浅谈基层医院三种快速淋病奈瑟菌检验技术的局限性

目的:通过将基层医院常见三种快速淋病奈瑟菌的检验方法与培养鉴定法比较,探讨各自在临床诊断中存在的局限性,帮助改进基层医院淋病检查方法.方法:收集该院2012年1月-2014年2月502例疑似淋病奈瑟菌感染的患者标本,分别做直接涂片革兰染色、快速检查“纸片法”、快速检查“发泡实验”三种检测,以培养鉴定法为对照评价各方法的临床应用价值.结果:灵敏度最高的是“发泡实验”法,为85.90％,特异度最高的是直接涂片法,为99.76％,纸片法介于两者之间.结论:三种方法单一检测结果不可靠,但可以相互配合提高检测准确性.     

抗生素抗性质粒研究进展

抗生素抗性质粒的抗性,引起病原菌的抗药性不断强化,对现代医药的发展提出了严峻的挑战.抗生素抗性质粒的研究目前主要集中在:①对抗生素抗性质粒的抗性机理有了深入的认识;②对重要致病细菌中抗性质粒的遗传背景及基因的抗性特征有了深入的研究,这些细菌主要包括假单胞属、大肠杆菌、葡萄球菌、志贺氏菌、淋病奈瑟菌等;③研究工作逐步向除了对人群产生致病的细菌以外的其它生物致病菌进行转移.由于抗性质粒的普遍存在及其在“垂直“和“水平“2个方向上都可以进行传递,人类在与细菌的较量中一直处于劣势,从而有必要借鉴污染进化生态学的原理,从协同进化和合理共存的角度,调整人类防治细菌致病的策略.     

德宏州人民医院多重耐药菌感染目标性监测和防控分析

目的:回顾分析多重耐药菌目标性监测结果及分布情况,为有效控制多重耐菌感染提供依据。方法:将2011年1月至2014年12月目标性监测MRSA、VRE、MDR-AB、MDR-PA和产ESBLs细菌情况进行分析。结果:2011年1月至2014年12月共分离出病原菌12 257株,多重耐药菌株1 656株,占病原菌总数的13.51%(1 656/12 257)。标本类型以尿液、痰液、分泌物和血液为主。多重耐药菌以产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主,分布科室以神经外科、泌尿外科检出率最高。结论:结果显示2011年1月至2014年12月产ESBLs细菌仍是主要多重耐药菌,MDR-AB感染率呈升高趋势,MRSA感染有所降低。     

平菇黄腐病病原菌分离与鉴定

本实验主要是对平菇黄腐病病原菌进行研究。从感染黄腐病的平菇幼菇子实体中分离得到2种具平板生长优势的革兰氏阴性杆状细菌(编号为G1和G2),通过对平菇子实体回接感染实验,发现细菌G1感染的平菇子实体病灶与自然感染的黄腐病状况一致,因此认为该菌就是导致平菇黄腐病的主要病原菌。经采用传统的生理生化实验与16s rDNA序列分析以及Biolog微生物自动鉴定系统分析鉴定,确定该菌为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。     

异位妊娠与生殖道沙眼衣原体感染的关系

该课题采用先进的PCR技术对研究组57例(异位妊娠)、对照Ⅰ组32例(附件切除或输卵管结扎)和对照Ⅱ组29例(正常早孕)的宫颈分泌物、输卵管组织及胚胎组织等进行沙眼衣原体检测.研究结论:异位妊娠的发生与生殖道沙眼衣原体感染有明确关系.认为沙眼衣原体感染可导致输卵管丧失正常功能,并可感染其胚胎,引起胚胎发育异常,导致异位着床.     

桑青枯病病原G12-9内切葡聚糖酶基因的克隆和分类

桑青枯病是一种土传性细菌病害,从广东省桑园发生青枯病的桑树根部分离得到1株病原菌G12-9;经鉴定确定该菌为青枯菌（Ralstonia solanacearum）,该病原菌在TZC固体培养基上呈圆形及不规则圆形,菌落中央呈现淡红色,革兰氏染色成阴性。对G12-9分离株内切葡聚糖酶基因的克隆、序列测定及聚类分析结果表明,桑青枯菌G12-9内切葡聚糖酶属于糖基水解酶家族12。青枯菌最重要的致病性分泌系统为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型分泌系统,内切葡聚糖酶属于细菌Ⅱ型分泌系统,内切葡聚糖酶对于青枯菌的定植及寄主植物的致病性有着非常重要的作用,明确该酶在糖基水解酶家族的分类地位对桑青枯病的防治具有重要意义。     

