大鼠肝癌细胞株细胞的同步化及其检测

细胞增殖分裂是细胞最基本的生理活动。影响细胞增殖分裂归根到底是影响细胞周欺遥运行,细胞周期失控的超常快速运行将导细胞癌变;停滞不前则常是细胞衰老,凋亡的前奏,以大鼠肝癌细胞株（ＨＴＣ）的细胞为研究对象,探讨了ＨＴＣ细胞的同步化方法,并经流式细胞仪测定同步率,结果表明：在ＨＴＣ细胞对数生长期,以胸腺嘧啶核苷和秋水仙碱顺序阻断法及胸腺嘧啶核苷双阻断法可分别获得同步率为７２．１０％的Ｇ１期和９８．９４％     

TdR诱导肝癌细胞株HepG2细胞周期同步化的效果

取对数生长期的 HepG2 细胞,加入含 TdR 的培养基 28 h 后,收集细胞,用 PBS 洗2次,加完全培养基,分别于 12 h 和24 h 收集各组细胞.用流式细胞术分析细胞周期各时相细胞百分数.探讨 TdR(胸腺嘧啶核苷)诱导人肝癌细胞株 HepG2 同步化后的细胞周期时相的变化.结果是TdR能较好地使肝癌细胞株Hepc2同步化于G1期和G2期.TdR诱导细胞后,分别于12中 h 获得(63.62±2.82)%的 G2/M 期同步化细胞,24 h 后获得(75.24±0.17)%的G1期同步化细胞.     

应用流式细胞术研究乳腺癌MCF-7细胞周期同步化

目的筛选出适宜的血清及秋水仙碱的作用浓度及时间,使乳腺癌MCF-7细胞分别达到G0/G1和G2/M期同步化。方法采用血清饥饿法诱导MCF-7细胞G0/G1同步化,秋水仙碱诱导细胞G2/M期同步化,流式细胞仪检测细胞各期分布情况。结果处理24 h后,1%血清浓度组G0/G1期细胞分别达到(72. 96±0.84)%,1. 0μg/mL秋水仙碱处理组G2/M期细胞分别占总细胞数(73. 67±1. 77)%。处理36 h后,1%血清浓度及秋水仙碱实验组细胞发生凋亡。结论MCF-7在血清浓度为1%处理24 h后完成G0/G1同步化,在1. 0μg/mL的秋水仙碱处理24 h后完成G2/M期同步化。     

磷酸饥饿诱导大肠杆菌同步化

用改良的Ｋｅｐｅｓ磷酸饥饿法诱导大肠杆菌Ｋ—１２ＡＭ１２６４同步化生长，细胞经８轮同步化步骤后可在磷酸不限制培养基中自由生长保持２～３次同步化细胞周期。Ｋ—１２ＡＭ１２６４大肠杆菌的细胞增倍和分化周期分别为５５和１５ｍｉｎ，同步化细胞周期可分达３个时相。细胞分裂期（Ｐ），细胞分裂和染色体复制起始间期（Ｑ）以及染色体复制起始和细胞分裂间期（Ｒ）。Ｒ期又可分Ｒ１和Ｒ２两个亚期。在Ｒ１亚期胸腺呼啶掺入ＤＮＡ的速度增加，在Ｒ２亚期掺入速度保持恒定。Ｒ１和Ｒ２期分别为１５和１０ｍｉｎ。     

盐生杜氏藻同步化及细胞周期的研究

盐生杜氏藻是一种海洋生活的单细胞藻类，细胞中具有细胞核，叶绿体等细胞器，细胞呈椭圆形，直径在15～20μm，人工配制的海水中培养。由于具有叶绿体，能进行光合作用，因此可以用光暗交替处理，诱导细胞同步法。Lor等人[1]报导用光暗交替诱导小眼虫得到较好的同步化结果，他指出对衣滴虫、小球藻。异变形藻等都可以用光暗交替法诱导同步化。盐生杜氏藻使用此法诱导同步化，并测定同步化后细胞周期，这方面还未见详细报道。本文就此作初步探讨。1材料与方法1.1盐生杜氏藻：来自山东海洋大学赠送，定名为Dunaliellabolt。a，采用人工配制…     

