油菜抗菌肽的分离及抑菌机制的初步研究

通过Sephadex G-100凝胶柱层析和HPLC的方法,从油菜籽的水溶性物质中初步分离一种活性肽.采用抑菌圈法测定活性肽的抑菌活性,结果表明,这种活性肽对病原性真菌有明显的抑制作用,对细菌没有抑制效果.对活性肽的稳定性测定表明,活性肽加热到90℃未丧失活性,在pH7的时候抑菌效果最为明显.利用扫描电镜观察到这种活性肽能够很明显影响真菌孢子正常生理形态.     

2016-04国内期刊亮点

正靶向铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3的抗菌先导化合物具有较好的抗菌活性浙江工商大学喻召武等以铜绿假单胞菌粘肽合成酶PBP3为靶点,通过分子对接软件DOCK6.5,对含有104万个小分子化合物的数据库进行大规模虚拟筛选,选取结构相对简单的中选化合物进行合成,得到先导化合物,并验证其抑菌活性。通过grid score进行初筛,筛选出值小于-30 kcal/mol的6万个化合物,接着以amber score进行第二轮筛选,筛出值     

壳聚糖与左氧氟沙星的共价偶联载药复合物的抗菌活性研究

利用化学共价键偶联药物的方法研究了壳聚糖对小分子药物的负载.壳聚糖分子结构中的伯氨基使其具备阳离子聚电解质的特征,可以与喹诺酮类药物左氧氟沙星共价偶联,以此实现了左氧氟沙星的负载,方法简单,直接易得.采用琼脂稀释法考察壳聚糖载药复合物的抑菌活性,研究表明,壳聚糖作为小分子药物运载材料,以共价偶联方式不仅能成功实现药物的负载,并能改善药物抑菌活性.     

南蛇藤内生真菌Y4的分子鉴定及其抑菌活性研究

采用ITS序列分析对从南蛇藤中分离到的一株内生真菌Y4进行了鉴定,并对其液体发酵产物的抑菌活性和化学成分进行了初步研究.结果表明,Y4是子囊菌门的炭疽菌属(Colletetrichum)真菌,其菌丝体乙醇提取物的正丁醇相萃取物对7种植物病原真菌都有较强的抑菌活性,其抑菌活性成分可能为生物碱、内酯、香豆素和有机酸.     

海洋活性物质C03抑菌及抗流感病毒的作用

活性物质CO3是从海洋分离出一种相对分子质量小于5000的抑菌肽，该物质对金黄色葡萄球菌(26001)等多种传染细菌及流感病毒鼠肺适应株FM1，表现出具有较好的抑菌及抗病毒作用，可望开发一种抗菌及抗病毒海洋新药。     

文蛤活性肽的研究现状及应用前景

文蛤活性肽是一类小分子多肽,它具有被肠道直接吸收的营养特性,且具有较强的肿瘤抑制作用、抗氧化活性等,成为当前研究的热门课题之一。该文综述了文蛤活性肽的制备、分离纯化及功能活性方面的研究进展,并阐明文蛤活性肽在医药、食品及化妆品等领域中的潜在应用价值,为进一步开发利用文蛤活性肽提供一定的参考。     

油菜饼蛋白提取物对饲料中霉菌抑制作用的研究

通过硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶柱层析和HPLC分离等方法,从油菜饼的水溶性成分中分离得到蛋白质(肽)提取物.采用抑菌圈法测定该蛋白(肽)提取物的抑菌活性,结果表明对受试真菌有明显的抑制作用.对该蛋白(肽)提取物的稳定性测定表明,加热到90℃未丧失活性,对酸碱的适应范围也较大,在pH 7～8的时候抑菌效果最为明显,对蛋白酶K和胰蛋白酶敏感.通过与几种防腐剂对饲料中霉菌抑制作用的比较发现,油菜饼蛋白(肽)提取物的防霉性能优于恩拉鼎(Enramycin)预混剂、富马酸,仅次于复合型防霉剂霉必克,可以开发成为一种高效的植物源性饲料防腐剂.     

黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs的真核可溶性表达

将黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）抗真菌肽基因Drosomycin（Drs）克隆到pPICZα-A载体中,构建分泌型表达载体pPICZα-A-Drs,转化宿主菌Pichia pastoris X-33.在 AOX1（醇氧化酶）启动子调控下,抗真菌肽DRS成功表达,其分子量约为5 kD.抑菌试验显示,DRS对供试真菌有明显的抑菌活性.采用考马斯亮蓝法测定抗真菌肽的具体表达量,并优化了诱导条件.     

细胞选择性穿膜肽的穿膜效果研究

细胞穿膜肽是一类能够穿透细胞膜并且不损坏细胞膜结构的小分子多肽,该多肽一般由不多于30个氨基酸组成.针对FITC标记的具有肺癌或肝癌细胞选择性的两种穿膜肽,设置不同浓度梯度,分别处理多种肿瘤细胞,荧光显微镜下观察不同作用浓度下细胞中绿色荧光的强弱,并通过流式细胞仪检测含有荧光的细胞数.结果表明:两种细胞穿膜肽具有不同的细胞选择性. CPP33在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于50%,CPP44在作用浓度为10μmol/L时能观察到较强的荧光选择性,流式细胞仪检测含有荧光的细胞数约大于60%.并且随着作用浓度的增加,两种细胞中含有荧光的细胞数不断上升.因此这种针对肿瘤细胞的选择性穿膜肽可能为小分子药物在体内的精确递送提供一种新的方法.     

枯草芽孢杆菌FB123所产抗菌物P3c的分离纯化及其表面活性功能分析

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)FB123的发酵产物经酸沉淀、凝胶层析、反相层析、薄层层析获得一单一条带P3c抗菌组分,原位酸水解茚三酮显色反应显示该组分为环脂肽物质.对P3c组分抑菌及排油圈实验表明,该组分是一种具有广谱抑菌活性的生物表面活性剂.     

太白山4种药用地衣抑菌活性研究

研究太白山4种重要药用地衣的抑菌活性。采用7种肠道致病菌对4种地衣的不同溶剂提取物进行抑菌活性筛选,并对其抑菌活性部位进行LC-MS鉴定。4种地衣甲醇提取物均对肺炎克雷伯氏菌抑制作用较强;金刷把、黑石耳甲醇提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌抑制作用较强。地衣酸是4种地衣的主要抑菌活性部位。4种地衣的甲醇提取物抑制活性最强,发挥抑菌活性的主要成分为地衣酸类。该研究为太白山地衣类草药资源开发提供资料。     

溴代苯甲酰胺类拮抗剂的合成、表征及生物拮抗活性分析

非肽类小分子拮抗剂可以作为一种靶向制剂,用于防治人类HIV-1感染.溴代苯甲酰胺类非肽类小分子具有酰胺、哌啶、卤原子等活性基团而备受关注.该文合成了苯甲酰胺的邻位、间位以及邻位间位二取代溴化物中间体7,以对氯苄氯为原料合成了4-溴-2-溴甲基-1-((4-氯苄基)氧)苯(中间体3),通过中间体3、中间体7合成了3种新的溴代苯甲酰胺类拮抗剂8a-8c,对3种溴代物进行了1H NMR、IR、MS表征及生物活性检测.结果表明,N-烯丙基-N-(1-(5-溴-2-(4-氯苄氧基)苄基)-4-哌啶基)-2,5-二溴苯甲酰胺具有一定的生物活性.     

