电渗透用于强化海藻糖载入红细胞的实验研究

海藻糖是一种有效的冻干保护剂,实验采用电渗透的方法强化海藻糖载入红细胞,在不同电压、脉宽、频率和细胞外海藻糖浓度的条件下对红细胞进行电渗透.实验结果表明,当电压300 V、脉宽1 ms、频率4 次/min、细胞外海藻糖浓度800 mmol/L时,细胞内海藻糖浓度达到(63.68±2.14)mmol/L.电渗透后红细胞形态正常,细胞膜的渗透脆性略有降低,电渗透致溶血率为17%,ATP酶活性与新鲜红细胞无显著差异.     

甘油保护剂对冷冻干燥保存红细胞作用的实验研究

应用甘油作红细胞冷冻干燥保存的保护剂,研究甘油对红细胞的保护机制.红细胞用不同质量分数(0,20%,40%)的甘油前处理后,冻干保存前后分别检查红细胞的相关指标.结果显示,40%甘油前处理的红细胞冻干保存效果最佳,红细胞回收率和血红蛋白回收率分别达到55.3%和63.4%;红细胞渗透脆性和超氧化物歧化酶(SOD)活力与冻干保存前无明显差别.该研究为使用甘油作红细胞冻干保存的保护剂提供了实验基础.     

糖的浓度和种类对人血小板冷冻干燥保存的影响

以海藻糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、葡萄糖作为冻干血小板的保护剂,研究糖的浓度和种类对血小板冻干保存的影响.结果表明,冻干血小板的保存效果随海藻糖浓度的增加而提高,当海藻糖质量分数增加到20%时,非活化血小板的恢复率达到85.7%;对于质量分数均为20%不同种类的糖保护剂,非活化血小板的恢复率都达到70%以上,海藻糖略优于其他几种糖,但它们之间没有显著性差异.     

红细胞低温保存中海藻糖的加载方法

在红细胞低温保存中,海藻糖被认为是能够替代甘油的生物相容性保护剂,而海藻糖难以进入红细胞内提供保护.归纳了使海藻糖加载至红细胞内的各种方法,包括孵育法、渗透休克法、脂质体法等,详细介绍了每种方法的原理、载入效果及优缺点.最后得出温和且不生成膜孔的加载方案具有一定的优越性,也可以尝试多种方法联用以提高加载效率和保护效果,...     

红细胞保存期对冻干前海藻糖负载量的影响研究

探讨冻干前红细胞保存期对海藻糖负载量的影响,确定红细胞负载海藻糖的最佳条件。在37℃条件下,4℃保存0、24、48和72 h的红细胞在海藻糖浓度800 mmol/L的负载缓冲液中孵育7 h后,检测胞内海藻糖浓度和胞外外游离血红蛋白浓度。经相同条件孵育后,4组红细胞对海藻糖的摄取量基本相同,分别为(49.747±2.253)、(50.316±0.612)、(49.768±2.179)和(49.013±1.991)mmol/L,各组之间无统计学差异。4℃保存24、48和72 h的红细胞相对于新鲜红细胞,3组负载红细胞胞外游离血红蛋白明显增加,分别高达(8.473±2.138)g/L(P0.05)、(12.697±1.787)g/L(P0.01)和(14.036±2.796)g/L(P0.01)。说明冻干前红细胞4℃保存期不会影响海藻糖负载量,红细胞负载海藻糖的主要影响因素仍为负载温度、负载时间和负载缓冲液中海藻糖浓度,若固定孵育条件,红细胞对海藻糖的胞内负载量基本保持不变。但随保存期的延长,红细胞在高渗环境中孵育更易损伤,溶血率明显增加。所以,为达到更好的海藻糖负载效果,应尽量采用新鲜红细胞进行处理。     

天然保存剂——海藻糖

海藻糖是由两个葡萄糖分子结合而成的非还原性双糖,它广泛存在于动植物及微生物中,在酵母、霉菌等中有时含量高达15％以上。1832年,Wiggers从黑麦中首次分离得到海藻糖。起初,人们认为海藻糖只是动植物体内的一种能量贮存形式,并未深入研究开发。最近一段时期,海藻糖在冻结、干燥、高渗透压等严酷环境下保护生物膜、蛋白质、核酸等结构和功能的特殊功效,引起了人们极大的关注。海藻糖的应用及生产方法立即成为国际上的研究焦点。1 海藻糖的应用1.1 在食品工业的应用 海藻糖水溶液性质稳定,无色无味,入口清凉,甜味极弱,所以用在食品中不会改变食品原有风味。由于海藻糖不会焦化,在人体内可被酶分解为葡萄糖,且具     

