蘑菇病原菌—疣孢霉的研究综述

在菌落、孢子特征两方面综述了蘑菇病原菌－疣孢霉的形态特征；总结了疣孢霉的生理研究状况；阐述了疣孢霉的可能致病机理；介绍了防治疣孢霉的方法。     

双孢蘑菇疣孢霉的分离鉴定及其杀菌剂的筛选

从四川崇州双孢蘑菇疣孢霉受灾严重地区分离到一株致病菌,通过其纯培养特征、微观形态特征及回复感染验证确定该致病菌为疣孢霉(Mycogone sp.).经过初筛、复筛从21种杀菌剂中筛选出对该株疣孢霉生长抑制效果较好的6种,测定两两复配对疣孢霉和双孢蘑菇菌丝生长的影响.结果表明杀菌剂复配使用比单一杀菌剂效果更好,实验确定了两个较好的复配组合:果鲜灵(100000倍稀释) 甲醛(40000倍稀释),施宝功(100000倍稀释) 洁霉精(20000倍稀释).它们对疣孢霉的生长抑制率均达到了100%,而对双孢蘑菇菌丝的生长几乎没有影响.     

一株抑制拟南芥生长的真菌的鉴定

报道了一种在拟南芥种植介质泥炭土上滋生且明显抑制拟南芥(Arabidopsis thaliana)生长的黄褐色霉状真菌;并通过形态特征观察,将该菌初步鉴定为黄色疣枝孢菌(Chromelosporium fulvum);进一步通过r DNA的ITS序列测序和比对分析,将其鉴定为黄色疣枝孢菌.该真菌种是广东省新记录种,且该菌抑制拟南芥的生长未见报道.     

以培养和非培养技术研究文昌红树林土壤中疣孢菌的多样性

目的:以培养和非培养的方法研究文昌红树林土壤中疣孢菌的生物多样性.方法:通过疣孢菌特异性PCR和克隆文库的方法对样品中非培养的疣孢菌进行生物多样性分析;用九种选择性培养基对样品中可培养的疣孢菌进行生物多样性分析.结果:非培养方法发现文昌红树林土壤放线菌的多样性指数Shanno-Wiener index和Chao1物种多样性指数(Schao1)分别为2.3217和74.5;培养方法分别获得3株疣孢菌和74株疣孢菌类似菌.结论:文昌红树林土壤环境中蕴藏着丰富的疣孢菌多样性资源,其中大部分为目前未培养菌.     

深黄被孢霉Δ12-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达载体的构建

 深黄被孢霉是国内研究生产γ-亚麻酸(γ-linolenic acid,GLA)和花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)等多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acid,PUFA)的主要产油丝状真菌.前期的实验结果表明,深黄被孢霉M6-22具有潮霉素抗性,而且目前也没有关于深黄被孢霉营养缺陷型菌株的报道,限制了一些基于深黄被孢霉菌株进行遗传操作的研究.研究以红色荧光蛋白DsRED基因作为报告基因,构建能同时用于丝状真菌外源基因和RNAi表达载体pS-DsRED.通过PEG/CaCl₂原生质体转化法将pS-DsRED导入深黄被孢霉M6-22中进行表达,成功获得产粉红色的阳性菌落,并在此基础上构建了深黄被孢霉Δ¹²-脂肪酸脱氢酶基因RNAi表达质粒pSREDMID12RNAi,为下一步目的基因的敲除和基因功能分析奠定了基础.     

巨孢球囊霉的富集培养研究

以玉米、三叶草为寄主植物,不同比例的土沙混合物(1∶1;3∶2;3∶1)为培养基质分别接种2种巨孢球囊霉真菌孢子,富集培养100 d后取样调查.结果表明,玉米和三叶草都能与珠状巨孢球囊霉和玫瑰红巨孢球囊霉共生形成丛枝菌根,锥虫蓝染色菌根显微结构清晰;菌根侵染率三叶草高于玉米;不同寄主植物和培养基质对AM真菌富集培养产孢的影响有明显差异.以三叶草为寄主,土沙比为1∶1时,玫瑰红巨孢球囊霉产孢率最高,达211个/100 g基质.     

河北省丝孢菌研究Ⅴ.节簇孢属、小枝双孢属和斯佩霉属

本文报道了作者近年来采自河北省的丝孢菌纲的3个国内新记录种,它们分别是节簇孢属(Gonatobotrys Cda)的简单节簇孢(G.simplex Cda),小枝双孢属(Diplocladiella Arnaud apud M.B.Ellis)的拟梯孢小枝双孢(D.scalarioides Arnaud apud M.B.Ellis)和斯佩霉属(Spegazzinia Sacc.)的四方斯佩霉(S.tessarthra(Berk.& Curt.)Sacc.)。节簇孢属和斯佩霉属系国内新纪录属,小枝双孢属在中国大陆首次报道。     

