLR11的情况下,人体受到弓形虫感染后如何引发先天性免疫和获得性免疫应答反应还需进一步研究.该文就人和老鼠体内对寄生虫防御起作用的感知分子和效应分子的相似性和区别进行探讨.     

弓形虫疫苗的研究进展

弓形虫是一种呈世界性分布的专性细胞内寄生原虫，哺乳动物和鸟类易受其感染。人类弓形虫感染率也非常高。法国高发区孕妇感染率超过50％，美国为25％-38％。全世界约有1／3的成年人感染，我国人群的感染率为5％-20％，家畜感染率为10％-50％。孕妇感染弓形虫可致流产、早产、死胎或畸胎。免疫功能低下或缺陷者（如艾滋病患者、器官移植患者、恶性肿瘤病人等）感染弓形虫是导致病人死亡的一个主要原因。弓形虫对人类健康及生产、生活的危害已不容忽视。由于弓形虫病的治疗仍未找到理想的药物，因此对其预防的意义远大于治疗。研制安全有效且廉价的弓形虫疫苗正成为当前的研究热点。     

人体弓形虫病的临床表现和诊断

人体弓形虫病是一种由刚地弓形虫(ToxopIasma gondii)引起的全球性寄生虫病。过去由于诊断水平限制,人体病例发现很少,而误认为是一种罕见病。现今已知,本病人体感染相当普遍。据国外报道平均感染率为33%,多数表现为隐性感染。我国早在50年代就从猫、兔、鼠动物体分离出弓形虫。60年代初就有人体病例报告。近年来随着诊断水平的提高,新病例陆续发现,证实我国确实存在人体弓形虫病。据局部地区部分人群血清学调查,感染率分别为 IHA:3.9～6.4%(苏州)、2.6～11.7%(广西)、17.7%(广州);CF:1.4～1.8%(福建)、3.9%(北京);     

恶性肿瘤与弓形虫感染

概述了弓形虫病的流行概况、发病原因、传播途径及防治措施。并通过流行病学资料论述了恶性肿瘤患者对弓形虫的易感性，从而分析了弓形虫感染与恶性肿瘤之间的关系及其临床价值。     

猪弓形虫病流行及其防治研究

一、猪弓形虫病流行及其危害性弓形虫病（toxoplasmosis）是刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）引起的一种世界范围广泛分布的人兽共患病,宿主范围十分广泛,人及大多数动物感染率都较高。弓形虫感染可导致孕妇流产、死胎、畸胎和弱智儿;主要引起免疫功能缺陷或低下病人（如AIDS患者、器官移植患者、肿瘤患者等）死亡;损害脑、心、肺、眼、皮肤等组织。     

RH株弓形虫抗原及高效价多克隆抗体的制备

通过制备和分析弓形虫抗原蛋白，并以此抗原制备高效价的兔抗弓形虫多克隆抗体，为弓形虫的免疫检测和诊断提供有效的方法和途径，同时也为基因工程产物的鉴定提供方便有效的检测手段．速殖子主要来源于感染后72～74h获得的腹水，通过常规方法制备和提纯弓形虫可溶性抗原，采用SDS-AGE方法分析抗原蛋白的分子量．以抗原和福氏佐剂制备成完全和不完全福氏佐剂通过脊柱两旁皮下多点免疫的途径免疫新西兰大白兔，制备兔抗弓形体多克隆抗体，间接ELISA法检测血清中抗体的效价．经过观察所获得的虫体阶段主要处在宿主细胞巨噬细胞内而尚未逸出阶段，通过对结果的分析，所制备的弓形体抗原的分子量主要集中在17～156ku之间，与文献报道有差异，兔抗弓形体抗体效价在60000以上．该研究结果将为弓形体的蛋白质研究，免疫诊断、预防及有效治疗奠定基础．     

弓形虫快速鉴定及国内实验动物感染调查

目的 建立弓形虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 选择2012年12月至2016年12月期间全国60个不同厂家的12 394只实验动物（包括：猴290只、小型猪425只、犬579只、兔1 234只、地鼠372只、豚鼠1 363只、大鼠987只、小鼠7 144只）作为调查对象。采用ELISA方法检测动物血清中弓形虫抗体IgG和循环抗原CAg。利用PCR技术鉴定弓形虫p30基因。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术识别弓形虫虫体。结果 用ELISA从12 394份动物血清中检出4份弓形虫抗体IgG阳性。在这4份抗体IgG阳性样本中都发现了弓形虫虫体和DNA。通过PCR扩增p30基因的分子特性证明了样本中弓形虫病原体的存在。通过直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,在这些样本中发现了弓形虫速殖子。2012年12月至2016年12月期间,对12 394只实验动物调查结果显示,弓形虫感染率为0.03%（4/12 394）。结论 ELISA、PCR、直接镜检实时动态显微视屏摄录技术相结合可完成实验动物的弓形虫检验工作。国内实验动物中存在弓形虫感染。因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的弓形虫病。有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究。     