联合海藻糖和二甲基亚砜进行冻干前负载的人红细胞冻干效果研究

探讨人红细胞在冻干前经添加低浓度二甲基亚砜(DMSO)海藻糖负载缓冲液负载后,是否会提高红细胞的冻干效果. 实验组:为6%DMSO 800 mmol/L海藻糖.对照组:冻干前负载缓冲液为等渗PBS.取等量压积红细胞(6份)分别重悬于两组负载缓冲液,37℃孵育8 h后离心去除上清,加入冻干保护剂混匀后程序冻干,15%PVP溶液37℃三步复水.分别检测并比较两组冻干红细胞复水后血红蛋白回收率、复水红细胞变形性、再水化后4℃放置时间对冻干红细胞再水化稳定性的影响及冻干红细胞长期保存的稳定性.结果表明:冻干红细胞再水化后,实验组红细胞血红蛋白回收率为(63.019±4.901)%,对照组为(28.787±7.514)%,两组之间存在显著差异(P＜0.01);冻干红细胞再水化后,两组冻干红细胞的综合变形指数均有明显下降,实验组红细胞综合变形指数为(18.133±2.392)%,对照组为(8.017±1.934)%,两组之间存在显著差异(P＜0.01);两组冻干红细胞复水后4℃保存4 h、6 h、8h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示有显著统计学差异(P＜0.05).复水后4℃保存12 h、24 h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示无统计学差异;两组冻干红细胞4℃保存6个月前后复水后血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示两者之间存在显著差异(P＜0.05). 结论:红细胞冻干前经添加6% DMSO的海藻糖负载缓冲液处理后,可提高冻干后红细胞血红蛋白回收率、改善复水红细胞变形性,提高复水后4℃保存的稳定性和冻干红细胞长期保存的稳定性.     

马蹄真空冷冻干燥实验的研究

利用真空冷冻干燥技术对马蹄进行保鲜加工研究.利用电阻法测量了马蹄的共晶点和共熔点,采用L12(35)正交试验方法,研究了影响冻干产品质量和设备生产能力的主要参数,评定了冻干产品的含水量、外观、复水性等特性.实验结果表明,马蹄冻干的最佳工艺为:速冻温度-36℃,速冻时间20h,干燥升华时仓压(120±10)Pa;干燥解析时仓压(40±10)Pa,解析时的搁板温度50℃,干燥时间14h.     

冷冻干燥人红细胞复水时膜相变与复水损伤机理探讨

制备人的红细胞血影并冷冻干燥，利用差式扫描量热仪（differential scanning calorimeter, DSC）测量其相变温度区间为10℃附近和32—35℃. 冻干红细胞在复水前后可能经历膜相变. 若复水温度不当，在相变过程中会因胞内物质的泄露而造成细胞损伤. 为避免在复水时膜相变引起损伤，复水温度应在35℃以上. 实验中冻干保存人的红细胞，在不同温度下复水，发现37℃复水效果较好，与相变损伤理论分析吻合. 该研究探讨了冻干人红细胞在复水时除渗透性损伤外因膜相变引起的损伤机理，对其他生物材料的冻干保存也具有参考意义.     

蜂王浆微波冷冻干燥特性的实验研究

对蜂王浆进行了微波冷冻干燥的实验研究,获得蜂王浆冻干过程中温度的变化规律和相应的干燥特性曲线;研究了样品厚度、电场强度和真空度对干燥过程的影响．实验结果表明,微波冷冻干燥具有干燥时间短,干燥质量高的优点,可在干燥行业中推广使用．     

Preparation of 3-D porous fibroin scaffolds by freeze drying with treatment of methanol solutions

In this study, silk scaffolds with appropriate porous structures were prepared by adjusting solution concentrations and providing treatment with methanol solutions in the way of freeze drying. The effects of the preparation conditions on the microstructures and properties of the scaffolds were discussed. Fibroin solutions with different concentrations of 4, 6, 8, 10 wt% were used respectively to prepare the scaffolds. The effects of the addition of 20 vol% methanol before or after freeze drying to the 4 wt% fibroin solution were investigated. As demonstrated by Scanning Electron Microscope (SEM), the fib-roin scaffolds prepared without methanol had porous microstructures composed of thin sheets, and the sizes of the pores decreased with the increase of the fibroin solution concentrations, while the scaffolds prepared in the presence of methanol showed porous microstructures formed by fine-particle aggregates. The porosities and mechanical properties of the prepared fibroin scaffolds under different conditions were tested. The crystalline structures and conformations of the fibroin scaffolds were detected by Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR) and X-ray diffraction (XRD).     

具有脉冲的离散的红血球补充模型解的振动性

考虑具有脉冲的离散的红血球补充模型Δx(n)=∑mi=1ri(n)[-μx(n-li) peqx(n-li)]n≥0n≠nkx(nk 1)-x(nk)=bkx(nk)k=1,2,3,…给出了方程每一个解的振动与存在非振动解的充分条件.     

