Ⅳ.胰岛素B链的合成及其与天然A链组合成结晶胰岛素

自从天然胰岛素的A及B链重合成结晶胰岛素成功以后,接着又证明天然胰岛素先经钠-液氨处理,再经过S-磺酸化、还原及重氧化等步骤也有约5％的胰岛素活力恢复。因此,人工合成胰岛素的工作就有可能从化学合成A及B链入手。胰岛素B链是由三十个氨基酸基按下列次序排列的三十肽(包括十六种不同的氨基酸):     

胰岛素B链的合成及其与天然A链重合成结晶胰岛素

前文中报导,我们曾经合成出和Sanger所提出的胰岛素B链氨基酸顺序相同的卅肽S-磺酸化衍生物,它与天然A链重组合后,能表现最高达4％的胰岛素活力。现在,我们又在合成方面作了一些改进,所得的B链S-磺酸化衍生物与天然A链进行重组合,能表现出较高的生物活力,而且此氧化粗产物经仲丁醇-醋酸抽提后,已经获得形状与天然胰岛素完全相同的结晶(图1)。重结晶产物的活力为25个国际单位/毫克(表1)。根据此结果,加上其它的一些分析数据,可以充分说明我们已经完成了胰岛素的半合成工作。     

自合成的A链与天然B链合成结晶牛胰岛素

本文扼要报导自合成的A链S-磺酸衍生物与天然B链S-磺酸衍生物给合而获得结晶牛胰岛素。前文报导后,我们在A链的合成以及最后半合成产物的纯化方面都作了改进。牛胰岛素A链羧端十二肽Ⅰ,即:N-苄氧羰基缬氨酰-S-苄基半胱氨酰-丝氨酰-亮氨酰-酪氨酰-谷氨酰胺酰-亮氨酰-谷氨酰-天门冬酰胺酰-酪氨酰-S-苄基半胱氨酰-天门冬酰胺,曾从下述两种合成途径获得:(1)已知的三肽酰肼     

Ⅱ.从天然胰岛素A及B链重合成结晶胰岛素

天然胰岛素的拆合(以下简称拆合)就是指:用化学办法将天然胰岛素分子的三个硫硫键打开,将胰岛素分子分为沒有生物活力的A、B两条肽链,然后,经过适当处理使此两条链在试管內,重新通过硫硫键接合起来,成为与天然胰岛素生物活力相同的分子。这一工作的过程简单表示如下(图1):     

从胰岛素A及B链重合成胰岛素以及A及B链肽段的合成

胰岛素是一种蛋白质激素,其基本单位是由一条带有一个含-S-S-键小环的肽链 A经二个-S-S-键和另一条肽链 B 连接而成,并具有一定构象。早在这两条肽链的氨基酸排列次序以及三个-S-S-键的位置尚未弄清楚以前,许多科学工作者曾企图用氧化方法使因还原而完全失活的胰岛素重行恢复活力,但都未成功。自从胰岛素的壹级结构阐明后,并没有人很快地去尝试胰岛素的合成,而是在含有两个半胱氨酸基的肽氧化成环规律以及新的 S-保护基的探索方面做了     

Ⅴ.结晶胰岛素的全合成

牛胰岛素的全合成工作是在天然胰岛素的两条链重组合成功,并获得重合成的结晶胰岛素;以及人工合成的A及B链分別与天然胰岛素的B及A链组合成功,并分别获得半合成结晶胰岛素的基础上进行的。我们自1964年第一次获得具有生物活力的全合成产物以来,在工作中不断实践,不断总结,使全合成产物的生物活力逐步提高,抽提纯化的步骤也逐步得到改进。终于在1965年9月17日,获得了首批用人工方法合成的结晶牛胰岛素,实现了世界上人工合成     

