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相似文献
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1.
菜心基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化   总被引:10,自引:0,他引:10  
用改良的CTAB法提取菜心基因组DNA,并利用紫外分光光度法测定其纯度和含量,用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的降解状况和纯度.结果表明:此法提取的DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点, 且适于进行RAPD分析.RAPD分析的优化反应体系为:25μL的反应液中含有0.8 U的Taq酶,0.28 μmol/L primer,30 ng的DNA,2.0 mmol/L Mg2 ,0.20 mmol/L dNTPs.PCR扩增循环为94℃、5 min;94℃、1 min; 36℃、1 min;72℃、2 min,37个循环;72℃延伸10 min.  相似文献   

2.
采用正交设计对甜菜的RAPD反应体系进行优化.应用L25(5^6)正交表,研究了Taq、Mg^2+、随机引物、dNTPs和DNA模板5种RAPD反应组分浓度变化对扩增结果的影响,并进行量化分析,试验结果表明用这种方法建立的甜菜RAPD-PCR优化反应体系为:25μL反应体系中含1×Buffer、1.0mmol/L Mg^2+、1U TaqDNA聚合酶、0.25mmol/L dNTPs、0.4μmol/L随机引物及25ng DNA模板.  相似文献   

3.
枣树基因组DNA提取方法及RAPD体系的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
以8个枣树品种的嫩叶为材料,比较了不同的DNA提取方法,结果表明:采用改良的CTAB法提取的DNA纯度和产率,虽然不比改良SDS的高,但适宜RAPD分析.在20μL反应体积中,RAPD分析的优化反应体系为:引物0.2pmol·L^-1、Mg^2+2.0mmol·L^-1、dNTP200μmol·L^-1、TaqDNA聚合酶1.2U.改良的CTAB法是枣树RAPD分析基因组提取DNA的最好方法.  相似文献   

4.
濒危植物刺桫椤RAPD反应体系的优化   总被引:3,自引:0,他引:3  
以高盐SDS法提取濒危植物刺桫椤(Alsophila spinulosa)嫩叶总DNA,进行RAPD分析,分别研究了模板DNA、引物、dNTP、Mg^2 和Taq DNA聚合酶用量以及反应体积对反应结果的影响.筛选并建立了适合于利桫椤RAPD扩增的反应体系:反应体积10μL,内含2ng/μL模板DNA,2.0mmo1/L MgCl2,0.3μmo1/L引物,300μmo1/L dNTP,0.5u Taq DNA聚合酶.  相似文献   

5.
安徽羽叶报春RAPD分析实验条件优化的研究   总被引:2,自引:1,他引:2  
采用CTAB法^[1]从珍稀濒危植物安徽羽叶报春(Primula merrilliana)的幼叶中提取DNA,进行随机扩增多态DNA(RAPD)实验,通过Mg^2 、dNTP、Taq酶、模板浓度的优化,确立了RAPD反应的最佳体系(25μ1)范围为:Mg^2 浓度为2.0—2.5mmol/L,模板浓度为每个反应50—150ng,dNTP浓度为200—250μmol/L,Taq酶为1.5—2.0U,按照优化的RAPD条件进行的重复实验,重现性良好。  相似文献   

6.
水稻基因组DNA的RAPD扩增研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
通过对水稻RAPD反应条件比较研究,建立了对除草剂敏感致死水稻RAPD的最适反应体系和反应扩增程序,即在25止反应体系中,含10mmol/LTris-HCl(pH8.0),10mmol/LKCI,8mmol/L(NH4)2804,0.05%NP-40,2.0mmol/LMgCl2,0.1mmol/L(each)dTNPs,20ng引物,20ng基因组DNA,1.5U的Taq酶。反应扩增程序为:94℃变性2min;扩增40个循环,每循环包括:94℃变性10s,40℃退火30s,72℃延伸1.5min;最终延伸5min。  相似文献   

7.
以干用辣椒幼苗为材料,研究了干用辣椒RAPD分析过程中的Taq酶、Mg^2+,dNTPs、引物、模板DNA浓度、退火温度等影响因素,建立适合干用辣椒RAPD反应的PCR体系,即25μL反应体系中含有解体Taq酶1.5U、Mg^2+2.5mmol/L,dNTPs0.6mmol/L、引物0.8μmol/L、模板DNA60ng.扩增程序为:94℃预变性4min;94℃变性1min,37℃退火1min,72%延伸1.5min,40个循环;最后72℃副延伸5min.  相似文献   

8.
采用改进的SDS方法提取黄连基因组DNA,利用正交设计研究方法建立黄连RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出黄连RAPD的最佳方案为:25μL反应体系中包括dNTPs0.12mmol.L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA 40ng,Taq酶1U,Mg2+2mmol.L-1,10×buffer缓冲液2.5μL,其余部分用无菌超纯水补平.PCR扩增循环为95℃3m in,38℃1m in,72℃2m in 1次循环;94℃1m in,38℃1m in,72℃2m in,45次循环,最后72℃延伸10m in.  相似文献   

