成纤维细胞和ES细胞在小鼠和兔去核卵母细胞内发育

以昆明白小鼠成纤维细胞和胚胎干（ES）细胞作为供核细胞,以昆明白小鼠和日本大耳白兔的MⅡ期去核卵母细胞作为受体,采用核移植方法,构楚了克隆胚胎．在同种克隆中,以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率明显低于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（24．4％相对于56．9％,P〈0．05）,1．8％的ES细胞克隆胚胎发育到囊胚阶段,而成纤维细胞克隆胚胎没能发育到囊胚阶段;在异种克隆中,以ES细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（89．6％）和囊胚发育率（18．8％）明显高于以成纤维细胞为供核细胞的克隆胚胎卵裂率（54．2％）和囊胚发育率（4．2％）．     

瘦素对小鼠体外胚胎发育率及胚胎移植后着床率的影响

观察瘦素对体外受精后胚胎发育和胚胎移植后着床率的影响。采用小鼠卵母细胞体外受精后胚胎培养及胚胎移植的方法研究仅受精时添加的瘦素对受精后体外胚胎发育的影响及胚胎移植后着床率的影响。结果表明：1）仅受精时添加不同浓度的瘦素对受精卵发育至四细胞胚、桑椹胚及囊胚的比率均无显著影响（P〉0.05）。2）添加的瘦素剂量为10ng/mL及50ng/mL时胚胎着床率较高,当添加的瘦素剂量为100ng/mL-500ng/mL胚胎着床率未提高,两组差别有统计学意义（P〈0.05）。一定水平的瘦素可以显著提高小鼠的体外胚胎移植后的着床率,高水平瘦素反而对着床不利。受精后至着床前各期胚胎的发育率与受精当时瘦素浓度无关。     

Lats基因敲除小鼠胚胎玻璃化冷冻的研究

用冷冻麦管、细胞冷冻管分别采用一步法和二步法对Lats基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻 ,胚胎解冻后 ,囊胚发育率分别为 90 %、90 1%、89 2 %和 91 4 % ;移植后着床率分别为 :5 0 0 %、4 7 1%、4 3 4 %和 4 6 5 % ,差异不显著 ;并且与对照组相比差异也不显著。因此 ,玻璃化冷冻可以作为Lats鼠保种方法之一     

胚胎单个定位及三维共培养微流控装置的构建

胚胎体外发育是临床人工辅助生殖技术中的关键环节,对着床后胚胎发育状况有重要作用。该研究利用细胞三维培养技术和微流控芯片技术构建了一种新型的小鼠胚胎体外共培养装置,用于实现自动化的小鼠胚胎定位与共培养操作,并对胚胎在体内的发育环境进行模拟。利用该微流控装置成功进行了小鼠胚胎的单个定位、三维细胞共培养以及发育追踪观察,并对装置中胚胎发育状况做出评价。统计结果表明:共培养芯片中小鼠胚胎发育囊胚率(87.3%±3.1%)显著高于对照组的囊胚率(76.8%±2.7%,P0.01);并且共培养芯片中小鼠囊胚的平均细胞总数(102±4)也显著高于对照组中的平均细胞总数(68±3,P0.01)。因此该胚胎共培养微流控芯片有助于在体外实现自动化的胚胎定位和培养过程,并且对小鼠胚胎发育具有更好的促进作用。     

昆明鼠胚胎干细胞的分离培养与鉴定

目的：从昆明系小鼠的早期胚胎分离和培养胚胎干细胞(ES细胞)．方法：收集小鼠3．5d胚龄的囊胚，将其培养在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上，5—6d后取隆起生长的内细胞团块分离后再培养，观察集落的生长情况并通过碱性磷酸酶染色、原位杂交、细胞核型分析等对细胞集落进行鉴定．结果：KS细胞集落性生长，符合小鼠胚胎干细胞的一系列特性．结论：昆明系小鼠囊胚在胚胎成纤维细胞饲养层上可以发育成ES细胞，并能进行传代培养．     

