大熊猫肠道菌抗生素抗性菌转座酶的基因克隆和表达

对大熊猫肠道大肠杆菌抗生素抗性质粒pAm08CD7339全序列的生物信息学分析结果表明,该质粒中存在一个编码转座酶的DNA片段,两条DNA链均可编码转座酶,其编码区长度分别为717 bp和600 bp,编码238个和199个氨基酸残基（分别命名为Transposase238和Transposase199）.以pAm08CD7339质粒DNA为模板,利用PCR方法对2个转座酶基因进行扩增,构建相应表达质粒,转化不同大肠杆菌菌株进行表达,结果表明：Transposase199可以在E.coli BL2     

Transformation of yeast by a replicating hybrid plasmid.

Chimaeric plasmids have been constructed containing a yeast plasmid and fragments of yeast nuclear DNA linked to pMB9, a derivative of the ColEl plasmid from E. coli. Two plasmids were isolated which complement leuB mutations in E. coli. These plasmids have been used to develop a method for transforming a leu2 strain of S. cerevisiae to Leu+ with high frequency. The yeast transformants contained multiple plasmid copies which were recovered by transformation in E. coli. The yeast plasmid sequence recombined intramolecularly during propagation in yeast.     

一类任意维数的p-Laplacian发展方程解的渐近性质

应用比较原理,讨论空间Rn中一类发展的p-Laplacian方程的渐近性质,得到其弱解熄灭的条件.     

Left-handed DNA in restriction fragments and a recombinant plasmid

Circular dichroism and 31P-NMR on synthetic oligomers of (dC-dG) inserted within DNA restriction fragments indicate that the right-handed B-structure can exist in close proximity to the left-handed Z-structure. Also, this salt-induced transition to Z-form in a small (dC-dG) segment (1.3%) of a recombinant plasmid markedly influenced the supercoil of the plasmid. These observations have implications for the postulated role of naturally occurring related simple sequences in the regulation of gene activity.     

重组质粒βhCG—pPIC9K的构建及嗜甲醇酵？…

目的：为用基因重组技术表达ｈＣＧ避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒βｈＣＧ－ｐＰＩＣ９Ｋ,转化嗜甲醇酵母,方法：根据βｈＣＧ的ｃＤＮＡ序列设计两条引物,使上游带ＥｃｏＲⅠ酶切位点,下游带ＮｏｔⅠ酶切位点,以质粒βｈＣＧ－ＰＢＳＫＳ为模板,进行ＰＣＲ扩增反应;将所得的ＤＮＡ片段经ＥｃｏＲⅠ和ＮｏｔⅠ双酶切后用Ｔ４连接酶与ｐＰＩＣ９Ｋ质粒进行连接,然后导入大肠杆菌ＤＨ５α,用ＰＣＲ筛选阳性克     

The CRISPR/Cas bacterial immune system cleaves bacteriophage and plasmid DNA

Bacteria and Archaea have developed several defence strategies against foreign nucleic acids such as viral genomes and plasmids. Among them, clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) loci together with cas (CRISPR-associated) genes form the CRISPR/Cas immune system, which involves partially palindromic repeats separated by short stretches of DNA called spacers, acquired from extrachromosomal elements. It was recently demonstrated that these variable loci can incorporate spacers from infecting bacteriophages and then provide immunity against subsequent bacteriophage infections in a sequence-specific manner. Here we show that the Streptococcus thermophilus CRISPR1/Cas system can also naturally acquire spacers from a self-replicating plasmid containing an antibiotic-resistance gene, leading to plasmid loss. Acquired spacers that match antibiotic-resistance genes provide a novel means to naturally select bacteria that cannot uptake and disseminate such genes. We also provide in vivo evidence that the CRISPR1/Cas system specifically cleaves plasmid and bacteriophage double-stranded DNA within the proto-spacer, at specific sites. Our data show that the CRISPR/Cas immune system is remarkably adapted to cleave invading DNA rapidly and has the potential for exploitation to generate safer microbial strains.     

周期操作对基因工程菌质粒稳定性的影响

研究了定态与周期操作对基因工程酒精酵母质粒稳定性的影响,结果表明:周期操作时系统振荡的周期(T)趋于外加激励的周期;在相同进料量和其他操作条件(pH、DO、T)一定时,周期操作有利于提高底物的利用率并增强质粒的稳定性,同时提出了该操作方式增强质粒稳定性的两种可能机制.     

