植物组织培养中的褐变现象及抗褐变研究进展

细胞受损后，由于细胞区隔作用被破坏，毒性酚类或其氧化物醌类物质毒害细胞，导致组织褐变，植物组织培养过程中培养低效或失败。目前认为组织培养中褐变程度主要受外植体材料的基因型、生理状态、种类、大小、预处理、培养条件、培养基及培养方式的影响。在目前的研究中控制褐变的有效方法主要有低温培养、暗培养、勤转种、添加抗氧化剂、增效剂或吸附剂于培养基中等。     

红豆杉组织培养中防褐变措施的研究概述

本文概述了国内外防止红豆杉细胞褐变的研究方法,为今后相关工作提供些借鉴与帮助。     

梨汁防褐变的研究

梨汁加工过程中会产生酶促褐变,影响产品色泽,单因素和正交试验方法被用来研究柠檬酸、抗坏血酸、氯化钠对梨汁褐变的影响,得到梨汁加工过程中的最佳防褐变方案.研究结果显示,复合抑制剂比单一抑制剂效果好,0. 22%抗坏血酸、0. 008%氯化钠和0. 50%柠檬酸混合形成的复合抑制剂的防褐变效果最好,用量较少,口感也更丰富;不仅能够较好地保存梨汁中的酚类物质,而且可以获得色泽较好的梨汁产品.     

油茶组织培养过程中防止褐变的研究

以油茶为试验材料,对其组织培养过程中褐化的发生及防止措施作了探讨,结果表明:褐化发生程度与培养温度、培养基中激素浓度和无机盐含量等因素有关;较高的培养温度、培养基中较高浓度的无机盐、较高浓度的激素及木质化程度高的外植体都会促进褐化的发生;培养基中加入吸附剂能有效地抑制褐化的发生.     

红金银花组织培养中防褐化技术实验

在红金银花的组织培养中,防止组织褐变是培养成功与否的关键技术之一.本实验研究表明:红金银花的未木质化茎段和顶芽较适宜作组织培养的外植体;外植体木质化和半木质化茎段以4~6 mm为宜,未木质化和顶芽茎段的大小以操作方便为宜;0.1%Vc和0.3%的活性炭在红金银花的组织培养中可有效地防止外植体组织褐化;2 mg/L 6-BA易引发褐变,2 mg/L KT和2 mg/Lα-NAA对组织褐变影响与对照相比差异不大;采用仿自然气候(20℃-1500 Lx-4 h-85%→25℃-2000 Lx-8 h-85%→20℃-1500 Lx-4 h-85%→18℃-0 Lx-8 h-85%)培养可有效抑制褐变的发生.     

桑树组织培养中褐化问题的研究

通过对桑树组织培养中褐化问题的研究,得出以下结论：选取桑树基部发现的幼枝上的腋芽做外植体,使用１／２ＭＳ培养基和２．０－５．０ｍｇ／Ｌ ＢＡ,适当提高培养硬度,无菌苗初期勤转种并进行暗处理,降低温度,是削弱或减轻褐化现象的有效措施。     

实生核桃茎段的组织培养及影响因子的研究

以核桃幼年和成年树为试材,取当年生嫩枝上带有腋芽的茎段为外植体,对核桃组织培养的一系列影响因子进行了研究.对不同的抗氧化剂和吸附剂防止核桃初植外植体褐变的效果进行了研究.结果表明:5mg·L~(-1)的抗坏血酸,抑制褐化的效果最佳.以改良DKW为基本培养基,对不同激素组合下外植体的生长分化情况进行了深入探讨.试验表明:幼年树初代培养的最适培养基为:改良DKW+BA1.0+IBA0.1;继代培养以BA1.0+IBA0.01为宜.成年材料初代培养的最适培养基为:改良DKW+BA1.0+IBA0.01,而继代培养以改良DKW+BA1.0+IBA0.001为宜.     