小鼠早期胚胎不同移植方法的建立

目的建立小鼠胚胎移植技术,探索小鼠胚胎输卵管伞部移植、输卵管剪口移植和子宫移植技术要点,为进一步将该项技术应用到生物净化等领域提供参考数据。方法对4周龄C57BL/6雌性小鼠采用腹腔注射7.5 IUPMSG(孕马血清促性腺激素),48 h后腹腔注射7.5 IU HCG(人绒毛膜促性腺激素)进行超数排卵处理,并与C57BL/6雄鼠合笼,分别在见栓0.5 d、1.5 d和3.5 d取出相应胚胎,对所得胚胎进行筛选,将质量较好的胚胎选出,并将相应胚胎阶段(单细胞、2细胞、囊胚)移入同期发情并经KM结扎雄鼠交配刺激后见栓的KM假孕小鼠输卵管或子宫内,待妊娠生产后得到移植小鼠。结果对88只4周龄雌性C57BL/6小鼠进行超数排卵处理,见栓62只,共取得单细胞胚胎510枚、2细胞期胚胎400枚、囊胚35枚,采用输卵管伞部移植、输卵管剪口和子宫移植,共移植假孕母鼠43只,妊娠生产39只,产仔361只。结论输卵管伞部移植与输卵管剪口移植比较无显著差异,输卵管伞部移植对动物伤害较小,但对术者要求较高;输卵管剪口移植操作较快捷,但对动物损伤较大;子宫移植的妊娠效果最好,处于这一阶段的胚胎极易着床。     

围着床期小鼠胚胎表达肿瘤易感基因101(TSG101)

揭示肿瘤易感基因101(TSG101)在围着床期胚胎中的时空表达型。方法:收集囊胚、培养获得着床前、着床后以及长开的小鼠胚胎。利用全胚原位杂交以及全胚免疫染色方法检测围着床期小鼠胚胎中TSG101的时空表达型。结果:TSG101表达于围着床期胚胎的內细胞块和滋养层细胞中,其中内细胞块细胞中的表达更强。结论:围着床期胚胎表达TSG101,暗示TSG101在胚胎着床过程中发挥作用。     

子宫内膜胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机的研究

目的研究利用扫描电镜观察到的子宫内膜成熟胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机。方法对本科完成自然排卵冻融胚胎移植123个周期进行回顾性分析,按判断冻融胚胎的移植时机方法不同分为A组（利用扫描电镜观察到的成熟胞饮突判断）、B组（利用血LH峰来判断）。结果两组临床妊娠率分别为34.37%和17.58%,胚胎着床率分别为16.7%和8.6%。结论利用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机可提高临床妊娠率及胚胎着床率。     

子宫内膜胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机的研究

目的研究利用扫描电镜观察到的子宫内膜成熟胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机。方法对本科完成自然排卵冻融胚胎移植123个周期进行回顾性分析,按判断冻融胚胎的移植时机方法不同分为A组(利用扫描电镜观察到的成熟胞饮突判断)、B组(利用血LH峰来判断)。结果两组临床妊娠率分别为34.37%和17.58%,胚胎着床率分别为16.7%和8.6%。结论利用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机可提高临床妊娠率及胚胎着床率。     

人输卵管上皮细胞共培养系统对小鼠胚胎体外发育的影响

常规体外培养的胚胎桑椹胚以上发育率低,胚胎质量不高及移植环境不适合可能是导致IVF-ET成功率低下的原因。目前,国外一些实验室尝试将多种哺乳动物乃至人的胚胎与输卵管组织或上皮细胞进行共培养,发现有促进胚胎体外发育及提高妊娠率的作用,本课题组将人输卵管上皮细胞与小鼠胚胎共培养,观察其对胚胎体外发育及胚胎质量的影响。结果显示：共培养的胚胎24h后大部分发育到4细胞期以上,发育快的已达桑椹胚。培养48h后共培养的胚胎大部分发育成桑椹胚,有些已开始形成囊胚腔。到72h,正常发育的共培养胚胎形成囊胚和孵出囊胚。3个观察…     

Effects of different nuclear recipients on developmental potential of mouse somatic nuclear transfer embryos

Somatic cell nuclear transfer has been succeeded in procedures of nuclear transfer. One is single nucleartransfer, the other is serial nuclear transfer. Viable animals have been cloned in different species using both me-thods[1—6]. Different nuclear recipients and donors wereused in serial nuclear transfer, namely, transferring thenuclear of reconstructed embryo into enucleated MⅡoocytes[7], transferring the nuclear of reconstructed em-bryos at one cell stage into enucleated zygote[4] and t…     

