5406刺激素指示菌的筛选和应用的研究

通过对多种酵母和培养基的筛选,选出了热头假丝酵母(Candida tropicalis)或白假丝酵母[Candida alibicans(Robin)Berkhout]×63或6号培养基能反映5406激素中某些组份的含量,并以此为基础选育出优良5406复壮菌株。     

快中子辐照抗菌素产生菌诱变育种的研究

快中子辐照在抗菌素产生菌育种上的应用,早已引起人们的重视.1945年,Myers 和Hanson 曾用42英寸迥旋加速器产生的快中子处理青霉素产生菌.1962年,Alikanian 用10—40千拉德剂量的快中子处理红霉素产生菌(Actinomyces erythreus),得到优良     

抗肿瘤的海洋微生物筛选

本研究利用人体宫颈癌细胞(Hela细胞)为靶细胞,在大连近海12种海洋动植物体内提取微生物。用4种分离培养基培养,分离并得到48株海洋微生物。对单菌落进行发酵,获得其次生代谢产物。随后,进行海洋微生物的发酵次生代谢产物的抗肿瘤鉴定[1-5],研究结果发现,有1种菌株(12#-从黑泥中用MD培养基筛选的菌)发酵     

选育具有青霉素抗性的青霉素高产菌种

以青霉素产生菌87-55-21为出发菌株,筛选具有青霉素抗性的高产菌株,使用紫外线对孢子悬浮液照射110秒后,然后涂布在含有20000u/ml浓度青霉素的固体培养基上,分生孢子的死亡率为98.1%,处理后从176个菌落中筛选出87-58-6菌株,摇瓶发酵单位提高16.7%,87-58-5菌株投入生产后,平均发酵单位提高3.5%.     

家蚕肠道细菌菌落形态与产消化酶相关性研究

【目的】研究肠道细菌的菌落形态与其产酶的相互关系,有助于产酶菌的筛选和家蚕饲用微生态制剂的开发应用.【方法】从家蚕肠道内共分离出细菌28株,挑选菌落形态有明显差异的细菌7株用于产酶菌研究.用筛选培养基鉴别各菌株的产酶情况,并结合16SrDNA序列测定和系统发育分析法鉴定其种属.根据菌落形态和产酶特性,推测细菌的表型基因与产酶基因表达之间存在某种相互联系.【结果】鉴定出产酶的细菌为芽孢杆菌、葡萄球菌、不动杆菌,这些细菌在菌落形态上有一定的相似性,菌落均为乳白色、生长速度快、表面粗糙、边缘不整齐.【结论】细菌菌落形态差异性可作为产酶菌筛选的参考依据,减少实验工作量和节省时间等.为筛选益生菌和饲用微生态制剂的研发提供理论基础.     

三七根腐病原菌(Cylindrocarpon spp.)生物学特性研究

研究了不同温度、pH值、多种培养基和碳氮源营养等对三七根腐病主要致病菌Cylindrocarpon de-structans(2-8)和C.didynum(1-1)菌落扩展、产孢和孢子萌发等的影响.结果表明2个菌株适宜菌落扩展的温度均为20℃;适合产孢的温度均为20~25℃;2种病菌的分生孢子在15~25℃均能萌发,但1-1在20℃时萌发率较高(92.1%),2-8在25℃时萌发率较高(96.5%);1-1菌落适宜扩展的pH为6.0,2-8菌落适宜扩展的pH为5.5;胡萝卜培养基较适宜2种菌的菌落扩展.在供试的以各类碳氮源为营养的培养基上,2种菌的菌落均可很好地扩展,但扩展速度有所差异.     

多轮复合诱变选育抗真菌抗生素高产菌株及其发酵条件研究

对抗真菌抗生紊Terreicacid—179M(简称179M)产生菌黄柄曲霉(Aspergillus flavipes)进行紫外线、亚硝基胍、紫外线加亚硝基服多轮复合诱变，以对自身次生代谢产物抗性作为筛选策略，选育到对自身抗生素抗性提高且发酵相对效价提高到383％的高产菌株。菌落形态观察发现在SabauraMd(SBD)培养基上产孢子丰富且形成黄色孢子和黄色菌丝的179M产量较高。179M最佳发酵温度为28℃，培养基最适起始pH值为6。     

不同分离培养基对检测废水中微生物种群多样性的影响

用 3种不同培养基 (YPG、LB、WW)从焦化废水处理系统中分离培养细菌 ,并用 ERIC-PCR指纹分析的方法 ,对分离物的种群多样性进行了比较研究 .同一悬浮污泥样品在 YPG、LB和 WW培养基上的活菌计数结果分别为 1 .6× 1 0 6 CFU/ ml、7.0× 1 0 5CFU/ ml和 9.8× 1 0 5CFU/ ml.选取最适稀释度 (1 0 - 4) ,分别从 YPG、WW和 LB三种不同培养基平板上分离了 5 6、3 9和 60株菌株 .用 ERIC-PCR指纹图的方法分析这 1 5 5株菌株的多样性 ,结果显示 ,废水培养基 (WW)的选择性最强 ,3 9株分离物只显示 1 2种不同的指纹类型 ;而 YPG培养基的选择性相对较低 ,5 4株分离物中共有 3 0种不同的指纹类型 ,多样性明显 ;LB培养基上因有 2 8%的小菌落无法用 ERIC序列扩增 ,故不能用此方法对其多样性作有效评价 .至此 ,本次实验就分离焦化废水处理系统中的细菌及对分离物进行分子多样性的研究而言 ,选用 YPG培养基最合适 .     

