一种免疫小鼠制备大量多克隆抗体的新方法

研究了一种用纯抗原免疫小鼠,在抗体产生时注射腹水癌细胞,最后取其腹水(含抗体)的多克隆抗体制备方法,免疫1只小鼠共需免疫抗原60～300μg,可获得15～30mL腹水抗体.此法既适合于大分子质量抗原,也适合于小分子质量抗原.用ELISA、免疫印迹、免疫滴定等方法检测抗体效价、特异性、结合力等,均得到满意的结果.此种抗体在-20或-70℃最少能保持稳定1a以上.     

极谱氢催化波测定低浓度金属离子 Ⅰ、测定高纯锌及氧化锌中的微量镉

J·Heyrovsky与J·Babicka发现痕迹量的蛋白质存在下,在滴汞电极上产生氢催化波。R·Brdicka发现在氯化亚钴存在下,氨性缓冲溶液中(或钴氨络合物),蛋白质产生特殊的双波。他详细地研究了溶液中各种成份对催化波的影响,并指出只有含胱氨酸或半胱氨酸的蛋白质才有极谱催化效应。至于此种催化波的机理R·Brdicka及许多学者曾进行了一系列的研究,而且有许多不同的说法。一般认为,钴与巯基形成络合物并吸附在电极表面,这种吸附的络离子Co(RSH)2~#有利于氢的析出。     

吗啡人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

利用化学法合成吗啡人工抗原,将此抗原免疫新西兰大白兔制备抗吗啡多克隆抗体.利用混合酸酐法将吗啡人工抗原分别与蛋白质载体BSA及OVA偶联,经蛋白质电泳以及紫外扫描检测,证明吗啡人工抗原合成成功.用间酶联免疫检测法检测,证明制备得到了高效价的吗啡多克隆抗体血清,且与吗啡人工抗原具有高特异性反应,可用于吗啡免疫学检测方法的研究.     

Brdicka溶液中β_2—微球蛋白和巯基乙酸的检测

本文首次研究了β_2—微球蛋白和巯基乙酸在Brdicka溶液中产生灵敏“活性钴”催化电流的条件,并在此基础上分别测定了二者的最低检测限和线性范围。实验表明:利用该催化电流进行伏安免疫检测(VIA),其灵敏度将不亚于传统的放射免疫检测(RIA),同时,该法还具有简单、快速、可均相测定的优点。     

氨基化溶胶-凝胶免疫电极检测乳腺癌抗原

利用氨基化溶胶一凝胶(sol-gel)的材料优势，结合交联固定技术，实现了乳腺癌抗体在电极表面的固定化，研制成用于检测乳腺癌抗原的非标记型Sol-gel/GA/抗体膜免疫电极。用红外光谱法和循环伏安法对电极的修饰过程进行表征。该法更好地保持了被固定抗体的活性，增强了免疫电极的稳定性，可用于生物环境中乳腺癌抗原的检测。     

悬汞电极吸附伏安免疫法测定人体免疫球蛋白IgG、IgA、IgM

本文叙述了测定人体免疫球蛋白IgG,IgA,IgM的一个新方法。灵敏度高于均相伏安免疫法,IgM的检测限可达10~(-12)M。可应用于临床分析。     

凯林甙吸附伏安性能的研究

在0.10 mol·L~(-1) KH_2PO_4(pH 5.80)溶液中,用单扫示波极谱法可以得到一个灵敏的凯林甙(KHE)导数极谱波,其峰电位为-1.17V(SCE).峰电流与KHE的浓度在0.02～1.0μmol·L~(-1)范围内有线性关系.检测限为0.01μmol·L~(-1).用循环伏安法和常规脉冲极谱法等方法研究了极谱波的性质,测得还原电子数为2,吸附粒子为KHE中性分子,测得KHE在汞电极上的饱和吸附量为9.30×10~(-11)mol·Cm~(-2),每个KHE分子所占电极面积为1.79 nm~2,并提出了电极反应机理.     