α因子调控酿酒酵母细胞同步化

利用α因子可以使MATa酵母细胞的生长停滞在细胞周期的G1期,获得同步化的YKN-10酵母菌细胞,主要研究在25~200μg·mL-1浓度下的α因子对酿酒酵母YKN-10对数早期细胞作用0~5h的同步化影响,每隔0.5h在荧光倒置显微镜下观察酵母细胞的出芽形态,记录细胞的出芽率,然后用SPSS 17.0对酵母细胞的出芽率进行统计分析,α因子的浓度、α因子作用时间及二者的交互效应均对酵母细胞的平均出芽率有显著影响;α因子浓度在175~200μg·mL-1下培养酵母细胞约3.5~4h时,酵母细胞基本上达到了同步化状态,运用α因子停滞细胞生长法获得了同步化的YKN-10酵母菌群体,为非Δbar1突变菌株的同步化研究提供了参考.     

多媒体数据流描述模型及同步化的实现

通过对视频、音频、文本及静止图像等多媒体数据流序列结构化描述模型的建立,实现以此为基础的多媒体数据流分类、分割及同步描述等功能。为确定多媒体数据流的每个对象在时间和空间上的位置问题,提供了描述、传输、存储的结构化同步描述方法。     

P15INK4b对人黑色素瘤细胞周期及G1期相关调控基因的影响

人黑色素瘤细胞A375是P15INK4b缺失细胞系,通过细胞转染技术将外源P15INK4bcDNA转染A375细胞,经PCR和Western blot检测,证明构建了P15INK4b稳定表达细胞模型MLIK6.流式细胞光度术结果显示,与对照组MLC2相比,MLIK6细胞G1期升高11%,S期下降14%.利用TdR-N2O同步法所得同步的MLIK6和MLC2的M期细胞比例分别达到89.1%和76.8%,而G1期的比例分别为74.3%和76.4%.3H-TdR掺入的结果显示,MLIK6从G1期进入S期的时间比MLC2延长2 h,并且掺入强度明显减弱.进一步探讨P15INK4b对G1/S相关调控基因的影响,发现G1期的MLIK6细胞在诱导P27表达升高的同时,cyclinD1,CdK4,cyclinE和c-myc的蛋白水平均降低,其中cyclinD1的抑制在晚G1期附近最显著,而对cyclinE的抑制则在G1/S转换处表现突出,癌基因c-myc表达受到明显抑制并贯穿于G1→S全部时间进程中.说明P15INK4b是通过对G1期不同阶段细胞周期引擎分子cyclinD1,CdK4,cyclinE和癌基因c-myc的抑制及增加CKI P27延缓了G1/S进程.     

血清饥饿法诱导人角质细胞HaCaT细胞周期同步化的研究

探讨血清饥饿法对人表皮细胞HacaT细胞周期的影响．采用无血清和低血清浓度的DMEM培养基饥饿HaCaT细胞,分别培养6h,12h,22h时,用倒置显微镜观察细胞形态,并且收集各组细胞,用流式细胞仪分析细胞周期各个时相细胞百分比．结果发现HaCaT细胞系在含0．2％FBS的DMEM培养基中培养12h,细胞仍然贴壁生长,并且可以使G0／G1期细胞百分率达到66．5％．因此,血清饥饿法可以应用于人表皮细胞HaCaT同步于G0／G1期,从而为后期药物筛选打下基础．     

我国地区经济周期波动的同步化实证分析

采用我国6个经济划分区1952~2004年度GDP数据,通过频域方法分析了我国地区经济周期波动的同步化趋势.根据非线性过程——锁相理论,运用Granger因果关系检验、脉冲反应函数以及方差分解等证明了我国地区经济波动之间发生锁相的必要条件.结果表明,我国地区经济周期的同步化程度十分显著,相关程度达到0.786,造成这种现象的主要原因在于我国地区经济波动之间具有非线性锁相发生的必要条件,即其具有锁相机制.     

