野大豆与栽培大豆愈伤组织耐盐性比较

野大豆(Glycine soja)是唯一能与栽培大豆(Glycine max)杂交而后代能育的野生近缘种,具有极强的耐盐碱性,利用野大豆与栽培大豆有性杂交,结合离体组织培养技术,进行耐盐性变异体的离体筛选,是提高大豆耐盐性的一种有效途径。本研究选择5种栽培大豆品种和从黄河三角洲地区(山东东营)获得的野大豆,进行了大豆成熟胚愈伤组织诱导及愈伤组织耐盐性研究。结果显示,不同浓度Na Cl胁迫下,野大豆愈伤组织的存活率明显高于栽培大豆,与对照相比鲜重下降幅度明显低于栽培大豆;Na Cl胁迫下,野大豆愈伤组织的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性明显高于栽培大豆愈伤组织,MDA含量明显低于栽培大豆,表明野大豆愈伤组织耐盐性明显优于栽培大豆。该研究为耐盐大豆新品种培育提供了理论依据。     

RAPD技术对东北地区大豆的初步研究

采用ＲＡＰＤ技术对东北地区不同类型大豆共３２份材料进行了分析，以野生种０１６５０，半野生种０１７７１和栽培种吉林２１号大豆的基因组ＤＮＡ为模板，对Ｏｐｅｒｏｎ公司的Ａ，Ｆ，ＧＨ和Ｋ组共１００个随机引物进行了筛选，依据扩增结果选用了１９个引物对３２份大豆材料进行了扩增，所获得的８２个多态片段可将供试材料全部区分开。     

果梅RAPD标记不同电泳指纹比较及

利用11个碱基引物, 在对退火温度等反应条件进行严格优化的基础上,以不同品种果梅为材料,同时利用琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测了RAPD扩增产物。结果表明：PAGE电泳检测出的谱带总数量以及多态性谱带的数量分别为204和145, 以琼脂糖凝胶检测的为91和58。根据PAGE电泳系统获得的标记信息对16个果梅品种进行聚类分析,表明所有品种都能被很好地区分,并在一定程度上反映了果梅品种的亲缘关系。通过对20个随机挑选的扩增片段进行克隆与测序发现,20个片段都是对应引物的RAPD扩增产物,在不同的16个序列中有4条是编码蛋白的基因片段,说明了RAPD不仅扩增基因组上的非编码蛋白序列,同时可以扩增编码蛋白的基因片段,是对基因组不同区域的随时机扩增,所以能够客观地反映不同果梅品种间的遗传差异。     

基于RAPD标记的我国水青冈属植物的分类研究

应用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)方法,对我国水青冈属(Fagus L.)6种植物,即巴山水青冈(F.pashanica)、长柄水青冈(F.longipetiolata)、米心水青冈(F.engleriana)、亮叶水青冈(F.lucida)、台湾水青冈(F.hayatae)和浙江水青冈(F.hayatae var.zhejiangensis)进行基因组多态性分析,选用80个随机引物进行扩增,其中56个引物扩增出清晰可重复的条带,片段大小在250～3050 bp之间.采用UPGMA法对求出的遗传片段进行聚类分析.结果显示:台湾水青冈、巴山水青冈和浙江水青冈的遗传距离较近,表明它们可归并为一种.这与我国水青冈属的生态解剖学研究结果完全一致.根据结果将我国水青冈植物归并分为4种:长柄水青冈、米心水青冈、亮叶水青冈、台湾水青冈(包括巴山水青冈和浙江水青冈).     

野生大豆DNA导入小麦及RAPD分子验证

利用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦，以期获得变异系小麦．对小麦球蛋白的SDS—PAGE，印迹表明，冬小麦T2l6#产生了新的蛋白亚基，其分子量为78kD，而有的变异品系一些蛋白亚基消失了；凯氏定氮法和氨基酸分析表明小麦后代T216#的总蛋白含量增加，其氨基酸组成，尤其是赖氨酸含量明显提高．RAPD分析结果表明，新品系基因组出现多态性，并具有供体特异性DNA带，这些变异现象表明该小麦品系为转基因后代．本实验为选育高蛋白、优质的新小麦品种提供了途径．     

中国野生大豆胰蛋白酶抑制剂的初步研究

采用分离提取,电泳回收,ＰＡＧＥ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,亲和电泳和抑制活性测定等方法,对我国一年生和多年生野生大豆种子蛋白中的胰蛋白酶抑制剂进行了初步研究。在４５°Ｎ来源一的上生野生大豆中得到纯化的胰蛋白酶抑制剂。通过电泳迁移率,分子质量,末端分析和抑制活性等测定,证明中ＳＢＴｉ－Ａ２的Ｔｉ＾ｂ型。     

基于形态结构浅析大豆属植物演化的研究进展

本文简要综述了大豆的起源,分别从营养器官和繁殖器官以形态结构的角度,将栽培大豆较野生大豆进化的形态结构学依据进行了综述.旨在从结构植物学角度为大豆属（Glycine）植物起源及系统演化研究提供科学依据.     

