应用免疫酶标电镜技术对水仙花时病毒的检测

免疫酶标电镜技术是把免疫酶标技术与电镜技术结合起来，一种灵敏度较高的检测植物体内病毒的有效方法，本实验就是运用该方法对水仙花叶病毒进行检测．     

水仙花叶病毒的免疫酶标检测方法

以Brunt法提取的水仙花叶病毒(Natcissus Mosaic Virus,NMV)为抗原,免疫家兔获得抗血清,经35％饱和度的(NH_4)_2SO_4提纯后与辣根过氧化物酶共价交联,该免疫酶标抗体能与水仙叶片表皮细胞、鳞茎片表皮细胞内的病毒呈特异结合,并催化底物DAB和H_2O_2产生棕色沉淀反应而别于对照组;可作为水仙植株存在NMV的快速、简便的检测手段。     

植物材料中的过氧化物酶细胞化学技术

过氧化物酶细胞化学技术广泛应用于植物细胞学、植物病理学等领域.但由于植物材料本身的特殊性,使得此技术的应用受到不同程度的限制.本文在自己工作及前人研究的基础上,针对过氧化物酶电镜定位的原理、实验程序进行了探讨和改良.     

邻联茴香胺—H2O2—辣根过氧化物酶伏安酶联免疫分析检测四种 …

将邻联茴香胺（ＯＤＡ）－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析体系于测定南芥菜花叶病毒、黄瓜花叶病毒、南方菜豆花叶病毒和芜菁地病毒等四种重要植物病毒,其灵敏度高地酶联免疫吸附显色光度法（ＥＬＩＳＡ）。     

中国对虾血细胞酶细胞化学的初步研究

运用电镜酶细胞化学技术，对中国对虾（Penaeus chinensis)的血细胞和血清中的酚氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和过氧化物酶的酶活性部位进行标记。实验结果显示：酚氧化酶主要以酶原形式存在于大颗粒细胞的颗粒体中，酸性磷酸酶和碱性磷酸酶以酶原形式存在于小颗粒细胞的颗粒体中。健康虾和患病虾血细胞中酶活性的表现形式不尽相同，在病理情况下，颗粒细胞能以细胞解体的方式，排出细胞内的颗粒，转化成有活性的酶，以此提高血淋巴中这几种酶的活性。透明细胞可以吞噬排放颗粒后的颗粒细胞，透明细胞中由高尔基体合成的酸性磷酸酶等溶酶体酶主要用于透明细胞的细胞内消化作用。研究认为：3种血细胞因含有不同的免疫酶以及酶的作用方式不同而具有不同的免疫功能。     

抗坏血酸过氧化物酶在植物抵抗氧化胁迫中的作用

逆境使植物细胞代谢不协调,导致细胞内过氧化物过度积累,对植物造成氧化胁迫．植物体内过氧化物清除系统包括酶促清除系统和非酶系统两大类．本文介绍了抗坏血酸过氧化物酶在清除过氧化氢中的作用,重点论述了存在于叶绿体基质及类囊体膜的两种抗坏血酸过氧化物酶同工酶与植物抗氧化胁迫之间的关系．并对植物缺乏两种叶绿体抗坏血酸过氧化物酶时用于解毒过氧化氢的可能替代途径做了简述．     

菜青虫(Pieris rapae)感染苏云金杆菌晶体毒素后中肠上皮细胞的免疫酶标电镜观察

用双相法提纯青虫菌(Bacillus thuringiensis var.galleriae)的晶体,碱解后免疫家兔获晶体蛋白抗体,然后用纯化的晶体感染莱青虫,半小时至1小时取中肠上皮细胞作酶标电镜观察,结果表明仅在细胞膜上看到抗原的存在。     

禽流感病毒型及亚型特异性免疫酶染色技术的研究

 在获得禽流感病毒型及亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立型及亚型特异性免疫酶染色技术,用于检测或鉴定禽流感病毒．优化反应条件,确定单克隆抗体及辣根过氧化物酶标记二抗的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与病毒分离鉴定比较．结果表明该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床组织样品、鸡胚及细胞培养物中的禽流感病毒．     

植物抗坏血酸过氧化物酶基因家族研究进展

抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC1.11.1.11)是植物体内尤其是叶绿体中清除H2O2的关键酶.就抗坏血酸过氧化物酶的酶学特性、基因家族成员组成与细胞内分布、基因诱导表达特性与其在基因工程中的应用做了介绍,并讨论了其进一步的研究方向.     

绵羊嗜皮菌病间接免疫酶标组织化学检测方法的建立

为建立一种用于绵羊刚果嗜皮菌病的免疫酶标组化法,采用兔抗刚果嗜皮菌抗体及羊抗兔HRP抗体,对2只人工感染刚果嗜皮菌的绵羊病变皮肤切片进行了免疫酶标组化检测,并与分离培养、PCR方法进行比较,结果显示2只人工感染绵羊皮肤病料均为阳性,与PCR、分离培养及刚果嗜皮菌阳性对照符合率为100%;而健康绵羊皮肤切片、大肠杆菌、肠球菌阴性对照涂片均为阴性。建立的免疫酶组化方法可用于检测绵羊刚果嗜皮菌,且具有特异性强,操作简便等特点。     

