新城疫病毒TL1株的分离鉴定及部分生物学特性研究

新城疫是引起很多禽类发病并致死的一种烈性传染病．本研究通过对内蒙古分离株TL1株应用SPF鸡胚传代、电镜形态学观察、HA及HI试验、毒力鉴定、血凝解脱及血凝素热稳定性试验、动物感染试验等进行了研究。发现TL1株属于新城疫病毒强毒株,血凝素热稳定性较差,属快速血凝解脱型．     

新城疫病毒分子生物学研究进展

新城疫是由新城疫病毒引起的极易传染的毁灭性疾病.由于该病发病急、致死率高,对养禽业的发展构成了严重威胁,所以被世界动物卫生组织（OIE）定为A类烈性传染病.本文概述了新城疫病毒的基因结构与功能及基因分型等问题.     

我国新城疫病毒疫苗通过重组影响病毒进化

许多商业新城疫活疫苗被广泛用来阻止我国新城疫病毒的感染.然而,疫苗在我国新城疫病毒群进化过程中所起的作用鲜为人知.为了确定在我国广泛应用的新城疫疫苗是否对该病毒进化进程产生影响,在本研究中,我们对在我国流行的新城疫病毒进行了系统发生和重组分析,获得了一系列NDV株间同源重组的证据.一些重组株的部分遗传物质被发现可能来自疫苗株,这些结果证实疫苗可能通过同源重组影响我国新城疫病毒的进程.由于疫苗与流行株之间的重组可能导致出现疫苗接种失败的后果,因此,在临床上应当尽可能避免疫苗与野生株之间的重组.故在NDV防治过程中,应该采用合适的免疫程序避免这种重组的发生.     

新城疫病毒中国标准强毒F48E8株融合蛋白的结构

对新城疫病毒（ＮＤＶ）中国标准强毒Ｆ４８Ｅ８株融合蛋白的结构进行了分析。该融合蛋白的前体Ｆ０由５５３个氨基酸组成，在第１１６和１１７位氨基酸处被酶切成Ｆ１和Ｆ２亚单位。酶切激活部位序列为ＲＲＱＲＲ↓Ｆ，第１１７位氨基酸为Ｆ，具有ＮＤＶ强毒的特征，Ｆ０上有３个疏水区，其功能分别代表信号肽区、融合诱导区和跨膜结构区。Ｆ０的可糖基化部位有６个，并比较了Ｆ４８Ｅ８株和国外强毒株的氨基酸同源性，与Ｍｉｙａｄ     

嗜神经型新城疫病毒野毒株的电镜观察

采用钼酸铵负染色方法，电镜观察一株野外分离的嗜神经型新城疫病毒。分离的毒株接种ＳＰＦ鸡胚后，收集尿囊液，在电镜下看到大量圆形或扁圆形，直径２００￣３００ｎｍ的病毒颗粒，并且，部分病毒粒子囊膜及纤突清晰可见。     

鸡副粘病毒病的病毒特性和基因型研究及疫病防制

用ＳＰＦ鸡胚分别从不同患病鸡群中分离到４株病毒,经病毒学鉴定,该病毒为禽副粘病毒Ｉ型。根据在疫毒力的国际判定标准测定,４株病毒均属于新城商年;人工感染７１周龄ＳＰＦ鸡均１００％发病致死;应用１株鹅副粘病毒制备的具有对禽副粘病毒Ｉ型共同的群特异性单抗各仅对鹅副粘病毒毒株、鸡副粘病毒毒株呈阳性反应,而对新城疫Ｆ４８Ｅ８,Ｌａｓｏｔａ等毒株不发生反应的特异性单克隆抗体;应用ＲＴ－ＰＣＲ技术对禽副粘病毒Ｉ     

湖南省鸽新城疫病毒的分离与鉴定

用SPF鸡胚从疑似鸽ND病鸽群中分离到一株病毒,根据HA、HI及病毒中和试验结果表明该分离毒为鸽NDV。其生物学特性ICPI为1.38,IVPI为1．0,MDT为99．8h,表现出与鸡NDV不同的生物学特性。     

