聚乙烯醇-海藻酸钠共固定化葡萄糖氧化酶和过氧化氢酶

酶的固定化是提高酶的稳定及降低使用成本的重要途径．通过制备聚乙烯醇(PVA)-海藻酸钠(SA)复合载体,对共固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(CAT)的条件进行了研究,优化了固定化酶制备工艺,研究了固定化酶性质．得出制备固定化酶最佳条件为：载体比例 PVA∶SA＝9．0∶1．5,加酶量10 mg/mL,酶活之比CAT∶GOD＝10∶1．固定化酶的最适反应温度为45℃,比游离酶提高了5℃,最适反应pH 没有发生变化,连续使用6次酶活保留60％．研究结果有一定的应用潜力．     

固定化条件对葡萄糖酶电极响应性能的影响

用微铂盘电极和交联法制得的酶膜构成葡萄糖酶电极，测定其电流响应特性，研究了酶的固定化条件：酶含量以及载体蛋白和交联剂的用量等，对响应特性的影响。提出较适宜的酶电极制备方法，并检测了所得的电极在不同ｐＨ溶液中的灵敏度，指出其最佳操作条件。     

有机氯化物的固定化酶处理技术研究

研究了Ｆｅ３Ｏ４固定辣根过氧化物酶的吸附特性、贮存稳定性,考察了固定化酶浓度、ｐＨ值、Ｈ２Ｏ２浓度对催化氧化反应的影响。对均相与非均相酶处理氯酚的效果进行比较,显示固定化酶处理有机氯化物具有很大的优越性。     

辣根过氧化物酶酶学特性及应用进展

辣根过氧化物酶(HRP)是一种以亚铁血红素为氧化还原中心的过氧化物酶,从植物辣根的根部提取,目前被广泛地应用在污水处理、食品工业、有机合成和分析检测等领域.本文综述了辣根过氧化物酶的结构、固定化及辣根过氧化物酶在各个领域的应用,并对其工业应用前景及未来研究方向进行了探讨.     

辣根过氧化物酶酶学特性及应用进展

辣根过氧化物酶（HRP）是一种以亚铁血红素为氧化还原中心的过氧化物酶,从植物辣根的根部提取,目前被广泛地应用在污水处理、食品工业、有机合成和分析检测等领域。本文综述了辣根过氧化物酶的结构、固定化及辣根过氧化物酶在各个领域的应用,并对其工业应用前景及未来研究方向进行了探讨。     

烯丙胺等离子体处理聚丙烯膜的酶固定化

以烯丙胺等离子体对聚丙烯膜表面进行处理后,利用表面生成的氨基功能基团进行过氧化物酶的固定化,所采用的固定化方法主要有吸附法、戊二醛交联法和分子识别法.结果表明通过等离子体处理后聚丙烯膜表面的氨基基团可以有效地提高酶固定化效率,其中分子识别法可以得到具有最高酶活和酶稳定性的固定化酶膜.     

海藻酸钠固定化β-葡萄糖苷酶的制备及其性质研究

在活性炭、明胶等8种固定化载体筛选的基础上研究了以海藻酸钠为载体,戊二醛为交联剂固定化β-葡萄糖苷酶的条件,并对固定化酶的酶学性质及其在催化制备大豆异黄酮活性苷元染料木素中的应用进行了研究。β-葡萄糖苷酶在0.20%戊二醛溶液中交联2 h后再与20 g/L海藻酸钠混合,然后逐滴加到4 g/LCaCl2溶液中,固化1 h后过滤、洗涤得固定化β-葡萄糖苷酶,固定化酶的酶活回收率为83.67%。固定化酶的最适温度、热稳定性、pH值稳定性以及与底物的亲和力都有所提高,最适pH值基本不变。该固定化酶重复使用6次后其活力仍保持90.94%,染料木苷转化率达60.02%。     

固定化双酶体系（葡萄糖淀粉酶—葡萄糖异构酶）的性质研究

采用大孔型阴离子交换树脂吸附与戊二醛交联法相结合,制备固定化双酶.该酶是将葡萄糖淀粉酶(GA)和葡萄糖异构酶(GI)同时固定在同一载体上,其酶作用的最适pH为6.8,最适温度为55℃,最适底物浓度为15％,热稳定性在50℃以下较稳定.     

HRP的电化学固定化及HRP／P—OPD酶电极的性能

利用电化学固定化方法制备含辣根过氧化物酶的聚邻苯二胺（ＨＲＰ／Ｐ－ＯＰＤ）膜电极，改变聚合用溶液的酸度和所含支持电解质的成分，研究酶的固定化过程及其对所得酶电极性能的影响．结果表明依电聚合条件而异，酶可能以不同途径进入聚合物基质中．支持电解质的品种会影响酶膜的形成速度、组成和稳定性．所得ＨＲＰ／Ｐ－ＯＰＤ膜电极可在溶液不含电子传递体的条件下催化Ｈ２Ｏ２的还原，电聚合过程中进入酶膜的寡聚体可能充当酶的电子传递体     

分子筛固定化葡萄糖淀粉酶性的研究

研究了温度、ｐＨ值、底物流速、底物浓度、底物的葡萄糖当量值（ＤＥ）等因素对分子筛固定化黑曲霉葡萄糖淀粉酶水解淀粉液化液反应性能的影响规律,考察了固定化酶催化剂的寿命,在适宜条件下,供给质量百分数１０％的淀粉液化液,连续２２ｄ可产生ＤＥ值９５以上的糖化液,运转３０ｄ,活力仅下降２５％,以ＤＥ值１５的玉米淀粉液化液为底物,糖化液中葡萄糖的质量百分数可达９７％以上。     