引起烟草严重病害的五种病毒的酶联免疫及免疫电镜鉴定

本文对田间几种较严重病毒病害进行了酶联免疫，免疫电镜鉴定。在免疫电镜中，我们分别观察到ＰＶＸ、ＰＶＹ、ＴＭＶ、ＴＥＶ病毒粒体及其上的套环结构。ＴＭＶ大小为２９０－３００×２０ｎｍ，ＴＥＶ大小为２３×７００ｎｍ，ＰＶＸ大小为２５×２００ｎｍ，ＰＶＹ大小为１５×４００ｎｍ。我们未发现ＣＭＶ病毒粒体。此外我们还发现了未知病源的烟草病毒花叶病。     

植物钙调素酶联免疫吸附测定（ELISA）酶标一抗竞争法

本实验采用酶标一抗竞争 ELISA 法,完成了以植物 CaM 抗体定量植物 CaM 的方法。本法虽然在测定前需制备标记一抗。但在测定中省去标记二抗,因此快速简便。     

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

随着酶联免疫技术（酶标法）的发展,酶标分析仪已逐步取代原来的分光光度计,酶标法以它的准确、快速、方便等特点,被广泛应用于医院、疾控等医疗单位的艾滋病检测、乙肝病毒检测等,因此酶标仪的测量准确性显得尤为重要。     

用过氧化物酶标记抗体试验测定猪血清中lgA抗体 鉴定猪是否感染传染性胃肠炎病毒

用免疫过氧化物酶记标抗体试验,测定了猪自然感染传染性胃肠炎(TGE,A组)口腔接种TGE强毒(B组)和肌肉接种TGE低毒病毒(C组)或口服TGE低毒病毒(D组)的猪血清中的IgA抗体效价。进而对TGE的自动免疫和血清lgA抗体效价二者之间的关系作了一些研究。     

兔抗小鼠IgG-HRP酶标抗体的制备及应用

制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1：32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。     

植物激素吲哚乙酸的夹心酶联免疫测定法

根据夹心法原理,初步建立了植物激素吲哚乙酸的酶联免疫测定法。在这个方法中,抗体最适包被浓度为20μg/ml。辣根过氧化物酶与抗体的结合物的最适稀释度为1:1000。4％聚乙二醇6000极大地改善了标准曲线,检测范围在每孔1.0至32ng。其它植物激素如脱落酸,吲哚丁酸与抗体的交叉反应很小。对植物材料中吲哚乙酸的含量进行了测定,并与其它作者用别的方法所得结果进行了比较。     

人乳腺癌细胞（MCF—7）相关抗原超微结构的定位观察

本文以二种免疫电镜法对人乳腺癌细胞系—MCF-7细胞肿瘤相关抗原进行定位观察: 1.直接免疫铁蛋白法。采用戊二醛二步结合法制备铁蛋白偶联人乳腺癌单克隆抗体6C_6B_1B_7A_(12)结合物,并以直接法对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 2.间接免疫酶标电镜法。以6C_6B_1B_7A_(12)单克隆抗体为第一抗体,过氧化物酶标记兔抗小鼠IgG抗体的结合物为第二抗体对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 电镜观察结果表明,该肿瘤相关抗原仅分布于MCF-7细胞表面。抗原的存在可能与细胞周期或细胞群体的变异性有关。     

温度对刺槐实生苗中过氧化物酶同工酶的影响

<正>酶系统的多型性有很重要的生物学意义。这方面的研究虽还不够充分,但可认为,包括过氧化物酶在内的同工酶参加了个体发育过程和细胞内的调节作用,使植物具有对非生物环境因素的适应能力。温度在对植物起作用的不同生态因素中占有特殊的地位,能决定种的分布界线和不同气候带的植被成分。植物对温度因素的适应机理已研究多年,但至今未建立满意的抗性理论。从另一方面说,植物抗性研究多偏重于低温的作用,往往忽视高温的影响。为此,我们选用对环境适应性较强的刺槐实生苗作为材料,研究高温和低温对过氧化物酶同工酶的诱导作用,为阐明木本植物抗性提供参考。     

联苯胺—H2O2—HRP伏安酶联免疫分析新体系酶催化反应机理？…

首次利用红外光谱法、紫外－可见光谱法对联苯胺－Ｈ２Ｏ２－辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）伏安酶联免疫分析新体系酶催化反应产物进行了鉴定。结果表明，在ＰＨ４条件睛，ＨＲＰ能催化Ｈ２Ｏ２氧化联苯胺生成偶氮联苯胺，提出了相应的反应机理。     

微过氧化物酶-11与镧离子作用的紫外光谱研究

稀土微肥对农作物的增产作用十分明显.稀土离子进入植物体后,与植物体内的蛋白质、酶、核酸等生物分子必然会发生作用,影响或改变其固有的结构和功能,因此研究稀土离子与生物分子的相互作用对了解稀土使植物增产的机理是很有必要的.活体研究表明,稀土微肥在一定范围内能增强植物细胞保护酶的活性,但系统研究其作用机理尚未见文献报道[1].微过氧化物酶-11（MP-11）是细胞色素C的水解产物,它保留了细胞色素C肽链的11个氨基酸残基和血红素活性中心[2].由于它相对分子质量较小,结构相对比较简单,又与三大植物细胞保护酶之一的过氧化物酶具有相同的活性中心,因此可以被用来作为过氧化物酶的模型化合物.