红豆杉细胞培养中抗褐变剂的筛选

研究了８种药剂对红豆杉愈伤组织的抗褐变影响,结果证实：活性炭,水解乳蛋白,植酸等３种药剂的抗褐变效果最好,且对多酚氧化酶的抑制效果也最好。     

园林植物组织培养过程中褐化问题的研究

综述了园林植物组织培养过程中褐变发生的机理、影响褐化的因素及控制褐化的方法等领域的研究进展.     

红豆杉细胞培养中抗褐变剂的筛选

研究了８种药剂对红豆杉愈伤组织的抗褐变影响,结果证实：活性炭（１０００ｇ／Ｌ）、水解乳蛋白（６００ｍｇ／Ｌ）、植酸（１００ｍｇ／Ｌ）等３种药剂的抗褐变效果最好,且对多酚氧化酶的抑制效果也最好．     

植物组织培养中细胞凋亡的初步研究

细胞凋亡是指由基因控制的、细胞遵循自身程序,主动结束生命的过程。现在,许多检测细胞凋亡的方法已经建立,还发现了许多凋亡相关基因和蛋白,并基本阐明了凋亡信号的转导途径。但这些成果多来自对动物的研究。本实验旨在培养愈伤组织,利用紫外线（UV）和过氧化氢（H2O2）诱导愈伤组织的细胞凋亡,通过苯酚品红染色观察,对植物愈伤组织细胞在凋亡过程中的形态变化（主要是细胞核的形态变化）进行初步的研究。结果显示：植物愈伤组织细胞凋亡的初期,染色质断裂、聚缩,并趋向贴附于核膜;中期,细胞核膨大、破裂;晚期,出现凋亡小体。另外,UV对植物愈伤组织诱导的效果比H2O2更好。     

组培甜菊糖苷的变化研究

研究了甜菊组培过程中,甜菊苷（Stevioside,缩写为SS）和丽鲍迪苷A（Rebaudioside,缩写为 RA）两种主要甜味成份的变化以及不同浓度的6-卞氨基腺苷(6-BAP)对愈伤组织合成SS及RA的影响,并初步探讨了根部在糖苷合成过程中的作用.结果表明甜菊愈伤组织合成糖苷的能力随培养时间的不同而异.培养10 d的愈伤组织可检测到少量残余叶片的SS及RA,而培养20 d,30 d的愈伤组织则未检出.培养40 d的愈伤组织仅检测到RA,表明此时的愈伤组织又恢复了合成糖苷的能力,推测与叶绿体的再分化有关.在含有不同浓度6-BAP的培养基中培养2个月的愈伤组织都能够合成糖苷,但所合成糖苷的组分不同.其中,在含有0.5 mg/L,1 mg/L,2 mg/L 6-BAP 培养基中的愈伤组织只能积累RA,且随浓度的增加, RA的含量逐渐降低;而含有3 mg/L 6-BAP培养基中的愈伤组织只能合成SS.有根苗可合成SS及RA.而无根腋芽苗只能合成SS.     

石蒜组织培养研究

探讨了石蒜植物快速繁殖条件,结果表明:以带基盘鳞片为石蒜属植物快速繁殖的外植体诱导分化效果较理想;选用六等分法、四等分法切割鳞茎,六等分法综合效果最好;石蒜属植物适合的培养基成分为MS+BA5mg/L+NAA0.5 mg/L;继代增殖MS+BA6mg/L+NAA0.4mg/L的培养基中石蒜的增殖率最高,苗生长健壮。     

菠萝蜜的组织培养

选取经资源调查及品质分析后获得的优良植株的顶芽和腋芽为材料，诱导腋芽的萌发和不定芽增殖生根．结果表明：从3月下旬到5月上旬是菠萝蜜组织培养大田取材的最佳时间，该时期接种材料污染率（〈50％）及褐变率（〈5％）均较低；启动培养的培养基最佳组合是MS＋6-BA2．0mg／L＋KT1．0mg／L＋GA。0．5mg／L＋蔗糖20g／L，腋芽诱导率为44．6％，KT含量较高（1．0mg／L）有利于腋芽的诱导，诱导率平均为（40％）；不定芽增殖培养的培养基最佳组合是MS＋6-BA1．5mg／L＋KT0．1mg／L＋GA。0．5mg／L＋蔗糖40g／L，增殖率为2．61，蔗糖含量较高（40g／L）有利于不定芽的增殖，增殖率平均为2．34；生根培养以1／2MS＋IBA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L最好，接种8d开始生根，生根率15．8％，15d根长3～4cm，平均根数3～4条．     

