Streptomyces alboflavus抗真菌物质对串珠镰刀菌的抑制机理研究

研究了Streptomyces alboflavus产生的抗真菌物质对串珠镰刀菌的抑菌机理。通过pH纸层析和捷克八溶剂纸层析实验对抗菌物质进行定性分析;利用荧光显微镜和扫描电子显微镜观察抗菌物质对串珠镰刀菌细胞膜和细胞壁的破坏作用;通过细胞膜和细胞壁主要组分对抑菌物质的拮抗效果,探索抑菌物质的作用靶点;用高效液相色谱法检测抑菌物质对串珠镰刀菌细胞膜中麦角甾醇的抑制作用。极性实验显示,该物质呈中性,捷克八溶剂纸层析表明,该物质属于非水溶性Ⅰ型抗生素;光学显微镜观察,抑菌物质对串珠镰刀菌孢子萌发有抑制作用,同时使菌丝畸形,顶端、中部出现膨大泡囊,呈“念珠状”;经PI染色后荧光显微镜观察,抗菌物质作用后的菌丝细胞膜通透性改变,进一步通过扫描电子显微镜观察,发现泡囊状菌丝表面凹凸不平,并残留有碎片;抑菌物质对细胞壁和细胞膜的组分拮抗作用和高效液相色谱方法检测显示,抑菌物质影响细胞膜中麦角甾醇的合成。研究结果表明,Streptomyces alboflavus产生的抗真菌物质发挥抑菌作用时,影响串珠镰刀菌细胞膜中麦角甾醇的合成。本研究可为抑菌物质的鉴定和拮抗菌的应用提供理论参考。     

致病性尖孢镰刀菌生物防治研究进展

致病性尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)侵染引起的植物枯萎病是种世界性的土传真菌病害之一,生物防治是解决植物枯萎病的一条理想途径.对致病性尖孢镰刀菌生物防治的研究现状及其生防因子种类和应用情况做了综述.并分析了生物防治中存在的问题,同时对今后的研究工作提出了展望.     

鱼类镰刀菌的研究 Ⅱ棉腐镰刀菌Fu_2和弯角镰刀菌尖F_1对鱼苗毒害的初步研究

本文报道棉腐镰刀菌Ｆｕ２和弯角镰刀菌尖Ｆ１接种于已灭菌的玉米碎培养基中,在一定温度条件下培养２８ｄ后,从培养物中提取获得毒素粗提物．进行豌豆萌发抑制试验,家兔皮肤反应试验,对大口黑鲈、百花鲫和海鲤鱼苗的毒性试验,均表明Ｆｕ２和尖Ｆ１玉米碎培养物是含有一定的毒性物质．但气相色谱———质谱联用鉴测,尚未发现Ｆｕ２和尖Ｆ１玉米碎培养物中含有９种常见的单端孢霉烯族毒素．     

Ⅱ棉腐镰刀菌Fu2和弯角镰刀菌尖F1对鱼苗毒害的初步研究

本文报道棉腐镰刀菌Ｆｕ２和弯角镰刀菌尖Ｆ１接种于已灭菌的玉米碎培养基中,在一定温度条件下培养２８ｄ后,从培养物中提取获得毒素粗提物。进行豌豆萌发抑制试验,家兔皮肤反应试验,对大口黑鲈、百花鲫和海鲤鱼苗的毒性试验,均表明Ｆｕ２和尖Ｆ１玉米碎培养物是含有一定的毒性物质,但气相色谱－质谱联合监测,尚未发现Ｆｕ２和尖Ｆ１玉米碎培养物中含有９种常见的单端孢霉烯族毒素。     