9.
应用RAPD技术构建绞股蓝DNA指纹图谱   总被引:9,自引:0,他引:9  
以不同类型绞股蓝(Gynostemma Pentaphyllum,(Thunb)Makino)DNA为模板,进行RAPD反应条件的优化及RAPD结果分析.最终筛选的RAPD反应条件为:20μL PCR反应体系中包括了10×buffer2.0μL,Mg2 2.0 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,引物0.5 mmol/L,Taq酶1U,模板DNA 50 ng.反应程序为94℃3 min→(94℃30 s→38℃40 s→72℃1 min)45个循环→72℃10min→4℃保持,并从66条随机引物中筛选出5条带型丰富、适合于绞股蓝分析的随机引物.以这5条随机引物对不同类型绞股蓝进行RAPD扩增,识别其特征性多态位点,建立分子标记检索表.  相似文献   

10.
分析了模板DNA、引物、Taq酶、dNTP、Mg2+浓度对红砂和长叶红砂RAPD扩增的影响,筛选并建立了适合红砂和长叶红砂的RAPD扩增反应体系:反应体积25μL,内含20 ng模板DNA,0.16μmol/L引物,0.5 U Taq DNA聚合酶,2.5 mmol/L MgCl2,0.1 mmol/L dNTP,2μL10×buffer.用60个引物进行扩增,筛选出扩增效果好的18个引物,为进一步研究红砂和长叶红砂的遗传多样性奠定了基础.  相似文献   

11.
图集的统一协调,对图集质量有很大影响。本文是作者在编制北京市农业区划地图集的实践基础上,根据地图信息传输论的观点,对农业区划地图集的统一协调的内容及方法进行了探讨。试图总结编制这类图集的统一协调模式,以供读者编图时参考。  相似文献   

12.
研究了国家法的抽象正义观与民间法的情理正义观,认为西方国家法的抽象正义观与东方民间法的情理正义观存在实质的不同,原因在于思维方式、超验与经验传统、政治结构的差别。在现代法治理念下,传统民间法所代表的正义观将向混合正义观转型,西方法治所代表的国家法抽象正义观是其骨架。  相似文献   

13.
给出了一维非自治时滞系统点态退化的一个例子,拓宽了该领域的研究。  相似文献   

14.
利用对位异构体的对称性由核磁共振氢谱测定了工业十二烷基苯在硝硫混酸中的硝化选择性,发现一硝化产物中对位异构体的比例为75% ̄80%。以月桂酸和苯为原料,经氯化、酰化和还原合成了正十二烷基苯。在同样条件下研究了正十二烷基苯的硝化,由核磁共振氢谱和气相色谱分析,发现一硝化产物中对位异构体的比例仅为60%。根据空间位阻效应,对结果进行了讨论,并与甲苯,乙苯,异丙苯等短链烷基苯的硝化结果进行了比较。  相似文献   

15.
YBCO掺杂效应研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
介绍了YBCO掺杂的基础知识,总结了YBCO各个位置采用典型元素掺杂而导致的超导电性和结构的变化,阐述了掺杂对YBCO的重要影响,并简介了当前YBCO掺杂效应研究中的几个热点问题.  相似文献   

16.
由于有限群的Lagrange定理的逆不成立,因此,n较大时要确定n次交代群An的所有子群或对An阶数的每一个正因数,确定是否存在这个阶数的子群是较困难的问题.文章通过对5-循环置换各次方幂的计算及其研究,构造出了A5的5个12阶子集,并证明了每一个子集都是A5的12阶子群,最后对A5的部分阶的子群做了总结.  相似文献   

17.
18.
为了找出诱发高频机组基础不良振动的原因,从基础计算模型方面对基础激励与响应进行了分析,以两个高频机组基础为动测实例,经模态分析得出钢筋混凝土构架式基础竖向1阶振动与电机产生共振;应用功率谱法对动力机组及基础平台进行动测,得出平台异常响应频率66Hz为水泵工作频率,调整机器的工作频率可避开不良振源影响,达到明显的减振效果。由此而知,动力机器基础出现不良振动时,不可盲目改变结构的动力特性,应在机器不同工况比如:停机、起机及正常转速下,对机器及基础进行动测并对振动信号进行比较分析,以制定出行之有效的减振方法。  相似文献   

19.
基于“前沿分支”的观点研究了圈幂补图的树宽,首先确定了它的树宽下界,又给出了达到此下界的标号,从而得到了它的树宽表达式。  相似文献   

20.
报告鸡法氏囊病的流行状况,主要症状,剖检情况及诊断,提出了综合性防治措施。  相似文献   

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