石蒜组织培养研究

探讨了石蒜植物快速繁殖条件,结果表明：以带基盘鳞片为石蒜属植物快速繁殖的外植体诱导分化效果较理想;选用六等分法、四等分法切割鳞茎,六等分法综合效果最好;石蒜属植物适合的培养基成分为MS＋BASmg／L＋NAA0．5mg／L;继代增殖MS＋BA6mg／L＋NAA0．4mg／L的培养基中石蒜的增殖率最高,苗生长健壮。     

赤桉（Eucalyptus camaldulensis）组织培养的研究

报道了赤桉组织培养的实验结果，包括愈伤组织的形成过程，不同基本培养基和不同激素条件对丛芽分化的影响．以及不同基本培养基和激素条件对赤桉试管苗生根的影响，并简略介绍了赤桉试管苗的移栽技术．     

杂种石斛兰组织培养的研究

本文用引进的泰国石斛兰熊猫１号（ＰＡＮＤＡＮｏ．１）与熊猫２号（ＰＡＮＤＡＮｏ．２）杂交，并将杂交种子经组织培养，获得无病毒试管苗结果表明：在附加６－ＢＡ０．１～１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．５～１．５ｍｇ／Ｌ的改良ＫＣ及改良ＭＳ培养基上，原球茎的发生率达９０％以上，增殖８～１０倍．生根壮苗培养阶段，以附加５％～１０％马铃薯提取液和５％～１０％香蕉汁（不加任何激素）的处理效果最佳．用冷开水代替蒸馏水，食用白糖代替试剂蔗糖，对杂交石斛兰试管苗的生长无明显影响．     

马铃薯组织培养技术研究

以马铃薯茎尖、茎段和芽体3种不同外植体为材料，用浓度为1．0mg／L的NAA与不同浓度的2，4-D组合诱导愈伤组织；用浓度为0．2mg／L的NAA和不同浓度的BA组合诱导不定芽。试验结果表明：NAA1．0mg／L 2，4-D1．5mg／L最适于愈伤组织的诱导，NAA0．2mg／L BA0．3ms／L最适于不定芽的诱导；NAA对马铃薯根的分化有促进作用。     

日本厚朴组织培养技术的研究

以播种后得到的日本厚朴幼苗为试材对日本厚朴的组织培养技术进行了研究,采用正交试验比较了不同外植体和激素配比对愈伤组织诱导的影响,光培养和暗培养两种培养方式以及不同激素种类和配比对增殖和生根培养的影响。试验结果表明,日本厚朴组织培养的最佳外植体是顶芽,最佳培养方式为暗培养,最佳启动培养基为B5＋2,4-D 4．0mg／L＋NAA1．0mg,L,最佳增殖培养基为B5＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L。     

野百合的组织培养研究

对采自大量子河森林公园的野百合进行鳞片诱导和快速繁殖组织培养研究.结果表明:鳞片下部可直接诱导生芽、生根,是初代培养的最佳外植体;6-BA浓度为0.5mg/L,NAA浓度分别为0.05mg/L,L和0.1mg/L有较高的芽诱导率;在NAA:6-BA=1:20的培养基中愈伤组织诱导结果较好;诱导鳞片生根的6-BA浓度不宜过高,0.5mg/L较适宜生根;鳞片凹面接触培养基仅有愈伤组织形成,凸面接触培养基可产生鳞芽;用低浓度(0.1mg/L～0.5mg/L)IAA诱导生根效果比NAA好;以1/2锯末+1/2洁净河沙为栽培基质的移栽苗长势最好.