伏安免疫法的研究——镉标记白喉类毒素及白喉抗毒素的极谱测定

本文提出一种简单,快速测定白喉类毒素和白喉抗毒素的伏安免疫法。在NaCl-Na_2B_4O_7支持电介质中,用电活性镉离子(Cd~(2+))标记的白喉类毒素抗原(Ag)的络合物[Ag-Cd]~(2+)在示波极谱仪上的导数还原峰为-670mv(vsS C E)其峰电流直接与白喉类毒素浓度有正比关系,可定量检测白喉类毒素,检测下限5μgml~(-1),其峰电流的降低值与白喉抗毒素浓度有正比关系。可定量检测白喉抗毒素抗体水平,检测下限1×10~(-4)IUml~(-1)。     

SECM的产生收集模式检测小鼠免疫球蛋白IgG

基于扫描电化学显微镜(SECM)产生收集模式,开展小鼠免疫球蛋白IgG(作为抗原)检测研究.利用分子自组装的方式,以硫辛酸为媒介,利用金与硫的键合作用以及羧基与氨基的化学反应将羊抗鼠抗体修饰在金电极上,辣根过氧化氢酶(HRP)标记的小鼠抗原与未标记的小鼠抗原再通过竞争与有限的抗体位点结合,完成小鼠抗原检测平台的搭建.HRP与过氧化氢(H_2O_2)的催化反应使得对苯二酚(H_2Q)被氧化为对苯醌(BQ),BQ在探针上被还原.利用逼近曲线,通过记录加入不同浓度比的小鼠抗原混合液时探针上还原电流的变化来进行待测物(小鼠抗原)的检测,结果表明,小鼠免疫球蛋白IgG在1～1 000 pg·mL~(-1)浓度范围内,探针电流与浓度的变化呈线性关系,检测限为0.1 pg·mL~(-1).     

天然麝香抗原性质的研究

为探讨天然麝香的抗原性质,作者用天然麝香作抗原,免疫家兔制备抗血清。通过效价滴定发现,天然麝香中蛋白质含量虽然较低,仍可作为优良抗原,免疫动物使之产生抗血清。在一定范围内,麝香含量越大,抗体效价越高,动物持续产生抗体的时间也越长。     

茜素红的电化学性质及应用

在 0 .2mol L的磷酸溶液中 ,茜素红有一灵敏极谱峰 ,其峰电位是 - 0 .2 0V (vs .SCE)。峰电流与茜素红的浓度在 5 .0× 1 0 -7～ 5 .0× 1 0 -5mol L范围内呈线性关系 (r =0 .9989) ,检测下限为 3.0× 1 0 -7mol L。利用线性扫描极谱法和循环伏安法研究了茜素红的电化学性质。     

人乳腺癌细胞（MCF—7）相关抗原超微结构的定位观察

本文以二种免疫电镜法对人乳腺癌细胞系—MCF-7细胞肿瘤相关抗原进行定位观察: 1.直接免疫铁蛋白法。采用戊二醛二步结合法制备铁蛋白偶联人乳腺癌单克隆抗体6C_6B_1B_7A_(12)结合物,并以直接法对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 2.间接免疫酶标电镜法。以6C_6B_1B_7A_(12)单克隆抗体为第一抗体,过氧化物酶标记兔抗小鼠IgG抗体的结合物为第二抗体对MCF-7细胞进行包埋前免疫染色。 电镜观察结果表明,该肿瘤相关抗原仅分布于MCF-7细胞表面。抗原的存在可能与细胞周期或细胞群体的变异性有关。     

一种适用于教学的酶联免疫吸附试验的抗原抗体系统制备

目的:探讨设计一种教学成本低、便于教学使用、有助于培养医学生综合实验设计能力和提高实验基本操作技能的酶联免疫吸附实验抗原抗体系统.方法:以提纯的人IgG免疫家兔获取兔抗人IgG抗体,再用其包被酶标反应板,以人血清(人IgG)作抗原,用酶标记羊抗人IgG抗体结合抗原及催化底物显色反应.结果:该双抗体夹心法,底物显色反应清楚肉眼即可作出判定,非特异干扰极小.结论:我们设计的酶联免疫吸附实验-双抗体夹心法原理清晰、便于理解和掌握、教学成本较低、结果易于观察、便于教学大量使用.     