水葫芦象甲成虫取食量研究

本文研究了从国外引进的水葫芦天敌昆虫水葫芦象甲 N eochetina bruchi和 N .eichhorniae的取食习性。研究结果表明两种水葫芦象甲的雌虫取食量均显著大于雄虫 ,雌虫取食量为 2 0 6 .5 - 2 0 9.2 mm2 / d,雄虫为 4 8.5 - 71.0 mm2 / d,但两种雌虫之间和两种雄虫之间的取食量无差异。N.bruchi的雌虫喜欢取食叶片的叶面和叶背 ,日取食量分别为 83.5和 71.7mm2 ,两者之间差异不显著 ;雄虫则在叶背取食较多。 N.eichhorniae雌虫在叶背取食多于叶面和叶柄 ,分别为 10 2 .8、4 3.2和 6 3.2 mm2 / d;雄虫在叶背和叶柄的取食量大于叶面。上述结果为利用这两种象甲控制水葫芦提供重要参考     

支链氨基酸增强小鼠的游泳能力对其血氨和5-羟色胺变化的研究

目的探讨支链氨基酸（Branched-chain amino acids,BCAAs）对训练小鼠抗疲劳运动能力的影响。方法50只小鼠随机分为实验组（B1、B2、B3、B4）和对照组（C）。实验组分别灌胃补充BCAAs0.45、1.25、3.75和10g/kg.d,对照组灌胃生理盐水。各组小鼠5周递增负荷游泳训练后进行力竭游泳并取材。观察BCAAs对小鼠脑组织5-羟色胺（5-HT）、血氨（PA）和力竭游泳时间的影响。结果实验组小鼠血氨含量升高,脑组织匀浆中5-HT含量下降,但力竭运动游泳时间均显著延长。结果血氨浓度随剂量的增加而增大,C与B1组相比血氨水平无显著性差异,但明显低于B2、B3、B4组（P〈0.01）;C组小鼠5-羟色胺浓度显著高于实验组（P〈0.01）,实验组间随着补充剂量的增大5-羟色胺浓度减小;实验组小鼠力竭游泳能力明显强于对照组（P〈0.01）。实验组间,B2、B3组小鼠力竭时间明显长于B1组（分别为P〈0.05,P〈0.01）,B4组力竭时间与B1、B2、B3组相比则下降。结论BCAAs能够对抗运动性疲劳的发生发展,增强运动能力,但具有量效关系。     

饥饿对斜带石斑鱼卵黄囊期仔鱼摄食、存活及生长的影响

 在培育水温(25±0.5 ）℃、盐度31～32 条件下,斜带石斑鱼仔鱼孵化后第3天开口并进入摄食期,孵化后5.5 d,不能建立外源性营养的仔鱼分别进入不可逆点（PNR期）,几乎与此同时,卵黄囊和油球耗尽,仔鱼混合营养期为2~3 d,从初次摄食到进入PNR期的时间为2.5 d;仔鱼在不同饥饿阶段初次摄食发生率的变化式型是：开始较低,此后逐步上升,高峰期出现在卵黄囊接近耗尽时,此后迅速下降,记录到的最高初次摄食发生率为76.7%;饥饿仔鱼的死亡高峰出现在孵化后4~6 d,至第8天,饥饿仔鱼全部死亡;卵黄囊期仔鱼的生长可以分为3个期相：初孵时的快速生长期,卵黄囊消失前后的慢速生长期,以及在不能建立外源性摄食后的负生长期。     

银翘解毒颗粒对鸭的长期毒性实验研究

观察银翘解毒颗粒对鸭的长期毒性,为临床安全用药提供依据。将常规饲喂至4周龄的鸭只随机分为4个组,3个剂量组分别按40 g/kg,20 g/kg,10 g/kg连续灌胃给予银翘解毒颗粒2 W,对照组给予同体积生理盐水。停药后继续观察2W,测试受试鸭只体征、体重、血液常规、肝肾功能及病理组织学变化。试验期间各组动物体征、体重、血液常规、肝肾功能均未出现组间差异;病理切片观察发现,高剂量组的切片有轻微的损伤,其中心脏的损伤较为明显,而且病变是一种可逆性的变化。银翘解毒颗粒在临床推荐剂量下有一定的安全性。     