悬浮培养肿瘤细胞的生物钟同步化细胞模型建立及其在择时给药研究中的应用

生物钟与肿瘤的发生和治疗都密切相关,但目前体外培养的肿瘤细胞同步化方法欠佳,导致体外培养的肿瘤细胞很难表现出生物钟节律现象.针对上述问题,采用悬浮培养的方法,同时进行同步化处理,定时取样分析,在体外细胞培养体系中可获得良好的周期性生物钟节律.将该同步化培养方法用于不同的生物钟节律阶段给药,能引起肿瘤细胞的差异反应,即择...     

丁酸钠对M期同步及非同步的HeLa细胞早G_1期阻断的可逆性

本文采用早熟染色体凝集(PCC)和~3H-TdR显微自显影技术,观察丁酸钠对同步及非同步的HeLa细胞早G_1期阻断的可逆性及其可逆的进程。实验发现丁酸钠对HeLa细胞早G_1期阻断完全是可逆的,且这种可逆是在洗去丁酸钠后立即产生,丁酸钠对HeLa细胞早G_1期阻断的时间点发生在细胞进入S期前的9.5h;发现早G_1期阻断后的恢复必须再经过中、晚G_1期然后才能进入S期.     

供需网的IDEF0模型构建及MIFPN模型转换

将IDEF0模型与Petri网相结合,对多信息流系统进行功能描述和动态行为关系分析,提出了多信息流Petri网(MIFPN)的定义,给出了IDEF0至MIFPN转换的规则方法.在此基础上实现对多功能开放型企业供需网系统的功能分析与设计.     

假微型海链藻硅吸收及硅化作用与细胞周期偶合关系的研究

采用硅饥饿的培养方法，假微型海链藻（Thalassiosira pseudonana Hasle et Heimdal）得以同步生长．再通过流式细胞仪测定假微型海链藻的细胞周期，荧光显微镜观察假微型海链藻新硅质壁的形成，硅钼黄法检测假微型海链藻在细胞周期各阶段硅含量的变化，研究了假微型海链藻在细胞分裂周期中硅吸收与硅化作用的变化特征及相互间的偶联关系．结果表明：硅饥饿24h后，细胞停滞在G1／S期的边界，重新加入硅后，细胞同步生长．同步化培养后1h和3h，分别是吸收硅、合成新壳环带的主要时期，与G1／S期偶合；第5小时和第7小时，分别是吸收硅、合成新壳面的主要时期，与G2＋M期偶合．     

肝癌细胞株HepG2的G1期、G2/M期细胞蛋白质组表达差异的研究

通过TdR(胸腺嘧啶核苷)调控人肝癌细胞株HepG2的细胞周期,运用双向电泳-图像分析-质谱技术研究肝癌细胞株HepG2的G1期、G2/M期全细胞蛋白质组表达的差异,探索参与肝癌细胞株HepG2的G1期、G2/M期调控相关的蛋白.以TdR诱导肝癌细胞株HepG2,分别得到同步化的G1期、G2/M期细胞,流式细胞术检测.采用比较蛋白质组学的研究技术(双向电泳、质谱分析)筛选G1期、G2/M期差异表达的蛋白质.结果流式细胞术检测显示TdR诱导后,分别获得(63.62±2.82)%的G2/M期同步化细胞,(75.24±0.17)%的G1期同步化细胞,通过双向电泳-图像分析-质谱技术得到21个差异表达的蛋白.其中G2/M期表达,G1期未见表达有10种蛋白;存在三倍以上的差异点11个:2种在G2期表达上调,9种在G1期表达上调.说明TdR阻断法能够获得很好的同步化细胞.质谱鉴定得到的这些差异表达的蛋白质涉及到细胞周期调控、DNA结合、转录调控、mRNA剪接、肽链合成起始、折叠以及细胞代谢等方面.     