结晶胰岛素的全合成 Ⅰ.序言

世界上第一次用人工方法合成的蛋白质已经于1965年在中华人民共和国诞生了。这是我国科学工作者高举毛泽东思想伟大红旗,在奋力攀登世界科学高峯、赶超世界先进科学水平的伟大进军中,为祖国人民在理论科学研究方面爭得的一项世界冠军。人工合成胰岛素的成功,是人类在认识生命、揭开生命奥秘的伟大历程中又迈进了一大步,它标志着人工合成蛋白质的时代已经开始。胰岛素人工合成工作,是大跃进的产物。1958年全国轰轰烈烈、热火朝天的大跃进形势,激发了我们全体同志的革命干劲,大家     

结晶牛胰岛素的全合成

在这篇简报中,我们将初步报告由于我们三个单位五年以来的通力协作最近获得有关全合成结晶牛胰岛素的研究成果。胰岛素的壹级结构是在十年前由Sanger等搞清楚的。近两年来有关胰岛素合成方面,已有不少报导。Katsoyannis等报导了羊胰岛秦A及B锭的合成,并按Dixon和Wardlaw的重组合方法,将所合成的A及B链进行组合,只能观察到微弱的胰岛素活力。Zahn、Meienhofer等从他们所合成的羊胰岛素的A及B链衍生物经钠氨处理脱去保护基因     

高稳定性人胰岛素的晶体学研究——Ⅰ.A21-Ser突变体的结晶和初步晶体学分析

早就发现,胰岛素在酸性溶液中是不稳定的。其主要不稳定因素,是A链C末端残基Asn对酸水解特别敏感,极易发生脱酰胺反应并形成共价连接的二聚体。由于医用胰岛素制剂的重要部分是酸性溶液,因此这构成在临床应用上药剂纯度和保存中的重要问题。特别是近年来,通过蛋白质工程途径获得了一些可溶性长效胰岛素,它们都是酸性条件下的制剂,在过渡到实际应用时都需要解决A21-Asn脱酰胺反应所产生的不稳定问题。丹麦Novo研究所的Markussen等人运用基因定点诱变方法研究了一系列A21位残基取代的突变体人     

有机锑化合物Ⅲ.三环已硫基-■(Ⅲ)的合成

<正> 为了研究抗血吸虫的药物,作者进行了一系列含有三价锑的有机化合物的研究。查阅文献,对硫代锑(Ⅲ)酸酯类已有许多研究。Clemence 和 Le     

苏联著名东方学家B.A.戈尔德列夫斯基院士逝世

<正> 苏联著名的东方学家 B.A.戈尔德列夫斯基院士已于1956年9月10日逝世,享年80岁。B.A.戈尔德列夫斯基是从事土耳其民族语言、文学、历史和人种学方面研究的专家,也是一个卓越的教育家。多年来,他是莫斯科东方学院土耳其语教研室主任,也是莫斯科大学语言系东方组的创始人之     

不同聚合态胰岛素的晶体学研究:重组突变体B9(Ser→Asp)人胰岛素的系列结晶及其初步晶体学研究

用基因工程方法制备的Ｂ９（Ｓｅｒ→Ａｓｐ）人胰岛素突体是一种速效胰岛素。报道这一突变体的晶体生长,初步晶体学分析及衍射数据收集与处理。在不同的晶体生长条件下,分别得到了正交、四方、三方３种晶型的晶体。突变分子在不同晶型的晶体中以不同聚合方式存在,其构建单位分别是二体和六体。通过对这３种不同晶型的晶体结构解析和比较研究,将对此突变体的速效特性的结构基础以及胰岛素在不同条件下的自聚合特征有更深入的了解     

不同聚合态胰岛素的晶体学研究:重组突变体B9(Ser→Asp)人胰岛素的系列结晶及其初步晶体学研究

用基因工程方法制备的B9(Ser→Asp)人胰岛素突变体是一种速效胰岛素.报道这一突变体的晶体生长,初步晶体学分析及衍射数据收集与处理.在不同的晶体生长条件下,分别得到了正交、四方、三方3种晶型的晶体.突变分子在不同晶型的晶体中以不同聚合方式存在,其构建单位分别是二体和六体.通过对这3种不同晶型的晶体结构解析和比较研究,将对此突变体的速效特性的结构基础以及胰岛素在不同条件下的自聚合特征有更深入的了解.     