桑青枯病病原G12-9内切葡聚糖酶基因的克隆和分类

桑青枯病是一种土传性细菌病害,从广东省桑园发生青枯病的桑树根部分离得到1株病原菌G12-9;经鉴定确定该菌为青枯菌(Ralstonia solanacearum),该病原菌在TZC固体培养基上呈圆形及不规则圆形,菌落中央呈现淡红色,革兰氏染色成阴性。对G12-9分离株内切葡聚糖酶基因的克隆、序列测定及聚类分析结果表明,桑青枯菌G12-9内切葡聚糖酶属于糖基水解酶家族12。青枯菌最重要的致病性分泌系统为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型分泌系统,内切葡聚糖酶属于细菌Ⅱ型分泌系统,内切葡聚糖酶对于青枯菌的定植及寄主植物的致病性有着非常重要的作用,明确该酶在糖基水解酶家族的分类地位对桑青枯病的防治具有重要意义。
     

日本鳗鲡肝肾病原菌及其防治中药的研究

从发病日本鳗鲡（Anguilla japonica）的肝脏和肾脏分离到优势菌并命名为AJL01,经人工感染试验证实该菌为引起日本鳗鲡肝肾病的病原菌,其半数致死量为2.6×103 cfu/g;通过菌体、菌落形态特征、GYZ-15EV鉴定系统和16S rDNA同源性等综合鉴定分析,确认AJL01为迟钝爱德华氏菌（Edwar...     

基于全基因组序列的尖孢镰刀菌分泌蛋白预测及其特征分析

尖孢镰刀菌是一种以土壤习居为主要特征的植物病原菌,广泛分布于世界各地,且寄主广泛,能引起豆科、茄科、葫芦科等科100多种植物根腐、茎腐、茎基腐等病害,严重时造成植株萎蔫死亡,严重影响着植物的产量和品质.同时,目前生产上对于该菌的防治多使用甲霜灵·锰锌、多菌灵、百菌清等化学药剂,然而,防治效果不佳,急需开发针对该菌新的作用靶标的药剂.前人已经明确植物病原真菌分泌蛋白在侵染、操控植物等过程中发挥着重要功能,然而,学术界尚未见有关该菌中分泌蛋白的报道.本研究以尖孢镰刀菌菌株(Fusarium oxysporumf.sp.lycopersici 4287)的蛋白序列为基础数据,以分泌蛋白所具有的N-端含有信号肽、不含有跨膜结构域、没有GPI锚定位点、将蛋白分泌在胞外4大特征为依据,利用生物信息学在线分析程序明确该菌中含有778个分泌蛋白,并对上述蛋白开展特征分析,明确上述蛋白的氨基酸长度主要集中在101～400aa、氨基酸组成中以G,T,S,A较多,信号肽长度主要集中在16～21aa、信号肽氨基酸组成中以P,S,A,T,G较多,信号肽切割位点为T-X-T类型.为今后进一步开展尖孢镰刀菌的分泌蛋白功能解析和开发新型药剂靶标提供了重要的理论基础.     

鳗鲡肝肾病病原菌的研究

从汕头地区3个养鳗场患肝肾病鳗鲡的肝脏和肾脏分离出60个菌株,用这些菌株人工感染鳗鲡能出现相同的症状,并能从肝脏或肾脏重新分离出相同的菌株,证实为该病的病原菌.这些菌株的形状基本一致,经鉴定为野生型迟呆爱德华菌(Edwardsiella tarda.wild type).这些菌株虽然是革兰氏阴性肠杆菌,但全部菌株对多粘菌素 E 高度耐药,对青霉素 G 反而较敏感.所有菌株对目前养鳗场常用的四环类抗生素及磺胺类药物高度耐药,其耐药率均达到100%,但对大多数被测试的抗菌药物敏感.     

关于生殖器官感染造成胎膜早破早产影响的探讨

目的:探究生殖器官感染造成胎膜早破早产影响.方法:对近两年在我院分娩的胎膜早破早产(未足35周)患者50例,按宫颈分泌物培养是否有细菌生长,分为A组(有菌生长,26例)和B组(无菌生长,24例).分析生殖器官受到感染对胎膜早破和早产的破水孕周、分娩孕周、延长孕龄(d)、出生体重、新生儿窒息率、临床感染症状、胎盘病理或宫腔培养、分娩方式的影响.结果:A组胎膜早破孕周为(32.7±2.3)周,B组为(33.8±1.9)周(P=0.001),分娩孕周A组为(33.7±2.0)周,B组为(34.2±1.7)周(P=0.006),出生体重A组为(2251.9±643.0)g,B组为(2603.0±543.5)g(P=0.001):延长孕龄(d),A组与B组取中位数分别为5d和1d(P=0.000).经过积极抗感染治疗后产褥病率和新生儿感染两组无显著性差异.结论:生殖道感染患者胎膜早破发病孕周早于无生殖道感染患者,分娩孕周提前;新生儿出生体重明显低于无生殖道感染患者,生殖道感染患者延长孕龄(天数)明显长于无生殖道感染患者.     