嫩江冰封期污染物输入响应模型的建立

嫩江是典型的北方河流，随着工业生产和城市建设的不断发展，污染日益严重，以有机污染为主。为弄清河流的自净能力，确定水环境容量，为水质规划及管理提供科学依据。本文通过系统分析，建立了嫩江冰封期污染物输入响应模型。     

基于Mellin变换的G0分布参数估计方法

G0分布模型具有广泛均匀度变化下的杂波区域建模能力和较强的模型兼容性,是目前合成孔径雷达（synthetic aperture radar,SAR）图像杂波统计建模领域最为重要的模型之一,在SAR图像解译方面有着广泛的应用．然而,G0分布参数的快速准确估计一直是制约其实际应用的主要技术瓶颈,至今尚无理想的解决方案．针对这一问题,首先详细分析了经典矩估计和最大似然估计应用于G0分布参数估计的理论缺陷。在此基础上,提出了一种基于Mellin变换的G0分布参数估计方法．该方法以Mellin变换为出发点,详细推导了G0分布对应的第一个、第二个第二类型的特征函数和它们各自对应的对数矩和对数累积量,最终获得了G0分布参数估计简洁的迭代表达式．该方法不但解决了矩估计所面临的参数不能实现全范围估计的难题,更重要的是把等效视数同形状参数、尺度参数一样视为待估计参数,且能够快速准确地迭代出它们的估计值,保证了G0分布的拟合精度．以KL（Kullback—Leibler）度量、MSE（meansquareerror）度量和K—S（Kolmogorov Smirnov）检验为定量评估准则,对不同分辨率、不同视数的实测SAR图像分别采用文中方法、矩估计、最大似然估计方法进行拟合实验,实验结果的全面对比分析证明了所提方法的有效性．     

基于Mellin变换的G0分布参数估计方法

G0分布模型具有广泛均匀度变化下的杂波区域建模能力和较强的模型兼容性,是目前合成孔径雷达(synthetic aperture radar,SAR)图像杂波统计建模领域最为重要的模型之一,在SAR图像解译方面有着广泛的应用.然而,G0分布参数的快速准确估计一直是制约其实际应用的主要技术瓶颈,至今尚无理想的解决方案.针对这一问题,首先详细分析了经典矩估计和最大似然估计应用于G0分布参数估计的理论缺陷,在此基础上,提出了一种基于Mellin变换的G0分布参数估计方法.该方法以Mellin变换为出发点,详细推导了G0分布对应的第一个、第二个第二类型的特征函数和它们各自对应的对数矩和对数累积量,最终获得了G0分布参数估计简洁的迭代表达式.该方法不但解决了矩估计所面临的参数不能实现全范围估计的难题,更重要的是把等效视数同形状参数、尺度参数一样视为待估计参数,且能够快速准确地迭代出它们的估计值,保证了G0分布的拟合精度.以KL(Kullt)ack-Leibler)度量、MSE(mean square error)度量和K-S(Kolmog-orov-Smirnov)检验为定量评估准则,对不同分辨率、不同视数的实测SAR图像分别采用文中方法、矩估计、最大似然估计方法进行拟合实验,实验结果的全面对比分析证明了所提方法的有效性.     

真核生物细胞周期的调控

近年来细胞周期调控已成为分子生物学研究的热点之一。本文对酵母、动物和植物的细胞分裂及细胞周期调控的研究进展作一简要综述，并对酵母和动物的细胞周期调控与植物的相应机制进行比较．     

掺杂方式对Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷微结构及性能的影响

采用溶-凝胶法制备Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷粉末,以传统陶瓷制备工艺制备Mg元素掺杂的Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷．研究MgO掺杂量为1．6％（质量分数）时,MgO固相掺杂和Mg计湿化学法掺杂两种不同的掺杂方式对Mg掺杂的Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷显微结构及电学性能的影响．研究结果表明,当Mg掺杂量相同时,掺杂方式对Mg掺杂的Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3。陶瓷的显微结构和电学特性有显著的影响,相比纯的Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷,两种掺杂方式中,Mg2＋湿化学法掺杂相对于MgO固相掺杂,在BSZT陶瓷中的分布更均匀,替位程度更高,所以其对介电常数的影响也相对更大．而MgO固相掺杂相对于Mg2＋湿化学法掺杂明显地促进了陶瓷晶粒的生长,提高了陶瓷的致密性,同时其击穿电场和电阻率也有较大提高．1350℃下烧结的固相MgO掺杂的Mg：Ba0．3Sr0．7Zr0．18Ti0．82O3陶瓷性能较优,介电常数约为590,介电损耗低于0．0005,电阻率为7．78×10^13Ω·mm,击穿场强为6．56kV／mm．