CoA产生菌的诱变育种及发酵条件研究

研究了ＣｏＡ产生菌诱变育种及摇瓶发酵条件。以产氨短杆菌（Ｂｒｅｖｉｂａｃ－ｔｅｒｉｕｍ ａｍｍｏｎｉａｇｅｎｅｓ）ＡＳ１．８４４为出发菌株， 经单菌落分离获得了 ＢＳ１．８４４菌株，再经过紫外和 ＮＴＧ诱变，获得了对 ＴＭＴＤ具有抗性的 ＣＴ４００变异株， ＣｏＡ产量为 ５３５ ｕ／ｍＬ，比原亲株提高了 ２６９％。实验了不同的培养基组分，获得了最适培养基。采用两步补料法能显著提高 ＣｏＡ产量，比原一步补料提高 ３３％。不加热提取工艺能有效降低色素含量， ＣｏＡ得率略有增加。实验选用了 ４种阳离子型表面活性剂，以 ＣＰＣ对积累 ＣＯＡ效果最好。     

L—山梨糖发酵中的芽孢杆菌噬菌体及抗噬菌体菌株的选育

从济南制药厂L—山梨糖混合发酵液中分离得到四株芽孢杆菌噬菌体,其中一株来自寄主巨大芽孢杆菌,三株来自腊状芽孢杆菌,这些噬菌体都是有尾的,根据形态可分为二类。通过选育获得了几株抗噬菌体菌株,经摇瓶混合发酵试验,表明抗株不但具有稳定的抗性而且保持了原种的性能。     

磺胺胍抗性筛选法选育L-色氨酸高产菌株及其发酵条件的优化

以谷氨酸棒杆菌FC22(Phe-+Tyr-+5MTr)为出发菌株,经过紫外线诱变,定向选育出具有磺胺胍抗性目的突变株FC523(Phe-+Tyr-+5MTr+SGr).通过正交实验对FC523的发酵培养基进行优化,并通过单因素实验对温度、pH和转速等发酵条件进行研究.在最佳条件下,该菌株摇瓶积累L-色氨酸最高可达8.6 g/L.     

D-核糖产生菌的选育及发酵

以枯草芽孢杆菌Ｄ－２为出发菌株,经紫外诱变,得到一株莽草酸缺陷型突变株Ｄ－２０２,摇瓶发酵Ｄ－核糖产量可达到５２．６ｇ／Ｌ。该菌遗传稳定性良好。通过发酵条件的优化,最高产量可达６５ｇ／Ｌ。经２ｔ发酵罐中试,发酵单位达到５０ｇ／Ｌ。     

柠檬酸钠对L–缬氨酸发酵及代谢流量分布的影响

以黄色短杆菌XV0505为供试菌,研究柠檬酸钠对L–缬氨酸发酵的影响,同时应用MATLAB软件和代谢流量分析方法,定量研究柠檬酸钠对L–缬氨酸发酵中后期胞内代谢流量分布的影响.结果表明,添加2.0 g/L柠檬酸钠可提高L–缬氨酸产量,同时不影响菌体生长.添加柠檬酸钠后,L–缬氨酸生物合成的代谢流从41.42增长至45.87,较未添加前提高了10.74%.合成副产物L–丙氨酸和HAc的代谢流明显减少,分别降低了21.10%和32.47%.因此,添加柠檬酸钠能够扰动L–缬氨酸生物合成途径关键节点代谢流量分布,有利于减少副产物的生成,提高L–缬氨酸生物合成途径的代谢流量.     

高温α-淀粉酶产生菌株的选育

从西藏当雄温泉附近的土壤中，分离到一株能在55℃生长并分泌高温α－淀粉酶的菌株，经初步鉴定为凝结芽孢杆菌，命名为Bacillus coagulans LS-1。该菌株用紫外线和亚硝基胍诱变，在55℃摇瓶培养条件下，筛选到一个发酵液酶活达到100U／mL的突变株，较出发菌株的酶活提高了约25倍，发酵液经90℃处理60min，酶活性保持在90％以上。     

L-缬氨酸的发酵工艺条件研究

以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)CICC20887为生产菌株,采用单因素实验研究了发酵工艺条件对L-缬氨酸产量的影响.结果表明,该菌发酵生产L-缬氨酸的适宜初糖浓度、生物素添加量、VB1添加量、玉米浆添加量分别为90 g/L、80 μg/L、0.20 mg /L、30 g/L,发酵期间,24 h前pH值应控制在6.5～6.7、后48 h应控制在7.0～7.2,温度30～31℃,发酵周期应控制在66～72 h.     

L-乳酸高产菌选育及其发酵条件的优化

从自然界分离筛选到产酸菌66株,经发酵和遗传稳定性测试后,保留L-乳酸产量高的菌株LC14作为诱变出发株;然后改造MRS培养基,以乙酸钠和乙酸为碳源,对突变株定向筛选,再经发酵测试复筛,最优突变株的L-乳酸产量达57.9 g/L,为出发株的2.2倍.又根据不同温度对细胞生长代谢的差异,建立了变温发酵过程:20 h前控温...     