B.A.奥勃鲁契夫(1863—1956)

著名的苏联地质学家、社会主义劳动英雄、功勋科学家 B.A.奥勃鲁契夫院士于1956年6月19日在莫斯科因病逝世,享年93岁。奥勃鲁契夫院士的名字是我国科学界所熟知的,他从1924年起就是中国地质学会的通讯会员。70年来,他始终不倦地从事中亚细亚、西伯利亚地质的研究,并作出了卓越的贡献。50年前,奥勃鲁契夫院士曾来我国旅行,到过许多     

天然胰岛素及其突变二聚体对盐浓度和pH值的依赖性

基于形式电荷（formal charge）参数设置,用有限差分泊松－玻尔兹曼方法（FDPB）来预测蛋白质结构的稳定性,以人的2Zn天然胰岛素及其速效突变体B9D（B9Ser→Asp）,B9E（B9Ser→Glu）,B9EB10D（B9Ser→Glu,B10His→Asp）和B10D（B10His→Asp）为研究对象,研究了溶液中不同pH值及盐离子浓度对天然胰岛素和突变体稳定性的影响,阐明了这些突变体具有速效特性的结构和理论基础。计算结果与实验相吻合。     

B链氨端去三肽(B1-B3)猪胰岛素的初步晶体学研究

晶体结构的研究表明,三方二锌猪胰岛素分子的B链N端肽段呈一种伸展结构,并相当程度地露于分子的表面,运动性较大。随着周围溶液环境的改变,如在四锌胰岛素中所表现的那样,其取向可做较大幅度的改变,其中分子Ⅱ中的Bl-B8残基由原来的伸展变为α-螺旋,由于B链N端肽段的一级序列,尤其是其中的B1-B3残基,在不同种属中的变化较大,一段时间以来,占主导的看法是认为它与分子的免疫活性相关,而与其生物活性关系不大。Des-Phe~(Bl)-Ins的研究结果支持了这一观点,它几乎保留了天然胰岛素的全部生物活性,同时免疫活性明显下降。但是,随着研究的继续深入,有关Des-(Phe-Val)~(Bl-2)-pig Ins,Des-(Phe-ValAsh)~(Bl-3)-pig Ins,Des-(Phe-Val-Asn-Gln)~(B1-4)-human Ins,Des-(Phe-Val-Asn-Gln-His)~(B1-5)-human Ins等的研究表明,这系列衍生物的生物活性随着N端氨基酸的逐步减少而明显下降。因此,人们越来越认为B链N端残基可能直接参与和胰岛素受体的相互作用。     

天然合成技术与植物基因重组

长期以来，美国农业技术人员利用生物遗传性征培植耐寒和抗病虫害优良农作物品种已经获得良好收效和经验。近期生物工程技术人员又对植物基因构造进行合理调整和重组以便更有效地达到预期目的。目前美国实施的2项试验显示农业科技人员不仅可使农作物增产而且还可能再造农作物品质：迄今采用的天然合成技术实际上可让农作物长出全新材料，其中不乏一些类似塑料的有机聚合物。倘若现行技术证明有大规模推广种植可行性和商业价值．最终将使农作物完全以天然合成方式出产更加保暖的棉花和更加安全的医用材料。承前启后再造聚脂棉去年11月美国威…     

科学家与科学史介绍 著名的苏联地质学家—B.A.奥勃鲁契夫院士

符拉基米尔.阿德纳谢维奇·奥勃鲁契夫(生于1863年10月10日)——是苏联卓越的地质学家和地理学家、西伯利亚和中亚细亚的研究者、科学院院士(1921年为通讯院士,1929年为院士)、社会主义劳动英雄(1945)、俄罗斯苏维埃联邦社会主义共和国功勋科学家(1927)。苏联地理学会名誉主席(1947)。他生于前特维尔斯克省(今俄罗斯苏维埃联邦社会主义共和国的加里宁省)尔热夫斯克县克列彼尼诺村。1886年,在彼得堡矿