西瓜枯萎病原菌鉴定及其生物学特性的研究

引起福州永泰西瓜枯萎病的病原菌经分离培养、形态学和致病性测定 ,鉴定为尖孢镰刀菌西瓜专化型F usarium oxysp orum f. sp.N iveum。该病原菌在培养温度 2 5± 1℃ ,p H 6 - 7条件下生长最好 ;接种于瓜类幼苗上 ,可强侵染西瓜 ,中度侵染甜瓜 ,弱侵染黄瓜。     

葡萄炭疽病病原菌分离鉴定及其效用杀菌剂筛选

为明确引起葡萄炭疽病的病原种类和分类地位,以及不同杀菌剂对该病原菌的室内防治效果,采用形态学观察和核糖体DNA内转录间隔区(r DNA-ITS)序列扩增等方法对疑似菌株进行了分离鉴定,并采用菌丝生长速率法测定了6种杀菌剂对该病原菌的室内抑制作用.结果表明,导致葡萄炭疽病的病原菌为半知菌亚门腔孢纲胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides).所选6种杀菌剂对该病原菌菌丝生长的抑制效果差异极显著(P0.01),其中:肟菌·戊唑醇对病原菌的抑制效果最好,苯醚甲环唑次之,其有效抑制中浓度(EC_(50))分别为3.54和6.64μg·m L~(-1);嘧菌酯的抑制效果最差,EC50为2 383.81μg·m L~(-1).肟菌·戊唑醇和苯醚甲环唑可进一步用于葡萄炭疽病田间病害的防治研究.     

落叶松根朽病生理学特性及其拮抗菌的测定

对落叶松根朽病病根进行分离培养.结果表明:引起根朽病的病原菌为奥氏蜜环菌Armillaria ostoyae,其菌索为最佳分离源,组织分离和子实体分离不易成功;病原菌在综合马铃薯汁培养基上生长良好,3 d后长出白色后变黑褐色菌落,5～6 d后长出菌索.病原菌的3个菌株生长的最适合温度为25℃;最适pH为6.0～6.4;最佳碳源为葡萄糖、麦芽糖;最佳氮源为尿素和酵母粉,在KNO3和(NH4)2HPO4等无机氮源上生长不良.室内药剂敏感性测定结果表明:使用5.00 mg/mL硫酸铜、1.25 mg/mL70%代森锰锌、1.25 mg/mL5%百菌清可以有效防治根朽病.室内病原菌与拮抗真菌的对峙结果表明,所用的厚环乳牛肝菌Suillus grevillei等6种菌根菌和2种工程菌对病原菌A5.92都有抑制作用.其中厚环乳牛肝菌Suillus grevillei、赭丝膜菌Cortinarius russus、红蜡蘑Laccarialaccata抑制作用最强,不仅产生最明显的抑菌环,抑制病原菌的生长,同时覆盖病原菌并在其上生长,可用于根朽病的生物防治.     

牙鲆"体表出血病"病原的研究

对患"体表出血病"的牙鲆(Paralichthys olivaceus)肝、肾、肠等组织进行病原菌分离、培养纯化、人工感染、菌种生理生化试验和药敏试验等研究,得知引起该病的病原有3种菌.根据形态及生理生化特征,确定这3种菌为溶藻弧菌(Vibrio alginolaticus)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和类产碱假单胞菌(Pseudomas pseudoalcaligenes).     

支原体检测及药敏分析在临床中的应用价值

目的通过对支原体的检测及药敏情况来分析患者耐药程度,指导临床合理用药.方法用支原体(Uu/Mh)分离培养药敏试剂盒对不同患者进行药物敏感性试验,并对其结果进行统计分析.结果 250例患者的泌尿生殖道分泌物中分离支原体感染92例,标本阳性率为36.8%,其中解脲支原体(Uu)75例,阳性率为81.5%;人型支原体(Mh)3例,阳性率为3.2%;混合感染(Uu+Mh)14例,阳性率为15.3%;药敏结果显示:支原体对12种抗生素中交沙霉素、多西环素、美满霉素和四环素的平均敏感率较高,分别为(93.02±7.15)%、(90.19±10.83)%、(86.03±14.30)%、(82.76±17.89)%,而对环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星和司巴沙星的敏感性较低;耐药性最强的抗生素是环丙沙星和左氧氟沙星.结论交沙霉素、多西环素、美满霉素和四环素可作为泌尿生殖道支原体感染的临床经验性选用的抗菌药物;支原体的培养及药敏试验可以掌握支原体的流行状况及耐药程度,为临床合理用药提供参考.     