固定化酶流动注射化学发光法测定葡萄糖

本文制备了高活性长寿命的固定葡萄氧化酶，并用于流动流射化学发光分析法测定人血清中葡萄糖的含量，结果令人满意，方法的线性范围为０．４－１００μｍ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，在测量条件下血清中的共存物质均不产生干扰，取样量数微升，一分钟内就可得出结果。     

海藻酸钠固定化脂肪酶的制备及性质研究

本文采用海藻酸钠包埋法得到了固定化脂肪酶。通过条件优化得到了最佳固定化条件：海藻酸钠浓度1.5%,CaCl2浓度3%,固定化时间为1h。该固定化脂肪酶连续反应4批之后,酶活保持稳定,显示了较好的催化稳定性。     

荧光素-GOD-HRP 体系分光光度法测定植物果实组织中的葡萄糖

植物组织中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶（GOD）作用下产生的氧化氢可在辣根过氧化物酶（HRP）的催化作用下使荧光素产生褪色反应,基于这一现象建立了一种选择性测定植物果实组织中葡萄糖含量的方法,该方法可以根据检测对象的不同调整检测范围和灵敏度,同时具备了安全,方便的优点,利用此法对苹果、鸭梨、酥梨中的葡萄糖含量进行了测定,结果与化学发光法一致。     

海藻酸钠-壳聚糖固定化漆酶的研究

采用海藻酸钠包埋法和海藻酸钠-壳聚糖包埋-交联法固定化漆酶,探讨了固定化条件、固定化漆酶及游离酶的酶学性质,结果表明：包埋法和包埋-交联法固定化漆酶的最佳条件分别为海藻酸钠浓度3％、CaCl2浓度1．5％和海藻酸钠浓度2％、CaCl2浓度2％、壳聚糖浓度1．5％、戊二醛浓度1％．两种固定化漆酶的最适pH和最适温度相同,分别为5．0和30℃,游离酶pH为4．6,温度20℃．包埋法固定化漆酶、包埋一交联法固定化漆酶和游离酶的米氏常数分别为3．3,2．8,1．22mmol／L．     

蕹菜过氧化物酶固定化条件分析及固定化对其理化性质影响

利用0.2%聚乙烯醇-海藻酸钠(PVA-CA)作载体,饱和硼酸作交联剂,CaCl2作固定剂固定蕹菜POD,通过单因素试验探究了各个因素对固定化的影响;再通过正交实验分析,发现在饱和硼酸-6%CaCl2,固定化时间为45min,载体与酶液比例为1∶2和0.2%PVA-3%CA条件下固定化蕹菜叶POD最佳.固定化酶的最适温度、温度稳定性均升高,并且重复使用7次后酶活力还剩余50%以上.     

PVA固定化葡萄糖氧化酶电极的研制及应用——血清中葡萄糖含量的测定

本文报道了用聚乙烯醇(PVA)固定葡萄糖氧化酶(GOD)并制成酶电极,对膜的导电性能进行试验,在葡萄糖含量为2×10-5-1×10-3M的试验范围内,响应电流的变化与浓度成线性关系。用此电极以安培法测定血清中葡萄糖含量并与邻甲苯胺比色法、GOD-过氧化物酶比色法进行比较,结果较为满意。     

固定化HRP海藻酸钙/壳聚糖微球催化水溶性导电聚苯胺的合成与表征

以海藻酸钙/壳聚糖微球为载体、用戊二醛共价交联固定于微球表面的辣根过氧化物酶(HRP)催化合成水溶性导电聚苯胺。考察了酶的固定化效果、负载率、比活力、贮存稳定性及酶促聚合特性,并对酶促聚合产物进行了表征。结果表明:共价交联微球固定化HRP可有效地用于水溶性导电聚苯胺的模板导向合成。     

分子筛固定化葡萄糖淀粉酶性能的研究

研究了温度、pH值、底物流速、底物浓度、底物的葡萄糖当量值(DE)等因素对分子筛固定化黑曲霉葡萄糖淀粉酶水解淀粉液化液反应性能的影响规律,考察了固定化酶催化剂的寿命. 在适宜条件下,供给质量百分数10%的淀粉液化液,连续22 d可产生DE值95以上的糖化液,运转30 d,活力仅下降25%. 以DE值15的玉米淀粉液化液为底物,糖化液中葡萄糖的质量百分数可达97%以上.     

交联海藻酸钙凝胶固定化酵母醇脱氢酶研究

对用海藻酸钙包埋、戊二醛交联法固定酵母醇脱氧酶催化苯乙酮酸合成(R)-扁桃酸的过程进行研究,比较游离酶与固定化酶的酶学性质.实验结果表明:固定化酶的热稳定性显著提高,游离酶在70℃时酶蛋白变性失去活力,而固定化酶在65℃保温1 h的能保持64%的酶活力,在70℃时酶活力仍町保留48.6%;固定化酶的最适温度由30℃升至40℃,最适反应pH值由6.8下降为5.8;固定化酶保留了62.72%的游离酶活性, 固定化酶的表观米氏常数和最大反应速率分别为37.33 mmol/L和358.42 nmol/min.该固定化酶具有良好的储存稳定性和操作稳定性.     

导电酶膜葡萄糖传感器的研究

酶的固定化是酶电极制作中最关键的一步，有关酶固定化技术已有许多报道［１￣１０］，本文设计了一种用二茂铁修饰的，以戊二醛为交联剂将葡萄糖氧化酶固定在一特殊的导电纸基上的方法，此法制得的酶膜与玻碳电极组成酶电极，在２５℃，ｐＨ＝７磷酸盐缓冲液中，线性范围为０～１２ｍｍｏｌ／Ｌ，有效使用寿命达３０ｄ．由于此电极的制作方便及其可分离性使之易于商品化．