中国香菇野生菌株的DNA多态性研究

采用20个不同来源的野生香菇菌株，用RAPD方法对这些香菇菌株的多态性进行了研究．结果发现，有11个引物表现清晰的RAPD谱带并呈显著多态性，同时发现香菇菌株的亲缘关系与生态地理有一定的关系，但没有必然的联系．     

RAPD技术在昆虫分类学研究中的应用

传统昆虫分类学主要从昆虫形态特征着手,是进行昆虫分类的主要方法,但形态分类的方法在较低的分类阶元中有着较大的局限性.近年来分子生物学技术同传统分类学方法相结合,在昆虫分类学研究中得到广泛的应用.本文概述了随机扩增多态性DNA(RAPD)技术的技术基础,分析了PAPD简便快捷、费用低、灵敏度高、对模板纯度要求不高、能充分反映模板的多态性等技术优势;同时指出了该技术稳定性和可重复性差、不能对纯合体杂合体加以区分、存在共迁移问题等不足之处;阐述了近年来国内外RAPD技术在同翅目、蜚蠊目、双翅目、鳞翅目、直翅目、鞘翅目等昆虫的分类鉴定及昆虫系统发育分析中的应用.本文认为,PAPD技术扩展了分子生物学技术在昆虫分类学的应用范围,该技术的成功应用,极大地提高了昆虫分类学研究的水平,并且随着技术手段的不断进步有着更为广阔的应用前景.     

佛手RAPD扩增系统的建立

试验了模板DNA、引物、镁离子和Taq酶的浓度对佛手RAPD分析结果的影响,从而建立了适合佛手RAPD扩增的系统.具体条件为:25μL反应体系中模板DNA 100 ng(4 ng/μL),MgCl2 3.0～5.0 mmol/L,dNTP 200μmol/L,10-mer Primet 0.2 μmol/L及1 U Taq Polyrnerase.扩增程序为:93℃120 s;之后,93℃60 s,35℃60 s,72℃120 s,进行42个扩增循环;最后72℃延伸600s.     

Genetic diversity, geographic differentiation and evolutionary relationship among ecotypes of Glycine max and G. soja in China

The knowledge of origin and evolution of cultivated soybeans is one of the basic issues in both biology and agronomy of the crop. In order to investigate the nuclear and cytoplasmic genetic diversity, geographic differentiation and genetic relationship among geographic ecotypes of cultivated （Glycine max） and wild （G. soja） soybeans, the allelic profiles at 60 nuclear simple-sequence repeat （nuSSR） loci and 11 chloroplastic SSR （cpSSR） loci evenly distributed on whole genome of 393 landraces and 196 wild accessions from nation-wide growing areas in China were analyzed. （i） The genetic diversity of the wild soybean was obviously larger than that of the cultivated soybean, with their nuSSR and cpSSR alleles as 1067 vs. 980 and 57 vs 44, respectively. Of the 980 nuclear alleles detected in the cultivated soybean, 377 new ones （38.5%） emerged, while of the 44 chloroplastic alleles in the cultivated soybean, seven new ones （15.9%） emerged after domestication. （ii） Among the cultivated geographic ecotypes, those from southern China, including South-Central China, Southwest China and South China possessed relatively great genetic diversity than those from northern China, while among the wild geographic ecotypes, the Middle and Lower Changjiang Valleys wild ecotype showed the highest genetic diversity. （iii） The analysis of molecular variance, association analysis between geographic grouping and molecular marker clustering and analysis of specific-present alleles of ecotypes demonstrated that the geographic differentiation of both cultivated and wild soybeans associated with their genetic differentiation, or in other words, had their relevant genetic bases. （iv） The cluster analysis of all accessions clearly showed that the wild accessions from Middle and Lower Changjiang Valleys and South-Central ＆ Southwest China had relatively small genetic distances with all cultivated accessions. The UPGMA dendrogram among geographic ecotypes further showed that the genetic distances between all cultivated ecotypes and the Middle and Lower Changjiang Valleys wild ecotype were smaller than those with other wild ones, including their local wild counterparts. Therefore, it is inferred that the wild ancestors in southern China, especially those from Middle and Lower Changjiang Valleys might be the common ancestor of all the cultivated soybeans.     