抗菌肽A-蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克隆与初步分泌表达

采用 Ｅｃｏ Ｒ Ⅰ和 Ｂａｍ Ｈ Ⅰ接头将化学合成的大小为４５ 对碱基的 Ｃ Ａ（１ － ７） Ｍ（５ － １２） 杂合肽基因克隆到 Ｅ．ｃｏｌｉ 分泌表达载体ｐ Ｉ Ｎ－ Ⅲ· Ｏｍｐ Ａ２ 上的 Ｅｃｏ ＲⅠ－ Ｂａｍ ＨⅠ位点之间,并对其在 Ｌｐｐ启动子和 Ｌａｃ 启动子／ 操纵子调控下的分泌表达进行初步研究重组子的地高辛（ Ｄｉｇ） 核酸探针杂交和酶切分析结果表明杂合肽基因克隆成功;抑菌活性的检测结果表明杂合肽基因表达产物有一定的抑菌活性     

宣威火腿中抗菌肽的分离、纯化及鉴定

为探究干腌火腿中生物活性多肽的抗菌活性及其组成,选取产自中国云南省曲靖地区的宣威火腿为材料,通过缓冲液浸提的方法提取火腿中的多肽成分。以粗提多肽对单增李斯特菌和O157型大肠杆菌的生长抑制情况为指标进行抗菌性评价,同时结合离子交换色谱、尺寸排阻色谱等技术对宣威火腿粗多肽进行分离与纯化,并选取其中抑菌活性较强的组分进行氨基酸序列测定。抑菌实验发现宣威火腿粗多肽具有显著抑制单增李斯特菌和O157型大肠杆菌生长的效果；经过逐级分离纯化得到的各组分具有不同的抑菌活性。其中组分7活性最强,对大肠杆菌和李斯特菌的抑菌率分别为98%和56%。通过Nano-LC-ESI-MS/MS肽序列鉴定,最终得到抑菌活性较强的多肽序列,分别为QYYNGEEHVRFDSDVGEYR、LRNLPNLEVLDLGTNFI、FASFEAQGALANIAVDK。将鉴定得到的3条多肽化学合成后进行抑菌实验发现,合成多肽均具有较好的抑菌效果,对O157型大肠杆菌的生长抑制效果均显著高于单增李斯特菌。研究结果表明宣威火腿中含有抑菌效果的肽类成分,从而为阐释宣威火腿多肽的功能特征提供理论依据。     

脂肽微生物的研究进展

天然微生物脂肽本质上是抗菌肽的一种,是微生物在生长过程中产生的次级代谢产物,具有广谱抗菌性和不易产生耐药性等特点,但抗肿瘤、杀虫及溶血栓等生物学活性还有待于深入研究.为深入探究抗菌脂肽的结构特性和抑菌机制,需要高效和有目的 筛选出多种产脂肽微生物.综述了产脂肽的3类微生物脂肽的结构特征、作用机制及应用情况等,分析了产量低及实践应用不成熟等问题,并对未来脂肽的研究方向提出了展望.     

小兴安岭松木醋液的生物活性及抑菌性能研究

为研究木醋液的综合利用技术,采用GC-MS法分析了小兴安岭松木醋液的有机成分,有机相中有机酸类占42.90%,酚类占26.68%。通过化学法分离木醋液分别得到活性组分有机酸类和[有机酸类+酚类],采用牛津杯法研究木醋液及分离活性组分对细菌的抑菌效果。结果表明,在较高浓度下对革兰氏性状不同的细菌均有明显的抑菌效果,活性组分[有机酸类+酚类]的抑菌效果普遍高于有机酸类,木醋液的抑菌活性组分是[有机酸类+酚类],以有机酸为主,酚类为辅,木醋液的抑菌效果优于市售化学品类消毒液,是一种很有应用前景的植物基抑菌剂。     

一株具有广谱抑菌活性的兵马俑芽孢杆菌HS-15的筛选及其抑菌活性研究

采用高浓度土壤菌悬液涂平板法筛选出45株具有抑菌活性的菌株;以其中一株具有较强抑菌活性的菌株为研究对象,通过细胞形态特征、生理生化实验及16S rDNA序列分析等方法,将其鉴定为兵马俑芽孢杆菌,并命名为Bacillus bingmayongensis HS-15;分别用点植法和平板对峙法检测HS-15对细菌和真菌的抑菌活性,结果发现,该菌株对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌都有较强的抑制作用,是一株广谱微生物拮抗菌;发酵条件优化结果表明,28 ℃发酵20 h时,发酵液对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强;经透析袋处理,抑菌活性没有变化,而胰蛋白酶和蛋白酶K处理后,抑菌活性丧失,初步推测抑菌物质为蛋白质类.本研究丰富了产抑菌活性物质微生物菌种资源库,为天然防腐剂的开发提供理论基础.     

