日本绒螯蟹线粒体DNA序列研究：Ⅰ.12SrRNA

参考果民蚤状序列进行了日本绒螯蟹线粒体ＤＮＡ的１２ＳｒＲＮＡ基因片段的引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定,得到４５７ｂｐ的碱基序列,其中Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为１５９ｂＰ（３４．７９％）、１７８ｂｐ（３８．９５％）、５０ｂｐ（１０．９４％）、７０ｂｐ（１５．３２％）。     

日本绒螯线粒体DNA序列研究Ⅱ.1.16rRNA

参考果蝇、卤虫与锯缘青蟹的线粒体ＤＮＡ １６ＳｒＲＮＡ基因序列进行了日本绒螯蟹相同基因片段的引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定,得到５６７ｂｐ的咸基序列,其Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为１９４ｂｐ（３４．２２％）、２１６ｂｐ（３８．１０％）、９８ｂｐ（１７．２８％）５９ｂｐ（１０．４１％）,与果蝇、卤虫及锯缘青蟹类的１６ＳｒＲＮＡ基因片序列含量相似。     

瓢虫干标本基因组DNA的提取及RAPD分析

实验对保存多年的瓢虫干标本进行了基因组 ＤＮＡ提取和 ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增。结果显示 ＤＮＡ分子的提取与保存年代长短无直接关系;ＲＡＰＤ－ＰＣＲ增产物经琼脂糖凝胶电泳检测,分子量大小约为 １９８４ｂｐ～６３０ｂｐ;不同种瓢虫的 ＤＮＡ用同一引物,扩增片段是多态表现,同一种瓢虫的干标本保存时间虽不同,但扩增产物中均具有相同的ＤＮＡ片段。     

一种家猪基因组PCR—RAPD反应体系的建立

以家猪血样为ＤＮＡ提取材料 ，建立了用改进方法提取ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ－ＲＡＰ 分析的最佳条件，获得稳定而理想的ＰＣＲ－ＲＡＰＤ扩增结果。     

单引物PCR扩增DNA指纹图谱的稳定性研究

以人胶原蛋白基因下游一段ＤＮＡ的互补序列设计引物，对人染色体ＤＮＡ进行单引物ＰＣＲ扩增，在低温退火的条件下，这种引物与ＤＮＡ模板的一处完全配对，并且可以随机地结合在其他一些位置上。由此进行单引物ＰＣＲ扩增，它们的扩增产物形成了稳定的引物－模板特异的ＤＮＡ指纹图谱。本文所建立的单引物ＰＣＲ扩增技术在类似的研究中均可获得稳定的实验结果，具有一定的应用价值。     

罗汉松属植物DAN的提取和RAPD分析

以鸡毛松、竹柏、长叶竹柏、百日青和罗汉松为材料，通过对ＣＴＡＢ法进行改进提取了罗汉松植物的ＤＮＡ。ＤＮＡ的产率和质量均较理想，能满足ＰＣＲ扩增的需要。     

通用引物PCR方法检测生殖道HPV

目的：通用引物ＰＣＲ技术检测生殖道人乳头瘤病毒。方法：根据国外献报道的基因序列选出一对寡核苷酸引物，其扩增片断为４５０ｂｐ。结果：在４５０ｂｐ处出现ＤＮＡ扩增带为阳性，用于临床标本的检测，其阳性率为３０％（２９／９６）。结论：通用引物ＰＣＲ技术检测生殖道ＨＰＶ－ＤＮＡ快速，敏感，可靠。     

应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒

将具有犬细小病毒病典型症状的病犬肠溶物经ＳＤＳ－酚裂解法提取总ＤＮＡ,并以此ＤＮＡ为模板,通过人工合成的两条２０ｍｅｒ引物进行ＰＣＲ扩增,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白ＶＰ２基因中间１／３区段,ＰＣＲ产物经琼脂糖凝胶电泳,试验结果表明：用ＰＣＲ扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性,应用该方法检测的２７份病犬肠溶物样品块获得了预计长度的ＤＮＡ片段（５３１ｂｐ）,而健康犬的肠溶物样品ＰＣＲ结果为     

胜加端PCR技术改造hIGF—1cDNA

用ＤＮＡ合成仪合成了分别带有ＰｓＩ位点和ＳａｉＩ位点及张终止密码子的２个用于扩增ｈＩＤＧＦ１ｃＤＮＡ的ＰＣＲ引物，利用合成的引物，７００ｂｐ长的ｈＩＧＦ－Ｄ１ｃＤＮＡ模板和Ｔａｑ聚合酶进行ＰＣＲ扩增。     

性别鉴定的分子生物学技术与ZFY途径

立足性别决定的雄性决定说，综述了三十年来搜寻Ｙ染色体上睾丸决定因子（ＴＤＦ）的进程以及在此理论基础上发展起来的Ｙ－特异ＤＮＡ探针杂交、ＰＣＲ扩增Ｙ－特异ＤＮＡ、ＰＣＲ扩增ＳＲＹ序列、ＰＣＲ扩增ＺＦＹ序列等分子水平性别鉴定技术；比较了各种技术的长处与不足以及采用ＺＦＹ序列进行性别鉴定的优势     

用PCR法检测人巨细胞病毒DNA

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法检测患者尿液中人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）ＤＮＡ．结果表明，自行设计合成的引物位于ＨＣＭＶ基因组早期蛋白基因区，经ＰＣＲ仪扩增一段长４３０ｂｐ的特异序列片段，对正常人基因组ＤＮＡ或其它疱疹病毒ＤＮＡ无交叉反应．此法可检测出少至１０－１６ｇ（０．１ｆｇ）的病毒ＤＮＡ．通过对３５份尿液标本的检测，比较ＰＣＲ法和组织培养法的检测结果完全一致     