D-核糖高产菌株的选育

以枯草芽孢杆菌为出发菌,经紫外线诱变处理,选育出莽草酸营养缺陷型突变株Ｂｓ－０９,其发酵产物经物理和化学鉴定为Ｄ－核糖。经碳源和氮源试验发现,该菌株在葡萄糖或山梨糖为碳源,酵母粉或玉米浆为有机氮源,硫酸铵为无机氮源,碳氮比为６的发酵培养其中生长良好。     

D-核糖生产菌的原生质体诱变育种及其发酵条件的研究

以短小芽孢杆菌为出发菌株 ,经过硫酸二乙酯和原生质体紫外诱变 ,定向选育出一株稳定的核糖生产菌 TJ3,该菌株具有莽草酸营养缺陷、耐高糖、以核糖为唯一碳源不生长等遗传标记。在发酵条件试验中 ,采用均匀设计理论 ,利用微机对试验数据进行统计处理 ,确定出以葡萄糖为原料直接发酵生产核糖的优化配比。在最适培养条件下 ,摇瓶发酵平均产核糖 30 .12 mg/m L     

微生物发酵法生产L-鸟氨酸的研究

以谷氨酸棒杆菌为出发菌株 ,经硫酸二乙酯、紫外线诱变 ,定向选育出一株鸟氨酸生产菌A1 1 57,其遗传标记为 Arg- D-Argr SGr,并能耐受高浓度葡萄糖。对菌株 A1 1 57的发酵条件进行了研究 ,在最佳培养条件下 ,该菌株 L-鸟氨酸产量可达 9.85g/ L。     

L-亮氨酸产生菌的选育及其发酵条件优化

以黄色短杆菌TQ9806(Met^- Ile^L 2-TA^r α—AB^r β—HL^r SG^r Rif^r300μg／mL)为出发菌株，经硫酸二乙酯、紫外线分另4与氯化锂复合诱变，选育出一株利福平抗性为800μg／mL的L-亮氨酸产生菌TK0303，通过对其摇瓶发酵条件的研究和优化，产量由出发菌株TQ9806的22．7g／L提高至目的突变株TK0303的28．3g／L。     

肌苷高产菌TSXB29的转化育种及其发酵条件的研究

以枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＴＸ２（遗传标记Ｘａｎ~－）为供体，以枯草杆菌ＴＳＡ１９（遗传标记Ａｄｅ~－＋Ｈｉｓ~－＋８－ＡＧ~ｒ＋６－ＭＰ~ｒ＋ＳＧ~ｒ）为受体，利用转化法成功地获得肌苷产量高、遗传稳定性好的目的转化子ＴＳＸＢ２９。采用均匀设计理论，利用微机对实验数据进行统计处理，找出了该转化子的最佳摇瓶发酵条件，在该条件下，平均产苷为２７．８５ｇ／Ｌ。经连续摇瓶和斜面传代，发现该转化子是稳定的，具有一定应用价值。     

L－谷氨酰胺生产菌定向选育的初步研究

以天津短杆菌ＴＧ－８６６为出发菌株，利用亚硝基胍、硫酸二乙酯等常规诱变方法以及原生质体融合法最终筛选出一株谷氨酰胺生产菌ＧＭＮ－１８［ＭＳＯ~Ｒ＋８－ＡＧ~Ｒ＋ＳＧ~Ｒ＋（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４~Ｒ］，在适宜条件下平均积累谷氨酰胺２７．３ｇ／Ｌ。     

黄色短杆菌ATCC14067生物合成L-谷氨酰胺的条件

本文报道黄色短菌(Brevibacterium flavum)ATCC 14067生物合成L-谷氨酰胺条件的研究结果。试验表明:培养基中的氮源种类,碳、氮浓度以及pH和通气量对L-谷氨酰胺的生物合成均有较大影响;所试金属离子亦有作用。在合适的培养条件下,该菌株可在发酵液中积累L-谷氨酰胺达26.83mg/ml。     

应用原生质体融合技术选育L-异亮氨酸生产菌

以黄色短杆菌WY10和ASL495为亲本菌株，分别摸索了其原生质体形成和再生的条件，并在此基础上，进行了原生质体融合试验，考察了PEG浓度、融合时间等条件对原生质体融合的影响；最后利用所确定的条件对两亲株进行了融合，筛选出目的融合子WYA09和WYA17，带有双亲株标记Met^-和Leu^-。经产酸验证后，产酸量没有大幅提高，但副产氨基酸(主要是亮氨酸)减少，对工业生产中分离提纯工作和下一步的筛选高产菌工作都大有益处。     

分子标记在杨树遗传改良中的应用

介绍了杨树遗传改良中常用的三种分子标记;ＲＦＬＰ、ＲＡＰＤ和ＡＦＬＰ,并回顾了分子标记在杨树遗传改良中的应用;构建无性系指纹图谱,构建遗传图谱,群体遗传变异和系统进化及分类,杂种鉴定,数量性状基因定位以及分子标记辅助选择育种等。     

L-谷氨酰胺发酵与分析

用钝齿棒状杆菌(Corynebacterium crenetum)Hu7251进行了L-谷氨酰胺发酵实验,探讨了一些影响L-谷氨酰胺生成的因素,并确定了发酵液中所含的氨基酸种类。该菌株在适宜的条件下,发酵72小时,生成L-谷氨酰胺达26.47mg/ml。     

枯草芽孢杆菌D-核糖摇瓶发酵条件的研究

对枯草芽孢杆菌(Bacillus　subtilis)S21进行了摇瓶条件下的D-核糖发酵条件的研究,主要考察了添加木糖、pH、溶氧水平以及采用补糖方式对发酵的影响,确定了D-核糖发酵的最佳工艺条件D-木糖50g／L初始pH7．0,初始葡萄糖浓度为150g／L,碳酸钙20g／L,并在发酵36h后,在装液量为35mL的500mL三角瓶中添加0．75g／mL的葡萄糖溶液2mL,S21菌可积累D-核糖达51．1g／L。