鸡源绿脓杆菌的分离及主要生物学特性研究

从自然发生绿脓杆菌败血症感染的死亡鸡及眼部感染的病鸡分离到几乎纯一的同种细菌，经对所做纯培养１７株分离菌的主要生物学特性鉴定，结果表明为绿脓杆菌，并通过人工感染试验证明了所分离鉴定的绿脓杆菌的病原学意义。     

一株氨氧化菌的分离及其生物学特性研究

从青岛近海养殖场废水样品中筛选到一株具有硝化与反硝化双重功能的细菌,命名为YZC.菌株YZC兼性厌氧,革兰氏阳性,杆状;菌落干燥、圆形隆起、边缘锯齿状,在不同培养基上菌落颜色有所变化.该菌能以硝酸钠为氮源在好氧条件下进行反硝化作用;能以乙酸钠和硫酸铵分别为碳源和氮源进行硝化作用;该菌能以乙酰铵为唯一碳源和氮源而生长,并能利用多种糖和其他碳源.我们还测定了该菌的最适pH值和其生长盐浓度,以及其水解淀粉和明胶的能力,因此,YZC菌株对自然水体,尤其是废水的生物脱氮具有潜在的研究价值.     

鸭源大肠杆菌O46血清型分离株的主要生物学特性研究

对首次分离出的鸭源致病性大肠杆菌O46血清型分离株(EC1)的主要生物学特性进行研究.结果发现该分离株具有大肠杆菌典型的形态特征、培养特性以及生化特性;腹腔注射5×108CFU/只EC1对成年昆明小鼠的致死率为4/4;药敏试验结果显示,EC1对先锋Ⅳ、先锋Ⅴ、先锋Ⅵ、阿米卡星、奈替米星、壮观霉素等敏感,对强力霉素、土霉素、四环素、红霉素、阿齐霉素耐药.从上述结果可见,鸭源大肠杆菌O46致病性较强,且对多种抗菌药物有抗性,应引起重视.     

新城疫病毒TL1株P、NP、L蛋白基因表达载体的构建及鉴定

将新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因通过RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pGEM-Teasy载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,命名为pCI-P、pCI-NP、pCI-L,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确.纯化后的重组质粒单独转染BHK-21细胞,经间接免疫荧光试验检测到了P、NP、L蛋白的表达.新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因的克隆成功,为即将进行的新城疫病毒的反向遗传操作奠定了基础.     

牙鲆贫血症病毒分离株的特性

用CHSE－214细胞，从患贫血症的牙鲆肾脏组织分离出一株病毒。电镜揭示为无囊膜、6面体、粒子直径约60nm；理化特性表明：病毒复制不受IUdR、BVdU的影响，对氯仿、乙醚不敏感性，热（60℃，30min）、酸（pH3．0，3h）中稳定；可被抗IPNV－Sp、Ab和VR－299株血清中和，其中抗Sp株血清的ND50为1:2560;病毒能在5～30℃增殖，最适为15～25℃；在盐度0．8～2．0％的培养液中，生长无明显差别；在16种鲑科和非鲑科鱼类细胞上，15℃培养1～4d出现CPE；感染细胞丫啶橙染色显示为黄绿色；用BirnavirusYAV株引物，PCR检出该病毒。结果提示该病毒株应属dsRNA的Birnavirus。     

Complete Nucleotide Sequence of a Newly Avirulent Newcastle Disease Virus Hubei 92(HB92) Strain

Newcastledisease (ND )isaseriousaviandiseasewithworldwidedistributionthatcancausesevereeconomicloss esinthepoultryindustry .Thecausativeagentofthedisease ,newcastlediseasevirus(NDV)alsoknownasavianParamyxovirustype 1,isamemberoftheParamyxoviridaeandcontainsasin gle strandednegativesenseRNAgenomeencompassing 15 186nucleotides[1 3] .Theviralgenomecontainssixgenes ,whichen codetheviralnucleoprotein(NP) ,phosphoprotein(P) ,matrixprotein(M ) ,fusionprotein (F) ,hemagglutinin neuraminidase(HN…     