影响空心莲子草镰刀菌生长发育的几个重要因子分析

在原有试验发现空心莲子镰刀菌草生长产孢对光照、通气及淹水与否不敏感的基础上,该研究进一步测定营养培养基、温度和酸碱度因子对空心莲子草镰刀菌生长发育的影响.研究结果表明,这3个因子对此真菌菌落生长、分生孢子产生和萌发都有极显著的作用,所以认为它们是影响真菌生长发育的关键因子.真菌菌落生长和产孢的温度范围为15℃～30℃,在25℃时生长最快而产孢最多;分生孢子萌发的适温范围是20℃～35℃,在30℃时萌发率显著高于其它温度处理.对6种培养基的测定结果显示,真菌在马铃薯葡萄糖培养基(PDA)、胡萝卜培养基(CAA)、空心莲子草根茎煎汁培养基(ARS)和空心莲子草叶片煎汁培养基(ALA)上都能够正常生长、产孢和萌发,而在清水洋菜培养基(WA)上不能生长发育,但是马铃薯蔗糖琼脂(PSA)是该真菌的最佳培养基.菌落生长和产孢的适宜酸碱度范围是pH 4.5～pH 11.0,最适约为pH 7.0,在pH 4.0和pH 12.0时生长和产孢都明显减缓;分生孢子萌发适宜的酸碱度范围为pH 4.0～pH 9.0,在pH 10.0～pH 12.0范围内孢子不能萌发.由此可见,在25℃和pH 7.0条件下使用PSA,是空心莲子草镰刀菌的最佳培养条件.     

伏马菌素的毒害及脱毒防控技术的研究进展

伏马菌素是由玉米串珠镰刀菌产生的一组有毒害和致癌性的真菌毒素。伏马菌素FBl能引起动物各种疾病,如马脑白质软化症和猪肺水肿,严重威胁动物的健康,影响畜牧业的发展。对于已经被伏马菌素污染的粮食作物,人们采取了物理、化学和生物的方法对其进行脱毒研究。本文报道了伏马菌素的毒害及其脱毒防控技术的最新研究进展。     

真菌毒素腐马素对健康的影响及其生物合成机理

腐马素是农业和食品工业中最重要的真菌毒素之一.它由包含广泛地侵染玉米和玉米制品的串珠镰刀菌在内的几种真菌产生.腐马素能引起牲畜的多种致命疾病，并可能导致人类患食管癌.腐马素生物合成和作用方式的分子机理是一个新兴的研究领域，由于其在农业生产、食品安全和公共卫生等方面的重要性，近年来引起人们广泛的关注，并取得一些进展.文中主要介绍了这一领域的研究进展，讨论了目前腐马素诱导的胞内效应的分子基础，以及与腐马素生物合成相关的基因和酶的鉴定，并对这些研究在控制玉米食品的腐马素污染中的应用前景进行了展望.     

崇明水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)盆栽褐枯病病原的鉴定

依据柯赫氏法则对崇明水仙盆栽中叶褐枯病病原菌进行分离,得到3个可造成鳞茎和叶不同程度腐烂的致病真菌菌株.应用形态学鉴定法和真菌rDNA-ITS序列分析及ISSR分子标记技术进行鉴定,结果1株为丛赤壳属的丛赤壳菌(Nectria gliocladioides),2株为镰刀菌属的串珠镰刀菌胶胞变种(Fusarium moniliforme var.subglutinans).其中Nectria gliocladioides为引起崇明水仙盆栽枯萎病的主要病原真菌,该菌的最适生长温度为25℃,低于5℃和高于40℃菌丝均不能生长.研究结果证实ISSR技术可用于区分菌株间的种属差异,可作为病原真菌鉴定的分子辅助手段.     

不同寄主尖孢镰刀菌同工酶异质性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了来自不同寄主枯萎病原菌尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST).结果表明,过氧化物酶同工酶共有3条主酶带,其迁移率分别为:Rf=0.08,Rf=0.20和Rf=0.4.但不同寄主的尖孢镰刀菌POD同工酶存在着明显的差别,来源于花生的尖孢镰刀菌只有2条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20和Rf=0.08;来源于甜瓜的尖孢镰刀菌只有1条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20;来源于不同寄主的镰刀菌的EST同工酶谱之间也存在着较大的差别.来源于黄瓜、甜瓜和西瓜的镰刀菌的EST酶谱较为相似,都具有Rf=0.018,Rf=0.114和Rf=1.000的3条酶带,其它寄主来源的镰刀菌的EST酶谱间互相则存在着很大的差别.但这些菌株基本上都存在着Rf为0.018和1.000的2条酯酶同工酶酶带.     