蛇足石杉内生真菌 TL 的分离鉴定与药敏研究

从蛇足石杉植株中分离出内生真菌,通过马铃薯培养基（PDA）培养菌株,利用三点接种法分离纯化,筛选出一株优势菌株TL作为供试菌株通过菌落形态和培养特性观察以及显微摄影技术进行形态观察,对照《真菌鉴定手册》,经鉴定为半知菌亚门( Amon imperfect fungi )丝孢纲（Hyphomycetes）丛梗孢科(Moniliaceae)单端孢属(Trichothecium Link ex Fries)通过单因素试验与正交试验相结合,最终发现对供试菌株具有最佳抑菌效果的药物浓度组合     

产漆酶真菌的筛选、培养及对苯酚的降解

提出了一种新的从土壤中筛选产漆酶真菌的方法．将51个土壤样品分别分散于无菌水中,接种至含有底物A的固体培养基上,培养3d后,当菌落周围的培养基变成褐色时表明该菌株可能产生漆酶．将筛选出的若干菌株与市购的几种真菌分别接种于LB液体培养基中培养7d后,测定培养液中漆酶的活性,表明从土壤样品中筛选得到的真菌L1产酶活性最高．研究了各种培养条件对真菌L1产漆酶能力的影响,并且对该漆酶的性质及其对苯酚的降解进行了研究．结果表明,从产漆酶真菌中筛选出的自选菌(L1),在苯酚作为诱导剂、30℃下PYGM培养基中培养7d,产酶活性最高．该漆酶的最适pH为8．0,最适温度为33℃,Cl^-对其活性抑制较大．该漆酶对浓度为(50-250mg／L)的苯酚有较好的催化降解效果,在24h内最大降解率可达60％以上．     

纤维素降解细菌的筛选、鉴定及产酶条件优化

在成都师范学院校园采集土壤，经过两次富集培养。选择羧甲基纤维素钠-刚果红平板结合降解圈直径和菌落直径的比值进行初筛，筛选得到两株生长良好的菌株，编号S-04和S-10。利用液体产酶培养基，测定羧甲基纤维素酶和滤纸酶的活性进行复筛。综合两种酶活性，最终筛选出纤维素降解效果较好的菌株S-04。以S-04菌株为研究对象，研究其形态观察、革兰氏染色、生理生化鉴定、分子鉴定，并对其产酶条件优化。实验结果显示：S-04号菌株菌落为圆形，表面平滑，边缘较平整，中央较突出，较湿润，菌落整体不透明，呈现淡黄色，革兰氏阴性菌。结合生理生化和分子鉴定，该菌为产碱杆菌属中的粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)。该菌产酶最适碳源为羧甲基纤维素钠(CMC-Na);最适氮源为牛肉膏。     

不用琼脂制成“5406”一级培养基

制造“5406”一级培养基,需要琼脂,但是不易买到,价格又贵。如何使“5406”能在生产队普遍生产,成本更加低廉?甘肃省会宁县大沟中学革命师生带着这个问题学习了毛主席著作,开展了革命大批判,坚持自力更生,通过多次试验,先后用洋槐枝、榆树枝、中国槐树枝、玉米秆以及用洋芋粉代替琼脂,试制成功“5406”一级培养基。(一)榆树枝:用淡碱水浸泡4小时后作培养基,生长良好。     

纤维素降解菌的筛选与诱变育种

采用羧甲基纤维素(CMC)平板初筛和50℃培养,筛选到一株纤维素酶活力较高的耐高温霉菌MY菌株,其CMC培养基最适pH为6.0,培养温度为40℃,最佳产酶时间为5d.以MY菌株为出发菌株,分别采用紫外线和硫酸二乙酯诱变,以透明圈直径与菌落直径的比值(HC值)提高30%以上或菌落形态发生明显变异为筛选指标,共筛选到97株突变株;通过测定粗酶液CMC酶活力,从中筛选出29株CMC酶活力提高30%以上的菌株;结合突变菌株的传代稳定性实验,最后筛选得到1株性能优良的霉菌MY004突变株,其CMC酶活力比原始菌株MY提高了80.6%.     

