钩端螺旋体的保存方法

钩端螺旋体引起的钩体病是一种严重人兽共患传染病，在医学微生物学教学与科研中经常使用钩端螺旋体菌种，钩端螺旋体按常规方法保存一般每月传代１次，超过这时间易于死亡，频繁传代，费时费力，也增加钩端螺旋体菌种污染机会。目前在国内多数单位无特殊设备情况下，能否长期保存钩端螺旋体，具有重要意义。我们通过对３种途径保存方法进行比较，经过多年的实践，培养钩端螺旋体传代时间延长至９０ｄ，而安瓶封闭保存至少达到６年以上。１材料与方法 按以下顺序配置无血清的柯氏培养基，其成分为国产蛋白陈 ０．４ ｇ、ＮａＣ１ ０．７ ｇ…     

微机在钩端螺旋体菌苗培养中的应用

介绍了微机在钩端螺旋体菌苗培养中的应用情况，该系统是由一台ＩＢＭ－ＰＣ／ＸＴ微机和６个８０３１单片机子系统组成的集散型控制系统，能对全室６个钩体菌苗培养大罐进行集散型控制，该系统可在生物制品、医药、食品、发酵、化工等生产部门大力推广应用。     

彭水县2001至2002年钩端螺旋体病血清流行病学监测分析

利用显微凝集试验调查重庆市彭水县2001--2002年495名健康人群血清钩端螺旋体抗体水平．结果显示：健康人群阳性抗体率平均达到61．27％，与性别、年龄、职业有相关性；检测人群中含12群钩体血清抗体，滴度一般在1：20～1；320之间处于较低水平；阳性血清中2001年以56604拜伦型居多占阳性血清的59．8％，而在2002年以56007澳洲型居多占阳性血清的69．9％．以上结果提示彭水县人群存在钩体的隐形感染，但免疫水平低下，且可能有菌群更迭现象存在．     

钩端螺旋体病赫氏反应52例临床分析

对青霉素治疗钩端螺旋体病发生赫氏反应(JHR)52例进行了临床分析。JHR发生率在首次剂量20—80万单位间无明显差异,100万—320万单位显著增高(P<0.01);发生的时间,在首次应用青霉素后0.5—2小时以内,1—1.5小时时为高峰;首次应用青霉素时,确诊钩体病者为81.2％。本组病例,均以早期给以氢化考的松处理,96％的病例氢考用量300mg后,99.3％的病例体温在24小时内降为正常,症缓解。无一例肺弥漫性出血(PDH)发生。应用激素预防JHR及PDH,应视条件而定;JHR早期应用激素可防止PDH发生;激素用量不宜过大;首剂青霉素用量以40—80万单位为宜。     

钩端螺旋体LAg42膜蛋白基因的克隆及原核表达

分别以问号状赖型钩体017株,56601株及双曲钩体PatocI株基因组为模板,PCR扩增目的基因lag42与质粒pET32a(＋)构建重组原核表达质粒,在大肠杆菌BL21中诱导表达.结果显示不同毒力赖型钩体均能扩增出约1100 bp的片段,而PatocI株则未能扩增出目的片段;不同赖型钩体的lag42基因的同源性很高.融合表达质粒pET-lag42转化大肠杆菌BL21后,经IPTG诱导,表达出约62kDa的重组融合蛋白,用Western blotting证实其有良好的抗原性,纯化蛋白免疫新西兰大白兔,获     

致病钩端螺旋体特异消减片段的序列测定与分析

对24个已鉴定的赖型致病钩端螺旋体特异消减片段进行DNA序列测定和生物信息学分析.结果显示,片段两端皆含有AluⅠ酶切位点,片段大小为149～1506bp,平均480bp,GC含量平均为36 63%.其中6个序列无任何同源匹配序列,提示可能来自新基因;18个同源序列可分为两类:与外膜蛋白或假想蛋白相关,与生化代谢修饰相关的酶.在Genbank中登记其中20个序列,序列号分别为AF300873-AF300877,AF325807-AF325821.这些基于生物信息学的功能预测,将有助于在此基础上进行相关的基因克隆鉴定、表达分析及功能验证.     

江西地区鼠源致病性钩端螺旋体菌的分离纯化与鉴定

目的对江西地区钩端螺旋体菌进行分离纯化与鉴定,为后期建立江西地区钩端螺旋体菌的发病模型提供菌源。方法通过捕捉钩端螺旋体疫源地的储存宿主——褐家鼠,无菌操作摘取肾脏,将肾脏接种到EMJH培养基中培养、纯化菌株。对纯化后的钩端螺旋体用钩体外膜脂蛋白LipL32基因引物进行PCR检测以鉴定菌株,并对分离菌对金黄地鼠的致病性进行了研究。结果分离纯化到一株钩端螺旋体菌,PCR扩增为阳性,经核苷酸序列测定分析证实上述序列与钩端螺旋体菌FDAARGOS 2 03基因序列（Gen Bank登录号:CP020414. 2）同源性为100%。分离菌对金黄地鼠具有一定的致病性。结论我们成功从江西地区储存宿主褐家鼠肾脏中分离到一株具有致病性的钩端螺旋体菌株。本次研究为以后分离纯化钩端螺旋体菌累积了宝贵的经验,通过收集江西省内流行的钩端螺旋体菌型,为钩端螺旋体菌的发病模型提供菌源,并以此为基础,研发出可靠的临床早期诊断产品,以期达到有效控制江西省地区钩端螺旋体病的目的,降低公共卫生隐患。     