免疫鸡群新城疫病毒检测和分离的研究

以ＳＰＦ鸡抗新城疫病毒（ＮＤＶ）ＩｇＧ为包被抗体（５μｇ／ｍＬ）,兔抗ＮＤＶＶｅｒｏ细胞培养纯化毒ＩｇＧ为第二抗体（１∶２００～６００）,酶标记羊抗兔ＩｇＧ（１∶５０００）为指示抗体建立间接夹心ＥＬＩＳＡ,检测实验免疫鸡、攻毒鸡及现地免疫鸡口腔或泄殖腔外分泌物。结果表明：新城疫无毒力Ｖ４疫苗免疫后２ｄ,口腔内病毒抗原随机检出率为４／１０,第１０天为１０／１０;泄殖腔为０～１／１０,并持续１８ｄ以上。滴鼻攻毒后１ｄ,口腔和泄殖腔内病毒抗原检出率分别是８／１０和６／１０;第１３天,泄殖腔内病毒抗原检出阴性。ＮＤＶ灭活疫苗免疫６０ｄ后攻毒,第２天有７／２０口腔和８／２０泄殖腔检出阳性,并一直到攻毒后第１４天。非免疫对照鸡攻毒后第３天直到死亡时,口腔和泄殖腔均可检出病毒抗原。对各地临床上无任何症状的ＮＤＶ免疫鸡群检测发现,泄殖腔ＮＤＶ抗原阳性率０％～９．３％,分离到８株ＮＤＶ流行毒株,生物学试验证实这些毒株的毒力属中等毒力偏强或强毒。     

中草药预防鸡新城疫病毒感染的试验

用自拟防瘟散饲喂35日龄未免疫鸡，同时设不饲喂防瘟散的对照组，以NDV强毒作1：1000稀释人工感染供试鸡，观察试验组与对照组的发病和死亡情况．结果：人工感染NDV对照组于感染后死亡92．8％，试验组饲喂攻毒后30d有95％健活，HI抗体效价达6log2以上者为47．4％，据此认为，适宜中草药配方可较好地预防NDV强毒的感染。     

微量血凝抑制试验监测技术在鸡新城疫防治中的应用

本文介绍了用微量血凝抑制试验方法监测鸡血清中鸡新城疫（ND）抗体效价在防治该病中三个方面的应用，为临床合理免疫、科学预防提供了依据。     

浅谈禽病ELISA操作技术

在疾病监控方面,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术是应用最为广泛的血清学检测技术,禽病ELISA抗体检测试剂已经大量应用到SPF鸡微生物学监测中。ELISA不仅操作技术上有一定的要求,而且影响因素也较多,如不注意有可能导致试验结果不准确。因此,将禽病检测过程中,ELISA操作各环节需注意的问题归纳总结,与各位同仁一起交流学习。     

鸡新城疫病毒ND-xx08株F基因的克隆及分析

新城疫病毒（NDV）ND-xx08毒株经10 d龄SPF鸡胚增殖后,提取其基因组RNA并反转录成cDNA,用NDV F基因特异性引物,经PCR扩增后获得与F基因预期大小一致的DNA片段。将NDV F基因片段克隆到pMD18-T载体上,并进行EcoR I和Hind III双酶切鉴定和测序鉴定。结果显示,ND-xx08毒株F基因片段的长度为1 662 bp,共编码554个氨基酸,F蛋白的裂解位点为112R-R-Q-K-R-F117,是典型强毒株氨基酸序列结构。将NDV ND-xx08株F基因的47 bp到420 bp序列与新城疫病毒基因型I至基因型Ⅸ毒株的相同序列绘制病毒基因进化树,显示ND-xx08分离株属于基因Ⅶe型。将NDV ND-xx08株F全基因与国内外发表的23株NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列的同源性比较分析,结果表明,其核苷酸序列的同源性在82.7%~97.8%之间,氨基酸同源性在87.5%~97.7%之间。