一株降解淀粉填充聚乙烯放线菌的筛选以及诱变选育

目前对聚乙烯降解菌的研究主要集中在细菌和真菌中,放线菌作为聚乙烯降解菌株还鲜有报道.利用添加改良淀粉聚乙烯粉末为唯一碳源和能源的无碳源培养基,从土壤中分离筛选得到一株可以降解淀粉聚乙烯的降解菌LBX-2,通过形态学观察生理生化反应,结合16Sr DNA序列进行分类鉴定,菌株LBX-2与Streptomyces albogriseolus的亲缘关系最近,形态学观察和生理生化指标也与之相符,初步鉴定为白浅灰链霉菌.以筛选得到的降解菌LBX-2作为出发菌株,采用吖啶橙-紫外线复合诱变的方法进行诱变选育,吖啶橙最佳诱变剂量为1×10~(-2)g/m L,紫外线最佳诱变持续时间为50 s,诱变株较之原始菌株降解能力提高了41.80%,是一株具有研究和应用潜力的降解淀粉聚乙烯的菌株.     

林可霉素菌种选育及摇瓶培养基的优化

以林可霉素生产菌L10-18林可链霉菌(Streptomyces linloinensis)为出发菌株,采用紫外线(UV)、甲基磺酸乙酯(EMS)进行双重复合诱变处理,以终点产物林可霉素的产率为选择压力进行菌株筛选,结果表明,诱变得到的林可霉素抗性突变株L13-6-3发酵水平比出发菌株提高14.1%.再经过培养基优化,其组成为葡萄糖12 g/L,豆饼粉3.0 g/L,(NH_4)_2S0_40.6 g/L,玉米浆0.2 g/L的条件下,诱变菌株发酵水平再提高5.2%.     

水源水中2-MIB降解菌的筛选

针对特定水处理工艺,研究了投加2-MIB前后水中微生物种群的变化,建立了筛选分离2-MIB降解菌的方法.以生物膜生长成熟的活性炭连续处理含有较高浓度2-MIB水样,然后从活性炭表面取样,用2-MIB为惟一碳源的无机盐培养基筛选和驯养,最后进行划线分离,成功得到2-MIB降解菌种.通过16SrRNA分析,该菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas spp.).     

五氯酚钠生物降解菌的初步筛选

用五氯酚钠浓度梯度培养基平板,从土样中筛选五氯酚钠耐受菌;再以五氯酚钠为唯一碳源进行摇瓶培养,筛选五氯酚钠降解菌。以不同浓度的五氯酚钠药物培养基对五氯酚钠降解菌的耐受能力进行测定。结果筛选出对五氯酚钠的耐受能力为0.8 g/L的菌株,并能以五氯酚钠为唯一碳源生长的细菌3株。     

鰤鱼诺卡氏菌与黄粉色诺卡氏菌原生质体融合的研究

鰤鱼诺卡氏菌是鱼类诺卡氏菌病的主要病原,黄粉色诺卡氏菌为一种近缘无毒环境诺卡氏菌.本实验研究主要以鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌为两亲本,开展了原生质体融合研究.针对诺卡氏菌细胞壁厚的特性,本实验对原生质体制备时的溶菌酶脱壁时间进行了筛选,确定鰤鱼诺卡氏菌和黄粉色诺卡氏菌的最佳脱壁时间分别是65 min和100 min.用聚乙二醇促使两亲本菌的原生质体融合后,通过选择性培养基培养、菌落形态筛选、革兰氏染色观察、16S rRNA测序等方法,对融合菌株进行了初步鉴定.鉴定结果表明:融合菌株的菌落形态较两亲本发生了改变,为革兰氏阳性菌,通过16S rRNA基因序列比对,其与鰤鱼诺卡氏菌的同源性为99%.融合菌株的毒力较鰤鱼诺卡氏菌野生株有所降低.本研究为鰤鱼诺卡氏菌活疫苗的研制提供了新思路,对鱼类诺卡氏菌病的防治具有一定的潜在价值.     

用Fe3+选择性分离虾青素高产菌株的研究

用Fe^3＋作为筛选剂选择性分离虾青素高产菌株,实验结果表明,海洋红酵母的菌落形成率随平板培养基中Fe^3＋浓度的增加而降低,当Fe^3＋浓度为5 mmol/L时,海洋红酵母的菌落形成率降至0;海洋红酵母的虾青素体积产率和细胞产率随摇瓶培养基中Fe^3＋浓度的增加而降低;在含有5 mmol/L Fe^3＋的平板培养基中分离甲基磺酸乙酯（EMS）诱变得到的海洋红酵母,大约有31%的菌落虾青素体积产率高于出发菌株.在海洋红酵母的分离培养基中加入较高浓度的Fe^3＋可以淘汰低产突变株及野生型菌株,可以提高海洋红酵母虾青素高产菌株的筛选效率.     

解钾菌的筛选

以钾长石粉为惟一钾源的硅酸盐细茵选择性培养基筛选能够降解土壤中钾元素的细菌.利用梯度稀释分离法和平板划线分离法对其中的细菌进行筛选,用火焰分光光度法测定培养液和细茵细胞内的钾含量,以筛选出高效菌株.结果表明:dk8、dk7、dk14在解钾培养基上生长状况良好,以dk8分解钾长石的能力最强,可作为制作微生物肥料备选用菌.