应用PCR技术检测结核菌的临床研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对２４４例呼吸疾病患者临床标本进行结核菌ＤＮＡ检测，并同时与涂片抗酸染色结果进行比较。结果显示：１１２例结核标本涂片和ＰＣＲ检测阳性率分别为１６．１％和５２．７％，两者差别有显著性（Ｐ＜０．０１）。９４例涂阴结核标本ＰＣＲ阳性达４５．７％。结果表明应用ＰＣＲ技术检测结核杆菌ＤＮＡ具有快速敏感、特异性较高等优点，尤其对涂阴病人具有较大诊断价值     

一种简单,快速植物RAPD分析DNA提取方法

随机引物扩增多态性ＤＮＡ(ＲＡＰＤ)分析实验中的植物总ＤＮＡ提取方法已有很多文献进行过详细阐述和讨论[1～ 5] ,同时 ,邹喻萍等[6] 对于濒危植物ＲＡＰＤ分析 ,尤其是植物ＤＮＡ难于提取的种类如银杉、矮壮丹、南川剑麻的总ＤＮＡ提取鉴定进行了较理想的改进 .但以往的ＤＮＡ提取一般费时较长、工序繁琐 .本实验采用普遍使用的ＣＴＡＢ法提取曼陀罗ＤＮＡ ,根据在实验中的摸索 ,对植物总ＤＮＡ的提取条件作了较大改进 .用此方法提取的ＤＮＡ能直接用于ＲＡＰＤ ,ＰＣＲ ,ＲＦＬＰ等分子生物学实验 .1　材料与方法1 .1　材料　曼陀罗 (Ｄ…     

小麦叶绿体DNA的提取与psbA基因的扩增

利用高离子强度，低ｐＨ值缓冲液匀浆细胞的方法，提取小麦叶绿体ＤＮＡ，并以此为模板，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）对小麦叶绿体ｐｓｂＡ基因进行了特异性扩增。     

AP—PCR在肿瘤DNA多态性研究中的应用

首次将ＡＰ－ＰＣＲ应用于ＤＮＡ多态性研究。研究了ＡＰ－ＰＣＲ的反应程度，找到实现稳定扩增的适宜条件，并发现模板ＤＮＡ浓度的变化在相当范围内不会改变扩增图谱；对肿瘤瘤周组织以及正常组织进行分析，在１１个引物中发现２个引物的扩增结果是多态的。初步结论：多态现象与癌变相关。     

用加端PCR技术改造h－IGF－1cDNA

用ＤＮＡ合成仪合成了分别带有ＰｓｔＩ位点和ＳａｌＩ位点及终止密码子的２个用于扩增ｈＩＧＦ－１ｃＤＮＡ的ＰＣＲ引物．利用合成的引物，７００ｂｐ长的ｈＩＧＦ－１ｃＤＮＡ模板和Ｔａｑ聚合酶进行ＰＣＲ扩增．扩增产物经电泳鉴定后克隆进Ｍ１３ｍｐ１８载体，进行核苷酸序列分析．结果显示：ＰＣＲ产物含已发表的ｈＩＧＦ－１成熟蛋白的编码序列和５＇端的ＰＳｔＩ位点及３＇端的ＳａｉＩ位点及终止密码ＴＡＧ．用加端ＰＣＲ技术成功地扩增和改造了ｈＩＧＦ－１的编码序列．     

中国河南西峡恐龙蛋化石中18SrDNA部分片段的克隆及序列…

本文从河南省西峡晚白垩世的一枚保存方式特殊的恐龙蛋化石中提取ＤＮＡ，经过＾３２Ｐ同位素标记和电泳分析，发现在蛋内腔的絮状物样品中确在ＤＮＡ片段存在。它们的大小约在１０００ｂｐ至几十ｂｐ之间，大多数片段在４００ｂｐ以下。用１８ＳｒＤＮＡ特异引物，以上述ＤＮＡ为模板进行了ＰＣＲ扩增，经电泳分析得到约２００ｂｐ的ＰＣＲ产物。经过连接、转化到大肠杆菌，最终筛选出６个阳性克隆。测序分析和同源性比较发现这６个     

AP－PCR在肿瘤DNA多态性研究中的应用

首次将ＡＰ－ＰＣＲ应用于ＤＮＡ多态性研究．研究ＡＰ－ＰＣＲ的反应程度，找到实现稳定扩增的适宜条件，并发现模板ＤＮＡ浓度的变化在相当范围内不会改变扩增图谱；对肿瘤、瘤周组织以及正常组织进行分析，在１１个引物中发现２个引物的扩增结果是多态的．初步结论：多态现象与癌变相关．     

水稻染色体微切割及4号染色体酶解片段的扩增

通过细胞分裂的同步化,低渗,酶消化,瞬间固定和涂片等制片技术,快速制备水稻根尖体细胞染色体标本。该方法制备出的染色体标本,杂质少,染色体分散程度好,满足了染色体微切割用片的要求。染色体微切割和ＰＣＲ扩增技术,获得了水稻第４号染色体ＤＮＡ文库。     

中华绒螯蟹呼吸系统的组织学和组织化学

采用组织学和Ｆｅｕｌｇｅｎ、Ｕｎｎａ－Ｂｒａｃｈｅｔ等９种组化方法，分析了鳃中部分物质的分布状况。结果表明Ｆｅｕｌｇｅｎ阳性反应只限于各类细胞核中，质中普通含有ＲＮＡ；整个系统ＨｇＢＰＢ反应呈阳性；ＰＡＳ反应示Ｒ细胞含糖元，其余呈ＰＡＳ阳性的均为中性或酸性粘多糖，且多与蛋白质形成结合物。本文还对鳃的多种功能进行了探讨。