钩端螺旋体外膜脂蛋白LipL32基因的克隆和表达及其在ELISA检测中的应用

钩端螺旋体 (钩体 )病是一种全球性的人兽共患病。人类感染钩端螺旋体后表现出多种器官和系统病变 ,愈后不良 ;也可垂直传播感染胎儿 ,引起流产。动物中 ,犬钩端螺旋体的感染率较高 ,感染后 ,临床表现多样 ,大多呈隐性感染 ,不发病 ,但钩体在肾脏中长期存在 ,持续随尿液向外排菌。由于钩端螺旋体对人的强致病性 ,以及由动物传播给人引起的严重公共卫生问题 ,因此快速准确地进行钩端螺旋体病的诊断 ,显得尤为重要 ,也是目前钩端螺旋体研究中亟待解决的问题。钩端螺旋体属钩端螺旋体科 ,钩端螺旋体属问号状钩端螺旋体种的成员。目前发现血清型…     

肺出血型钩端螺旋体病的X线诊断34例报告

目的：提高对钩体病X线表现的认识。方法：回顾性分析总结34例确诊的肺出血型钩体病（其中普通肺出血型21例，弥漫肺出血型13例）的X线表现特点。结果：肺出血型钩体病的主要X线改变为两肺纹理增粗，肺纹理模糊，两肺多发点状，小片及大片状影，其分布特点是外带多，右肺多，右上肺多，即“三多”为其特征性X线征象。结论：根据上述X线表现特征，结合临床资料及实验室检查结果，可以早期确诊肺出血型钩体病。     

问号赖型钩端螺旋体的进化分析

 对问号赖型钩端螺旋体的复制基因进行了分析,引入以S为分歧时间的概念,通过对每个同义位点和非同义位点的核苷酸替代数目的比较,并利用最小二乘法进行了函数拟合,得出在早期复制基因受到相对松的净化选择,之后选择约束力不断增强并慢慢趋于稳定.     

细菌鞭毛染色制片方法的改进

本文按照细菌鞭毛标本片的染色细菌扣鞭毛结构完整、染色清晰、保存时间长的要求。比较了Ryu氏法扣饺银法。得出饺银法较好的结论。并针对饺银法。对细菌悬液的制备、培养时间的控制以及培养基的种类选择等进行实验,找到适合的鞭毛标本片制备过程以满足鞭毛标本片的染色要求。     

一种豚鼠心室肌单细胞膜片钳标本制备方法

首次报道一种改良豚鼠心室肌单细胞标本制备方法．运用此方法能获取２０％～６０％的具钙耐受性的心室肌细胞．全细胞记录显示其静息电位和动作电位时程分别为（－６９．７±３．２）ｍＶ（ｎ＝７０）和（５１５±１１６）ｍｓ（ｎ＝２５），同时能检测到多种电压敏感型离子通道电流．以上结果与国外同类报道一致     

一种大规模网络端端可靠度上下界的快速计算方法

在网络可靠性研究的基础上,针对大规模网络中精确计算端端可靠度这一难题,提出了一种快速计算大规模网络端端可靠度上下界的方法。算法分别基于最小割集和最小路径计算端端可靠度的上界和下界。最后通过算例分析,验证了本文所提出算法的有效性。     

一种新的酯酶同工酶染色方法

A new method of easter isozyme dyeimg about Leymus chinensis is introduced and some methods are compared.     

端钩型钢纤维混凝土简支梁受弯承载力试验

为改善普通钢筋混凝土梁自重大、易开裂、承载力低等缺点,在混凝土中常加入钢纤维,端钩型钢纤维,作为常见的一种高性能钢纤维得到广泛关注,国内外学者针对端钩型钢纤维混凝土的基本力学性能开展了较多研究,而对端钩型钢纤维混凝土受弯构件的正截面受力性能有待深入研究。为研究端钩型钢纤维混凝土简支梁受弯性能,制作了四根端钩型钢纤维混凝土梁及一根普通混凝土梁,对其进行受弯性能试验,根据试验得到的破坏形态、承载力、荷载-挠度曲线、荷载-应变曲线,分析端钩型钢纤维体积掺量对试件受弯承载力及破坏形态的影响。研究结果表明：端钩型钢纤维混凝土简支梁与一般混凝土简支梁受弯过程类似,均经历了弹性、开裂、带裂缝工作、破坏四个阶段;端钩型钢纤维混凝土简支梁与一般混凝土简支梁受弯过程均基本符合“平截面假定”;端钩型钢纤维限制了裂缝的产生和发展,使得纤维混凝土梁变形能力增强;与一般混凝土梁相比,端钩型钢纤维混凝土梁抗裂性及极限承载力得到提高,且构件承载力与钢纤维体积掺量基本呈现正相关;基于试验数据,对现行规范中开裂弯矩及极限承载力计算公式进行优化,开裂弯矩方面考虑对截面抵抗矩塑性影响系数进行修正,极限承载力方面引入纤维混凝土正截面承载力影响系数ζ,经修正计算值可较好吻合试验值。