肠膜明串珠菌CICC-21725产右旋糖酐的发酵动力学

研究肠膜明串珠菌CICC-21725发酵产右旋糖酐过程。根据菌体生长量、蔗糖浓度和右旋糖酐产率与发酵时间的关系,采用Logistic Law方程和Luedeking-Piret方程,建立肠膜明串珠菌CICC-21725菌体生长动力学模型、产物合成动力学模型和底物消耗动力学模型。运用Matlab 7.0软件对实验数据拟合,获得模型参数。用红外光谱和核磁氢谱、碳谱对菌体发酵产物进行结构表征。结果表明:所建立的动力学模型的预测值与实验值吻合较好,拟合模型的相关系数分别为0.994 2、0.996 9和0.991 2,模型能较好的预测肠膜明串珠菌CICC-21725发酵产右旋糖酐的动力学过程。肠膜明串珠菌CICC-21725发酵过程中右旋糖酐的合成属于生长偶联型。红外光谱及核磁共振光谱结果表明肠膜明串珠菌的发酵产物是由为α-(1,6)糖苷键连接的直链α型右旋糖酐。     

基于全基因组序列的尖孢镰刀菌分泌蛋白预测及其特征分析

尖孢镰刀菌是一种以土壤习居为主要特征的植物病原菌,广泛分布于世界各地,且寄主广泛,能引起豆科、茄科、葫芦科等科100多种植物根腐、茎腐、茎基腐等病害,严重时造成植株萎蔫死亡,严重影响着植物的产量和品质.同时,目前生产上对于该菌的防治多使用甲霜灵·锰锌、多菌灵、百菌清等化学药剂,然而,防治效果不佳,急需开发针对该菌新的作用靶标的药剂.前人已经明确植物病原真菌分泌蛋白在侵染、操控植物等过程中发挥着重要功能,然而,学术界尚未见有关该菌中分泌蛋白的报道.本研究以尖孢镰刀菌菌株(Fusarium oxysporumf.sp.lycopersici 4287)的蛋白序列为基础数据,以分泌蛋白所具有的N-端含有信号肽、不含有跨膜结构域、没有GPI锚定位点、将蛋白分泌在胞外4大特征为依据,利用生物信息学在线分析程序明确该菌中含有778个分泌蛋白,并对上述蛋白开展特征分析,明确上述蛋白的氨基酸长度主要集中在101～400aa、氨基酸组成中以G,T,S,A较多,信号肽长度主要集中在16～21aa、信号肽氨基酸组成中以P,S,A,T,G较多,信号肽切割位点为T-X-T类型.为今后进一步开展尖孢镰刀菌的分泌蛋白功能解析和开发新型药剂靶标提供了重要的理论基础.     

尖孢镰刀菌对人参皂苷的动态响应机制

研究尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）与人参根部中皂苷质量比的关系, 为确定人参根部接种尖孢镰刀菌对人参皂苷质量比的影响, 利用高效液相色谱（HPLC）法监测3种人参皂苷Rb1,Re,Rg1的质量比在接种尖孢镰刀菌120 h内的变化. 结果表明： 尖孢镰刀菌侵染后, 人参皂苷Rb1的质量比升高, Re,Rg1的质量比未发生显著改变;人参皂苷Rb1对尖孢镰刀菌分生孢子有明显抑制作用, Rb1的质量浓度越大, 萌发率越低, 抑制率越高, Rg1和Re对尖孢镰刀菌孢子萌发几乎无抑制作用. 因此, Rb1可能是人参根部对抗尖孢镰刀菌产生的抗病化合物.     

莜麦Permatin蛋白的重组表达及抗尖孢镰刀菌活性分析

病程相关蛋白(Pathogenesis related proteins,PRPs)是植物在受到病原菌侵染或者非生物胁迫时大量分泌的一种参与协同防御的蛋白。将莜麦病程相关蛋白permatin基因克隆到原核表达载体pET32L,构建pET32Lpermatin重组子,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株表达,经Heparin Sepharose fast flow离子柱、Sephacryl S-200凝胶柱纯化获得分子量大小为82kDa的电泳纯的NusA-Permatin。通过滤纸片法及荧光显微镜分析重组蛋白对尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的影响,结果表明:Permatin能够显著抑制F.oxysporum菌丝生长,导致F.oxysporum菌丝体形态异常。此外,DCFH-DA荧光探针检测显示,Permatin蛋白作用尖孢镰刀菌的初期引起菌丝体活性氧含量的升高。这些结果表明Permatin蛋白不仅能抑制尖孢镰刀菌生长,还能引起菌体形态变化和细胞体内活性氧水平的升高。     

玉米浆对肠膜状明串珠菌菌株成链和右旋糖酐产量的影响

通过在培养基中分别添加不同量的玉米浆和芳香族氨基酸,经显微观察肠膜状明串珠菌的成链情况及测定右旋糖酐产量,发现培养基中玉米浆和芳香族氨基酸的添加量直接影响着肠膜状明串珠菌菌体的形态和右旋糖酐产量.研究表明玉米浆中所含的芳香族氨基酸是影响肠膜状明串珠菌在生长过程中出现链状和提高右旋糖酐产量的因素之一.     

燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂研制及对野燕麦的防除效果

为了研制对野燕麦具有防除效果的燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂,通过对载体和助剂的筛选以及采用正交试验,确定出燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂最优配方,并进行质量指标检测和田间试验。结果表明:燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂最佳载体为硅藻土,最佳润湿剂为十二烷基硫酸钠,最佳分散剂为二甲基亚苯磺酸钠,最佳紫外保护剂为黄原胶,这4种物质与燕麦镰刀菌GD-2具有较高的生物相容性。正交试验确定燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂最优配比为硅藻土∶十二烷基硫酸钠∶二甲基亚苯磺酸钠∶黄原胶=50∶2∶5∶0. 7。通过制备获得的5. 8×108个/g燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂达到了国家质量标准。进一步田间试验结果表明,燕麦镰刀菌GD-2可湿性粉剂对野燕麦的株高抑制率和鲜重防效分别达56. 9%和73. 3%,具有防除野燕麦的良好效果。本研究结果为将燕麦镰刀菌GD-2开发成防除野燕麦的微生物除草剂奠定了基础。     

固定化肠膜状明串珠菌生产右旋糖酐的研究

以聚乙烯醇(PVA)为载体固定化肠膜状明串珠菌Lm(Leuconostcmesentercides)1226,对固定化Lm1226菌的产右旋糖酐性能进行了研究.结果发现固定化Lm1226菌较传统Lm1226菌发酵生产右旋糖酐具有发酵周期短、产酐率高、可连续生产的特点.为降低右旋糖酐生产成本,实现右旋糖酐原料药的连续化生产提供了可能.     

水杨酸和镰刀菌酸对棉花 POD 和 PAL 的影响

比较了水杨酸和镰刀菌酸对棉花植株和棉花组织培养细胞中的过氧化物酶和苯丙氨酸解氨酶的影响,用镰刀菌酸和水杨酸分别处理棉花离体叶片,过氧化物酶与苯丙氨酸解氨酶的活性都提高,但是过氧化物酶同工酶不同．用水杨酸预处理棉花叶片可抑制镰刀菌酸的诱导作用．     

不同杀菌剂对棉花尖孢镰刀菌的室内毒力测定

采用生长速率法在室内测定了6种杀菌剂对棉花尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)的毒力作用.结果表明,受试的6个杀菌剂对棉花尖孢镰刀菌菌丝生长均有一定的抑制作用.其中扑海因对尖孢镰刀菌的抑菌效果最好,EC50为0.043 ppm,多菌灵EC50为0.057 ppm.2种药剂的相关系数均在0.98以上,药剂浓...     

枯萎病尖孢镰刀菌的RAPD-PCR多态性分析

利用随机扩增多态性DNA(RAPD PCR),对采自我省不同地区、不同寄主和同一寄主不同植株的瓜类枯萎病原菌尖孢镰刀菌进行遗传多样性分析,筛选到6个多态性随机引物,共产生了72条RAPD带,其中86.11%具有多态性;通过聚类分析,将供试菌株分为4个RAPD组,确定了菌株间的亲缘关系,为瓜类枯萎病原菌尖孢镰刀菌的分类提供有利的分子证据.     

AtEDR3介导拟南芥对小麦禾谷镰刀菌的作用

目前已经建立了禾谷镰刀菌侵染模式植物拟南芥分析系统,本研究采用禾谷镰刀菌-拟南芥的相互作用作为模型来研究植物如何防御禾谷镰刀菌的侵染机制,以拟南芥突变体edr3为基本材料来研究植物应对禾谷镰刀菌的防御反应,结果表明:edr3可以加强拟南芥对禾谷镰刀菌的感病性,并且通过对双突变体edr3/ein2、edr3/coi1、edr3/sid2、edr3/pad4抗性检测表明edr3的感病性从而证实EDR3在拟南芥对禾谷镰刀菌抗性中起正调控作用,依赖ET/JA途径,而不依赖SA途径。EDR3介导的致病机理的研究也将为在农业生产方面的应用提供新的线索。