饥饿对锯缘青蟹（Scylls serrata）幼体存活与发育的影响

刚孵化的锯缘青蟹第一期蚤状幼体,经不同时间饥饿后再予投饵,结果表明,饥饿可显著降低幼体的存活率和延长其发育期,饥饿时间（t)和发育期长（D）呈线性关系9D＝4．81＋1．81t,r＝0．96,P＜0．01）,对于青蟹蚤,幼体,起始饥饿时间超过4d,再予投饵,幼体均不能恢复到正常发育和蜕皮,即其“不可恢复点（point of no-return,PNR）”约为4d,若幼体孵化后马上投喂,但在投喂后不同时间间间使幼体饥饿,50％青蟹蚤;幼体达到“营养贮存饱和点PRS50（Point-of-reserve satura-tion）”的投喂时间为2．3d,约为正常发育期长4．5d的一半,对已通过PRS点的幼体,饥饿一般不影响其蜕皮和发育,甚至还有一定促进作用。     

两个封闭群昆明小鼠行为学差异和试验方法信度分析

摘要: 目的 探讨两个封闭群昆明小鼠的行为学差异并评估行为学试验方法检测昆明小鼠行为的可信度。方法 应用小鼠行为学试验检测两个不同封闭群昆明小鼠的行为差异并做试验方法的复测信度检验。两个封闭群昆明 小鼠各取 20 只雄性小鼠分别记为 A 组、B 组,两组小鼠经过适应性饲养 3 d 后进行首次试验,记录体质量( 之后每 天记录体质量并绘制体质量增长趋势图) ,做衣架试验、网屏试验、蔗糖偏嗜度试验、旷场试验和强迫游泳试验等。 相隔 7d 进行复测试验。用 SPSS17. 0 软件处理数据并检验各行为学方法的复测信度。结果 行为学差异检测中 A 组、B 组首测昆明小鼠体质量、蔗糖偏嗜度、旷场试验水平运动、总分、网屏试验各项结果差异具有统计学意义( P ＜ 0. 05) ; 复测试验中体质量、蔗糖偏嗜度、网屏试验差异具有统计学意义( P ＜ 0. 05) ; 复测信度试验中粪便颗粒试验 为不可信( 信度系数为负值) ,衣架试验和旷场试验中垂直运动记分可信度较差,其它试验相关性均为可信( 体质量 为高度可信) 。结论 A、B 两组封闭群昆明小鼠体质量增长速度、蔗糖偏嗜度和网屏试验存在差异; 行为学检测方 法中信度评级为体质量 ＞ 强迫游泳 ＞ 蔗糖偏嗜度 ＞ 水平运动 ＞ 总分 ＞ 网屏试验 ＞ 衣架试验 ＞ 垂直运动。     

两种补充营养在锯缘青蟹育苗中后期的效果分析

在广西海洋研究所竹林盐场海水增养殖试验基地进行锯缘青蟹(Scylla serrata)育苗中后期(Z3～M)添加投喂螺旋藻和用鱼油强化过的丰年虫两种饵料补充营养实验。实验结果表明,添加螺旋藻可以降低青蟹育苗中期状幼体Z3～Z5的死亡率和缩短育苗周期;用鱼油强化丰年虫后再投喂蟹苗,可以降低Z5～M的死亡率;两种补充方法结合使用,可以明显降低青蟹育苗后期死亡率,缩短育苗周期。     

日粮蛋白质水平对鹅生长性能及肉质的影响

选取28日龄、体重相近的合浦灰鹅60只,随机分为3个组,采用精料 青料(黑麦草等)混合的方式进行饲喂试验,试验期为42天。第70d采血测定血清中尿素氮、转氨酶活性、血脂和脂蛋白等生化指标,并进行屠宰测定和肌肉营养成分含量测定。试验结果表明:(1)生长前期(28~49日龄),第2组日增重较高,各组间差异不显著(P>0.05);生长后期(50~70日龄)第1组日增重较高,各组间差异不显著(P>0.05)。(2)鹅的血清尿素氮含量随饲粮粗蛋白质水平的降低而下降(P<0.05);血清转氨酶活性、脂类和脂蛋白含量等组间无显著差异。(3)饲粮粗蛋白质水平对肉鹅屠宰性能无显著影响,鹅肉中的干物质、粗蛋白质、氨基酸总量、必需氨基酸总量、肌内脂肪、肌苷酸含量与蛋白质有正相关,各组间差异不显著(P>0.05),随着蛋白质水平提高,肌肉的营养和风味有改善的趋势。