生防菌代谢物与杀菌剂复配对花生褐斑病菌的抑制活性

花生褐斑病是由落花生尾孢菌(Cercospora arachidicola)侵染而引起的叶部病害。为了探究生防菌解淀粉芽孢杆菌SJ1606代谢物与化学杀菌剂的复配剂对落花生尾孢菌的抑制活性,首先采用对峙培养法检测了生防菌SJ1606对花生褐斑病菌的室内拮抗效果,然后采用菌丝生长速率法测定了抗菌脂肽、6种化学杀菌剂及抗菌脂肽和化学药剂的复配剂对病菌的抑制活性。结果表明：对峙培养法显示SJ1606对花生褐斑病菌的拮抗效应明显,抑制率达71.8%;抗菌脂肽粗提物对病菌的EC₅₀为1 149.89 mg/L;6种化学杀菌剂对病菌抑制效果以多菌灵最佳,EC₅₀为1.53 mg/L;其次为咪鲜胺、戊唑醇、丙环唑、吡唑醚菌酯,其EC₅₀分别为1.74、2.15、4.50和5.40 mg/L;苯醚甲环唑的抑菌活性最弱,EC₅₀为13.14 mg/L。化学杀菌剂与抗菌脂肽的混剂在一定比例下大多表现出增效作用,其中丙环唑与抗菌脂肽混配对落花生尾孢菌的抑制活性均为增效作用,体积比为1∶9时毒性比最高达1.39;其余5种化...     

厚壳贻贝抗菌肽mytichitin-CB的固相化学合成、复性及功能

抗菌肽是贻贝免疫系统的重要组成部分,也是开发新型生物抗生素的先导分子。厚壳贻贝抗菌肽mytichitin-CB是厚壳贻贝几丁质酶的C端天然裂解产物,具有几丁质结合结构域及抑菌活性。Mytichitin-CB分子在厚壳贻贝血清中含量极低,妨碍了后续研究。为深入研究mytichitin-CB的结构与功能,采用固相化学合成手段,成功合成了mytichitin-CB肽段,采用反相高效液相色谱和质谱对合成后的mytichitin-CB进行了纯度和精确分子量验证。通过氧化复性策略对合成后mytichitin-CB进行了成功复性,复性后的mytichitin-CB开展了抑菌活性测试,热稳定性和几丁质结合活性分析。结果表明合成mytichitin-CB对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及真菌具有明显的抑制活性;经60℃温度处理后,其抑菌活性未见明显下降;合成mytichitin-CB与几丁质具有可逆结合作用。上述研究表明,合成mytichitin-CB具有与天然mytichitin-CB相似的结构与功能,可用于开展后续抗菌机制分析,同时,其较强的抑菌活性和较好的热稳定性为后续基于mytichitin-CB的生物抗生素研发奠定了基础。     

链霉菌中3个新脂肪酰胺类化合物

特殊生境放线菌具有较大的开发前景,因其独特的生存环境可以产生新颖且具有生物活性的次生代谢产物.研究Streptomyces plumbidurans发酵液的次生代谢成分,并寻找具有抗肿瘤及抗菌活性的小分子化合物.利用凝胶Sephadex LH-20柱色谱、D101大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱等分离技术,并采用现代波谱学方法鉴定化合物的结构.采用噻唑蓝比色法测试化合物1～3抗肿瘤细胞毒活性;采用微量稀释法检测体外抑菌活性.从Streptomyces plumbidurans发酵液中确定3个新脂肪酰胺类化合物,并依次命名为：kcacylamide A(1)、kcacylamide B(2)和kcacylamide C(3),生物活性结果显示3个化合物在50μmol/L均无明显抗肿瘤细胞毒活性及抑菌活性.研究首次发现Streptomyces plumbidurans会产生脂肪酰胺类化学物质.