乙酸乙酯二氮杂革极谱行为的研究

在0.2mol/L H_2SO_4支持电解质中,发现乙酸乙醑二氮杂(艹卓)的2个示波极谱还原峰,峰电位E_p_1=-0.65V(vs.SCE)和E_p_2=-0.80V。第1峰电流i_p_1比第2峰电流i_p_2大得多,i_p_1与乙酸乙酯二氮杂(艹卓)的浓度在0.05～4.0μmol/L范围内成正比,检出限为0.01μmol/L,可用于测定。用线性扫描极谱和循环伏安法等手段研究该体系的极谱行为及反应机理,证明该波为不可逆吸附波。     

邻菲啰啉的电化学性质研究

0 .5mol·L- 1 的一氯乙酸和 0 .1g·L- 1 的十二烷基磺酸钠溶液中 ,邻菲啉有一灵敏极谱峰 ,其峰电位是 -0 .75V(vs.SCE) .峰电流与邻菲啉的浓度在 4.0× 10 - 7～ 3.8× 10 - 5mol·L- 1 范围内呈线性关系 (r =0 .9985 ) ,检测下限为 2 .0×10 - 7mol·L- 1 .利用线性扫描极谱法和循环伏安法研究了邻菲啉的电化学性质     

铍与钍试剂-Ⅰ络合物的极谱波(Ⅱ)

本文用示波极谱法和新极谱法研究了铍与钍试剂-I络合物的极谱波,用于铍的定量测定浓度范围可至10~(-7)—10~(-8)mol/L.并研究了各种因素对极谱波的影响.用循环伏安法研究了试剂与络合物还原的可逆性.从电位扫描速度与汞滴静置时间两方面研究了试剂和络合物的还原波,证明还原过程受扩散控制,并无明显的吸附作用.     

新型无标记h-IgG电流型免疫传感器的研究

采用自组装技术,以L-半胱氨酸为基底结合纳米金(NanO-Au),然后再固定抗体,利用L-半胱氨酸对多巴胺的直接电催化作用放大电信号,制备了无酶标记且无电子媒介体的h-IgG电流型免疫传感器.通过交流阻抗、差示脉冲技术考察了电极表面的电化学特性,并对该免疫传感器的作用机理及性能进行了详细研究.免疫反应发生后,将电极转入含多巴胺的缓冲溶液中,用差分脉冲伏安法(DPV)测得h-IgG线性范围为0.80～90 ng/mL,检出限为0.25 ng/mL.实验结果表明,该免疫传感器具有制备简单、灵敏度高、稳定性好、线性范围宽等优点.     

毛细管柱固定抗原流动注射化学发光免疫法测定IgG

目的建立基于毛细管柱固定抗原流动注射增强化学发光免疫法测定IgG分析的新方法。方法以辣根过氧化物酶(HRP)标记抗IgG与抗IgG竞争毛细管内壁表面固定的IgG抗原,利用HRP催化对鲁米诺-过氧化氢-对碘苯酚体系的增强化学发光,建立测定IgG的流动注射化学发光免疫分析方法。结果在选定的实验条件下,化学发光信号与IgG在稀释比为1∶1×1011~1∶1×1010间成良好的线性关系,相关系数为0.996 0。对稀释比为1:5×1010IgG抗体连续11次测定的相对标准偏差为6.5%。结论将该法应用于合成血清样品中IgG抗体的测定,结果满意。     

交流示波极谱滴定的研究(Ⅲ)——EDTA 滴定锌及锌滴定亚铁氰化物

交流示波极谱滴定法可有效地应用于EDTA滴定Zn~(2 )和Zn~(2 )滴定亚铁氰化物。用汞膜电极为极化电极,镀汞银电极为参比电极。此法比指示剂法快连和准确。当氢氧化铁和其它有色沉淀存在时,交流示波极谱滴定仍能进行而指示剂法就受干扰。因此,在氨性溶液中,用铜试剂使Fe~(3 )、Al~(3 )、Pb~(2 )、Cu~(2 )、Mn~(4 )等离子以沉淀形式存在时,锌仍可滴定。讨论了一个快速测定锌矿中锌的测定方法。     

二硫化二丙磺酸钠的示波极谱滴定和电流滴定

在盐酸介质中,二硫化二丙磺酸钠(Ⅰ)可以被KBrO_3—KBr标准溶液直接滴定。其滴定终点可以用在I的dE/dt-E交流示波极谱图上切口的消失指示或用双极化铂电极安培法指示。用两种方法得到的测定结果是一致的。光亮镀铜添加剂二硫化二丙碳酸钠(SC_3H_6SO_3Na SC_3H_6SO_3Na)国内首先由贵州大学化工厂研制生产,产品含量用溴酸钾容量滴定法测定,滴定终点由过量的溴使溶液变黄指示。由于人眼对黄色不敏感,滴定误差较大。有机二硫化物可用电分析容量法测定。我们用交流示波极谱滴定法和双极化铂电极电流滴定法测定了这种有机二硫化物。两种方法测定结果基本一致。