QS412透性化细胞产海藻糖特性研究

透性化细胞中在麦芽寡糖基海藻糖合成酶和麦芽寡糖基海藻糖水解酶作用下由淀粉生产海藻糖,其使用可省略酶的纯化和胞内酶的固定化。本文研究了金属离子对透性化细胞产海藻糖活性的影响,观察到Mg²⁺对其活性有提高作用,Zn²⁺、Mn²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Hg²⁺5种2价离子对其活性有明显抑制作用。其中,Hg²⁺的抑制作用最为明显,而Mn²⁺的作用未见报道。Zn²⁺在40mmol/L浓度以上能完全抑制体系中MTHase的活性,并且这种抑制作用可以通过添加EDTA消除,这就提供了制备MTHase底物及在两种酶存在下单独测定MTSase活性的可能。本征动力学和宏观动力学分析表明透性化细胞合成海藻糖的过程中外扩散影响可忽略,内扩散影响显著。通过对该过程作用特性的研究,为透性化细胞的研究和使用打下进一步的基础。     

一种有效的图像处理方法对贮存红细胞闪烁复杂性的评估

体外红细胞老化研究具有极高的临床价值.临床应用上的不足,是由于缺少从微观帧上获取大量闪烁数据的有效方法.研究了一种新的图像处理方法,从不同的微观帧上提取红细胞灰度强度变化情况,使得细胞分裂能够在一张图像上显示.尺度不变特征转换被用来移除摄动的细胞.通过多尺度样本熵对来自25个年轻成年人(每人200个细胞)的红细胞膜闪烁的复杂性进行分析,同时,也测量三磷酸腺苷浓度.结果显示,提出的图像处理方法可靠且能够有效提取红细胞闪烁强度,红细胞老化过程能够通过膜闪烁的复杂性分析检测到,该过程比三磷酸腺苷测量要敏感得多.     

冷冻干燥制备TiO2超细粉体研究

采用冷冻干燥法制取ＴｉＯ２超细粉,测试了粉体粒度及晶化处理后的晶粒度,研究了冷冻速度（冷媒种类）对粉体粒度的影响,并用该法制备出纳米材料。     

Inhibition of free radical induced oxidative hemolysis of red blood cells by green tea polyphenols

The in vitro oxidative hemolysis of human red blood cells (RBC) was used as a model to study the free radical induced damage of biological membranes and the inhibitory effect of natural antioxidants. The hemolysis was induced by a water-soluble free radical initiator 2,2′-azo(2- asmidinopropane)dihydrochloride (AAPH) and inhibited by the principal polyphenolic components extracted from green tea leaves, i.e. (-)-epicatechin (EC), (-)-epigallocatechin (EGC), (-)-epicat- echin gallate (ECG), (-)-epigallocatechin gallate (EGCG) and gallic acid (GA). Addition of AAPH at 37°C caused fast hemolysis after a short period of inhibition period, while addition of the green tea polyphenols efficiently suppressed the hemolysis in the activity sequence of EGCG＞EGC＞ECG≈EC＞GA, demonstrating that these green tea polyphenols are effective antioxidants which could protect biological membranes from free radical induced oxidative damage.     

Rudimentary study on humanization of porcine red blood cells:Enzymatic removal of galactose-α1,3-galactose antigen from porcine red blood cell

The serological and biochemical characterization of porcine red blood cells (pRBCs) are similar to human red blood cells,Porcine erythrocytes are considered as an alternative source for human blood transfusion.But there exist galactose-α1,3-galactose antigens (Galα1,3Galβ1,4galNAc-R,abbreviated αGal antigen ) on pRBCs,which can induce anti-αGai antibodies in human serum ,The αGal epitopes are the major antigen responsible for hyperacute rejection in exnotransfusion .In this study ,recombined soybean α-galactosidase (rSα-GalE) was used to remove the αGal antigens from pPRCs for humanization .The results showed that αGal antigen was eleared by rSα-GalE and the structure and function of rSα-GalE treated pRBC were normal.     

环境温度对人红细胞膜形态和表面电荷的即时影响

利用显微图像分析技术和相分析电泳光散射技术,在无损、在位、实时的情况下,观察和测量了不同环境温度下活态人红细胞的形态、大小和表面电荷密度、Zeta电位的即时变化情况．结果发现随着环境温度的升高,人红细胞的大小逐渐减小,细胞形状指数增大,红细胞从双凹圆盘形向棘形转变,同时红细胞的表面电荷密度和Zeta电位的负值逐渐增大．表明人红细胞膜的形态结构、组成等与环境渝摩密切相关．