加州鲈诺卡菌病病原的分离与鉴定

 加州鲈是我国南方的重要经济鱼类养殖品种,但近年病害问题十分突出。诺卡菌已成为危害加州鲈健康养殖的重要病原,目前对该病原菌的分离鉴定及种属类型的研究尚未见报道。国内首次从患病加州鲈体内分离得到诺卡菌,并最终确定了其病原种类是鰤鱼诺卡菌Nocardia seriolea。从患病加州鲈内分离到菌株NH090627,镜检发现该菌为革兰氏阳性的分支状杆菌。生理生化鉴定结果表明分离菌株与诺卡菌属Nocardia细菌的基本特征相符。回归感染试验证实菌株NH090627即为引起此次加州鲈结节病的病原菌。对该菌株的16S rDNA进行了扩增和序列分析发现,该菌株与诺卡菌属细菌的亲缘关系较近,且与鰤鱼诺氏菌N. seriolea JCM 3360的16S rDNA 序列同源性最高,达到99.9%。综合上述试验结果,我们将加州鲈结节病的病原菌鉴定为鰤鱼诺卡菌。为了指导该病的防控,还对该病原菌做了一系列药敏试验,结果显示,该菌株对氯霉素、链霉素、卡那霉素、四环素等抗生素敏感,但对磺胺类和氨苄青霉素有耐药性。     

克拉霉素与阿奇霉素、多西环素治疗生殖道衣原体感染的疗效比较

目的:探讨分析比较克拉霉素、阿奇霉素、多西环素治疗生殖道沙眼衣原体感染的临床疗效、病原体清除情况及其安全性.方法:选择本院皮肤科门诊的150例生殖道沙眼衣原体感染患者,随机分为A、B、C三组,每组各50例,A组口服克拉霉素,B组口服阿奇霉素,C组口服多西环素,连续治疗2周为一个疗程.疗程结束后两周进行疗效评价,记录临床症状、体征及不良反应,并做尿道(宫颈)分泌物沙眼衣原体检测.结果:疗程结束两周后,克拉霉素组疗效总有效率为93.3%,明显高于阿奇霉素组的77.3%和多西环素组的71.1%,差异均有统计学意义(P0.05);阿奇霉素组的有效率虽略高于多西环素组,但无统计学差异.对病原体的清除率分别为93.3%、77.3%、71.1%,统计学分析与上述临床疗效的有效率结果一致.三组不良反应的发生率均较低,且不良反应均较轻微.结论:克拉霉素具有临床疗效好、病原体清除率高、不良反应少等特点,是临床治疗生殖道沙眼衣原体感染的较好药物之一.     

鸡源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

为明确引起宁都黄鸡沙门菌病的菌株的血清型和耐药情况,经疑似沙门菌病死亡鸡中分离细菌、PCR法鉴定细菌种属和血清型,纸片法分析其药物敏感性.结果 分离到4株沙门菌,均为鼠伤寒沙门菌.4株细菌同时敏感的药物有头孢噻肟、氟哌酸、多粘菌素B,4株细菌同时耐受的药物有阿莫西林、四环素、强力霉素.结果 提示,近期预防和治疗35日龄内发病宁都黄鸡沙门菌病的优选药物是头孢噻肟、氟哌酸和多粘菌素B等.     

续断菊白粉病的病原菌鉴定

采用形态学鉴定、致病性鉴定和分子系统学鉴定方法对中国商丘地区首次检出的续断菊白粉菌的系统进化关系进行了研究.结果表明,该病原菌分生孢子梗直立,圆柱形,简单无分枝,大小为108～220μm×10～12μm,包含1个足细胞,2～3个短细胞;分生孢子串生,圆柱形,无明显纤维体,大小为29～42μm×19～24μm;附着胞呈乳头形;病原菌接种叶片病症与自然状态一致,形成薄而边缘不明显的白色斑片;对其核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列进行PCR扩增、测序获得595bp序列(GenBank登录号:JQ010848),经MEGA 3.1软件分析,其与来自二孢白粉菌(Golovinomyces cichoracearum)的AY739111,HM449077,AB453762,AB077673序列聚为1枝,而与来自同属另3个种的ITS序列亲缘关系较远.研究表明,商丘地区的续断菊白粉菌为二孢白粉菌(G.cichora-cearum).