基于关联图的改进关联规则在推荐系统中的应用

提出了推荐模型中的关联规则挖掘方法的改进,给出了自定义的页面权值的定义,并改进了基于关联图的关联规则挖掘算法,将页面权值应用于关联规则的挖掘中。此算法是利用Web日志中经过预处理后得到的数据进行规则挖掘,将处理后的数据应用正态分布函数来得到页面权值。用页面权值重新计算支持度,最后将得到的支持度应用于改进的规则挖掘算法中,形成一种基于权值的关联图的关联规则算法。     

具有降解对硝基酚功能的硝化菌

硝化细菌是城市污水处理厂水处理系统中的重要功能菌.该硝化菌能否抵御有毒污染物的冲击,是衡量污水处理系统能否稳定运行的指标之一.用对硝基酚(PNP)对普通的硝化菌进行驯化,得到一种具有降解PNP功能的硝化菌.结果表明:经过驯化后的硝化细菌同时具有降解硝基酚和硝化功能.在含有质量浓度为100 mg·L~(-1) PNP的溶液中,与普通硝化菌相比,经过驯化后的硝化菌对NH_4~+-N去除速率高出33%.此外,驯化后的硝化菌对PNP的去除速率是普通硝化菌的33倍.     

Red/ET同源重组系统介导的质粒载体快速构建

Red/ET重组技术是近年来建立的一种基于高效率体内同源重组的新型遗传工程技术,该技术简便、快速.首先,通过一步融合的方法将链霉素抗性基因和氯霉素抗性基因同时克隆至pUC19上,从而构建出含有正反选择标记的载体pRC;其次,用安普霉素抗性基因或者氯霉素抗性基因替换了常用表达载体pET-28b上的卡那霉素抗性基因,改变了其抗性选择标记,得到的表达载体pMT和pCT可以更广泛地应用于不同宿主中;最后,还将启动和终止表达的区域定点插入pACYC184载体中,使其成为可以独立表达蛋白的表达载体p184.本研究所得到的载体为大肠杆菌宿主菌中的基因克隆和蛋白表达提供了基础.     

CTLA4Ig真核表达质粒及穿梭质粒的构建

以表达人CTLA4Ig(hCTLA4Ig)的原核质粒为基础,采用限制性DNA内切酶,DNA连接酶等基因重组技术,构建了能表达该蛋白的真核质粒,ELISA法检出了受转染的真核细胞培养上清液中的蛋白表达.在此基础上构建了含hCTLA4Ig的穿梭质粒.     

一类发展p-Laplacian方程的正解

讨论一类发展p-Laplacian方程(u)/(t)=/(x)(|(u~m)/(x)|p-2(u~m)/(x))的初边值问题的弱解,并证明m(p-1)>1,而且t足够大时弱解是一个正解.     

PbTe/PbSe三维树枝结构的水热合成及形貌控制

采用简单的水热合成法制备了三维树枝结构的PbTe/PbSe复合材料,利用X射线衍射(XRD)、场发射扫描电子显微镜(FESEM)、透射电子显微镜(TEM)等分析手段进行材料结构和形貌表征.研究反应过程的影响因素及晶体的形成机制.结果表明,产物的形貌受反应时间、反应温度、NaOH浓度的控制.基于不同反应时间产物的分析,推测产物的结构可能是一种包覆结构(PbTe被PbSe包覆),并分析了形成这种结构的原因.     

重组pET30a/hsBLyS质粒在BL21(DE3)菌株中的稳定性观察

将构建的含有pET30a/hsBLyS重组质粒的BL21 (DE3)菌种,在含硫酸卡那霉素的平板培养基划线连续传代至 100代 100代次菌种经显微观察,为典型的革兰氏阴性大肠杆菌,生化特性没有改变 提取0、50、100代质粒DNA限制性内切酶切割检查,酶切图谱没有改变,DNA测序未见hsBLyS基因变异 传代前后菌种诱导表达hsBLyS,表达水平和hsBLyS生物学和免疫学活性均无明显差异     

论记体文文体观念的演进

从六朝、唐代、宋明3个历史阶段的文学创作概况探讨记体文文体观念的演进,表明不同的社会阶段,文人对记体文的观念存在明显的差别:六朝时期,虽有记体文作品存世,却没有创作的自觉;唐代出现了记体文创作的自觉,但尚未建立相应的文体理论;有宋以降,人们在继续写作记体文的同时,还表现出理论认识的自觉。     

一个非线性发展方程的相似约化

研究一类约化方程与具有移动自然边界条件的常微分方程相联系的非线性发展方程.并利用C-K直接方法给出其相似约亿方程和相似解     

硅—工艺学的演化和未来

本书为关于硅材料的工艺学发展、演化和今后新进展的专著。硅的应用广泛，是一种重要的应用材料，因此硅的研究受到重视。