笼养猕猴种群妊娠异常的相关因素调查分析

目的猕猴作为珍贵的实验动物,资源逐步匮乏,医学生物学研究所灵长类中心笼养猕猴种群自然流产、难产、早产和死胎(统称为妊娠异常)病例时有发生,带来了一定的损失。因此,逐一查找猕猴妊娠异常原因,针对性地提出预防和控制措施,对提高猕猴繁殖率保护猕猴资源具有重大现实意义,同时也为研究人的生殖机理奠定基础。方法通过参照引起人自然流产的因素,又考虑到猴自身的特性,主要从以下方面入手来分析猕猴妊娠异常原因:病原体,猴易感的弓形虫(Tox,toxoplasma),环境因素及其他因素。实验中,我们对三年来收集的29例妊娠异常雌猴样品进行病原体检测分析,并与正常分娩组和正常猴群组做对照。结果统计结果显示,妊娠异常组猕猴弓形虫感染率达34.4%,明显高于正常分娩组(12.5%)和正常猴群组(5%);不同的饲养环境中妊娠异常猕猴的数量也有显著差异。结论弓形虫感染、环境条件造成的应激反应及猕猴自身条件都与猕猴妊娠异常相关,对此,我们针对性地提出了预防和控制措施来降低妊娠异常率。     

Virulent strains of Toxoplasma gondii comprise a single clonal lineage.

The protozoan Toxoplasma gondii is a prevalent parasite in wild and domestic animals worldwide, being transmitted through the food chain by carnivorous feeding and scavenging. Toxoplasma normally divides asexually to yield a haploid form that can infect virtually any vertebrate but it also has a well defined sexual cycle that occurs exclusively in cats. Toxoplasma has become important as an often fatal opportunistic pathogen in patients with AIDS, although the 15-85% of adult human populations that are chronically infected with T. gondii are typically asymptomatic. Infections in immunocompromised hosts have variable outcomes. For example, only 30 to 50% of AIDS patients that are chronically infected with the parasite develop toxoplasmic encephalitis and only about half of acute maternal infections result in congenital disease of the newborn. T. gondii strains differ in their virulence in animals, but the extent to which different strains are related has not been determined. Here we analyse 28 strains from a variety of hosts on five continents and find that the ten virulent strains have an essentially identical genotype, whereas the nonvirulent strains are moderately polymorphic. These data strongly suggest that virulent strains of T. gondii originated from a single lineage which has remained genetically homogeneous despite being globally widespread, and despite the ability of this organism to reproduce sexually.     

Phagosome acidification blocked by intracellular Toxoplasma gondii

Toxoplasma gondii belongs to a group of highly virulent intracellular parasites that reside in host cell vacuoles which resist typical phagosome-lysosome fusion. Live Toxoplasma replicate prodigiously within modified phagocytic vacuoles formed during invagination of the host plasma membrane. In contrast, heat-killed Toxoplasma or specific antibody (heat-inactivated)-coated live Toxoplasma-containing vacuoles readily undergo lysosome fusion and digestion in normal macrophages. Of newly recognized significance to Toxoplasma survival is the microbicidal effect of phagosome acidification, which reportedly can occur independently of fusion with other acidic vesicles. We report here that modified live Toxoplasma-containing vacuoles fail to acidify in normal macrophages, as indicated by the sensitive pH probe fluorescein. In contrast, when live Toxoplasma are coated with specific antibody (heat-inactivated), they trigger phagosome acidification when entering normal macrophages. A similar acidification is observed when normal phagocytes ingest dead Toxoplasma. Extracellular Toxoplasma are highly susceptible to acidic pH conditions, indicating that the acidification block in the modified vacuoles may be important for intracellular survival.     

实验动物弓形虫的检测

通过概述检测弓形虫的主要方法,推论了＂国标＂推荐两种血清学检测方法的主要选择依据,推荐了进一步深入检测且较可靠的免疫学方法。     

抗弓形虫噬菌体单链抗体库的构建及筛选

采用弓形虫可溶性抗原攻击的小鼠,取小鼠脾脏从中提取细胞总RNA,通过RT-PCR扩增鼠源抗体VH和VL基因,并采用重叠PCR (SOE-PCR)方法构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载体pCANTAB5E中,转化于感受态大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.从20个噬菌体克隆中筛选到15个具...     

弓形虫传播模型的稳定性分析

为了研究控制弓形虫病传播的临界值,对疾病进行有效预防,并进行相关的理论分析与研究,针对弓形虫的生活史以及传播途径建立数学模型,分析得到了决定疾病是否继续存在以及传播的基本再生数,当基本再生数小于1时,疾病将逐渐消亡,最终灭绝,当基本再生数大于1时,模型存在唯一的地方病平衡点,此时疾病将一直持续下去,形成地方病。通过建立合适的Lyapunov函数等方法,给出了无病平衡点和地方病平衡点全局渐近稳定的充分条件,同时对建立的数学模型进行了系统、完整的定性和稳定性研究。研究结果对后续弓形虫病的研究及其数学模型的建立有一定的借鉴意义。