不同球孢白僵菌菌株DNA的RAPD分析

采用RAPD技术分析了16个球孢白僵菌菌株的遗传分化。由160个随机引物中筛选出27个引物对各菌株进行了PCR扩增。结果表明从16个 孢白僵菌菌株中共获301个RAPD标记,其中多态性标记288个,占95．7％,表明菌株间具有较丰富的遗传多态性,聚类分析把16个球孢白僵菌菌株分为三大类型（1）Blh,,Bgd和Bpy;(3)By7,F-263,RECBb01,B12和B13;（3）B7,B11,Bxs,B6,By2,Bpc和Bzs。菌株DNA多态性与采集地之间有一定的相关性,但与寄主来源,孢子形态和对松墨天牛幼虫的毒力间未表现出明显的相关性。     

中国栗属特有种保守RAPD片段分析

利用RAPDDNA分子标记技术研究了栗属特有种(板栗、茅栗和锥栗)特异保守片段。结果表明，从520多个随机引物中筛选出有扩增产物，且多态性丰富的10个引物，其中引物B08(GTCCACACGG)分别在所有供试的板栗、茅栗和锥栗中均扩增出各自特异的DNA片段，其片段大小分别为2050，900和1500bp。这些DNA片段在种水平上的高度保守性，可以用来区分这3个种。此次研究结果同时也说明RAPD标记是鉴别近缘种的理想工具。     

家兔RAPD图谱及双引物的运用研究

运用单引物获得了较理想的五个家兔个体的ＲＡＰＤ图谱，并探讨了双引物的运用。结果表明：ＲＡＰＤ可用于家兔品种（系）鉴定，具有较大运用潜力。双引物能比单引物扩增出更多的具有多态性的条带，双引物的运用是提高多态性的有效而且很经济的手段。     

索科线虫RAPD反应条件优化

以中华卵索线虫为材料,研究索科线虫DNA的提取以及对RAPD的影响因素,包括模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq聚合酶浓度等,探索最佳反应条件,构建了适于索科线虫RAPD分析的稳定的反应体系.25μL反应体系中,含模板DNA20~40 ng,10×PCR缓冲液2.5μL,MgCl22.0 mmol/L,dNTP 150μmol/L,引物0.3μmol/L,Taq聚合酶1U.实验证明,在对索科线虫进行RAPD分析时,采用优化的反应条件,规范实验操作,使用同厂家同批次的试剂,实验结果就会具有很好的重复性和稳定性.     

RAPD技术在蔬菜种质资源研究中的应用

对RAPD技术在蔬菜种质资源研究中资源鉴定分类、杂合体鉴定、突变体检测、杂交世代分析、遗传图谱构建等研究领域进行了介绍。     

荞麦RAPD指纹图谱的建立及在品种鉴定中的应用

从9个荞麦品种的幼苗叶片提取DNA,使用CTAB和PVP并结合纯化过程中在高盐(N aC l)下沉淀DNA,可除去样品中影响DNA纯度的多酚类化合物和多糖.共使用13个随机引物,扩增的DNA片段大小为3.0K b~0.8 K b.从9个材料的13组RAPD指纹图谱上可以看出甜荞和苦荞的图谱差异很大(相同条带数占总条带数的比例为21%).在13个引物中有10个引物(占全部引物的77%)在甜荞的RAPD图谱上显示了品种间的DNA多态性,而苦荞只有6个引物(占全部引物的46%)产生了这种多态性.从荞麦RAPD指纹图谱上得到的特异带可以作为品种鉴定的分子标记.     

麦冬道地性的RAPD分析

通过对分别来自四川、湖北、浙江、上海的麦冬(Ophiopogon japonicus(L.f.)Ker-Gawl.)的13个居群和两个沿阶草种(Ophiopogon bodinieriLévl和Ophiopogon bockianusDiels)的RAPD分析,研究麦冬的道地性.所用麦冬和两个近缘种同属沿阶草属.从40条随机引物中筛选到8条引物用作RAPD分析.通过分析获得了504条RAPD带,其中多态性占89.4%.根据距离系数构建了13个麦冬居群和两个沿阶草种的非加权算术平均(UPGMA)树.最大的遗     

南方鲇核基因组遗传结构的RAPD分析

为了解南方鲇核基因组的遗传结构,采用38个随机引物对长江上游及其支流中南方鲇的核基因组DNA进行随机扩增.岷江支流甄溪个体与金沙江个体的遗传距离为0.265,与岷江个体的遗传距离为0.208,明显高于金沙江个体与岷江个体的遗传距离0.095.实验结果显示,长江上游金沙江岷江及其支流甄溪水域中的南方鲇个体间核基因组存在RAPD遗传多样性.