神农架林区和自然保护区链霉菌属中的一个新种

从神农架林区和自然保护区土壤样品中分离到菌株Ｉ６４３，对其形态特征，培养特征，生理生化特性进行了研究，经与已知的种比较，定为新种，命名为疣孢链霉菌。     

丛枝菌根真菌的增殖技术比较分析

以三叶草作宿主植物,采用单孢接种和多孢接种．接种摩西球囊霉、地表球囊霉、地球囊霉、缩球囊霉和网状球囊霉,在土培、沙培和液培3种条件下进行增殖．收获后分别测定丛枝着生率、泡囊的数量和产孢量等重要的生产指标．研究结果表明,土培法、沙培法、液培法都可用来生产接种剂．但生产效果存在显著差异．所测定的各个指标在液培条件下都较高．沙培法次之,土培法最低．参试的5个菌种都对三叶草表现出亲和性．其中摩西球囊霉和地表球囊霉各项指标都较高．适于生产菌剂;多孢接种较单孢接种具有显著的数量优势．单孢接种可用于菌种纯化．     

巨孢球囊霉（Gigarspora）富集培养研究

以玉米、三叶草为寄主植物,不同比例的土沙混合物(1:1;3:2;3:1)为培养基质分别接种2种巨孢球囊霉真菌孢子。富集培养100d后取样调查。结果表明：玉米和三叶草都能与珠状巨孢球囊霉和玫瑰红巨孢球囊霉建立共生关系形成丛枝菌根,经锥虫蓝染色后菌根显微结构清晰。但三叶草菌根侵染率高于玉米的侵染率。不同的寄主植物和不同的培养基质对AM真菌富集培养产孢的影响有明显的差异。以三叶草为寄主,土沙比为1：1时,玫瑰红巨孢球囊霉产孢数量最高,约211个孢子/100g基质。这在国内是首次报道。     

酵母菌最适生长条件和自溶条件研究

采用正交实验设计,研究了酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合培养的最适条件和菌体的自溶作 用,得到了最佳的条件组合.实验结果表明,酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合培养的最适条件为: 1.5％豆饼,2％玉米粉,28℃,pH 5.0,0.2％酵母膏;酿酒酵母和扣囊拟内孢霉混合菌体的自溶条 件为:pH 5.0醋酸-醋酸钠缓冲液,55℃,0.5％NaCl.     

河南省小麦穗霉真菌的检测

为了调查河南省小麦穗霉的物种多样性,采集了该省18个地级市共计250余份小麦穗腐标本,经过组织分离、纯化,共得到256株真菌分离物.经鉴定表明,河南省小麦穗霉具有丰富的多样性.对于分离频率较高(1%)的分离物,结合形态特征和分子生物学特征,鉴定出5个属10个种,包括镰刀菌(Fusarium graminearum,Fusarium pseudograminearum,Fusarium equiseti,Fusarium proliferatum和Fusarium verticillioides)、链格孢(Alternaria alternate)、粉红聚端孢(Trichothecium roseum)、毛壳(Chaetomium funicolum,Chaetomium globosum)和麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana).对于分离频率较低(1%)的属,通过ITS测序分析鉴定出8个属,包括雪球微座孢(Microdochium sp.)、暗球腔菌(Phaeosphaeria sp.)、团网菌(Arcyria sp.)、茎点霉(Phoma sp.)、木霉(Trichoderma sp.)、附球菌(Epicoccum sp.)、黑孢(Nigrospora sp.)和枝孢(Cladosporium sp.).链格孢(A.alternate)和禾谷镰刀菌(F.graminearum)的分离频率分别占42.2%和29.7%,地区检出率分别为88.9%和83.3%,是河南省小麦穗霉的优势菌群.     

蝴蝶兰根腐病及根际真菌的种类鉴定

2010 -2011年从福建省蝴蝶兰腐烂根部及周围介质中分离鉴定出8个属12种真菌,分别为:立枯丝核菌Rhizoctonia solani、茄病镰孢Fusarium solani、尖孢镰孢F.oxysporum、禾谷镰孢F.graminearum、康氏木霉Trichderma koningii:、长枝木霉T.longibrachiatum、哈茨木霉T.harzianum、盘多毛孢Pestalotia sp.、多主枝孢霉Cladosporium,herbarum、常现青霉Penicillium frequentans、拟青霉Penicilomyces sp.和匍枝根霉Rhizopus stolonifer.立枯丝核菌、茄病镰孢和尖孢镰孢为优势菌,分别占分离物总株数的26.19%、15.71%和10.95%.伤口接种实验表明,3种优势真菌均能侵染蝴蝶兰根系引起腐烂.     

生防菌对黄瓜枯萎病防效及其对黄瓜诱导抗性测定

为确定生防菌对黄瓜枯萎病的防效及其对黄瓜诱导抗性,采用生物测定方法,测定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)菌剂、粉红粘帚霉(Gliocladium roseum)菌剂、棘孢木霉(Trichodema asperellum)及嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)对黄瓜枯萎病的防治效果及黄瓜叶片几种防御酶活性的影响。结果表明:经棘孢木霉菌对黄瓜枯萎病的防治效果达到70.24%。生防菌剂处理后的黄瓜叶片中4种防御酶的活性变化呈现一定的规律:经粉红粘帚霉、枯草芽孢杆菌和棘孢木霉处理的黄瓜叶片POD活性是空白对照的1.26倍、1.11倍和1.40倍;经嗜麦芽寡养单胞菌和棘孢木霉处理的黄瓜叶片SOD活性分别是空白对照的3.92倍和2.66倍;经粉红粘帚霉、枯草芽孢杆菌、棘孢木霉和嗜麦芽寡养单胞菌4种生防菌处理的黄瓜叶片PAL活性分别仅为空白对照处理的43.01%,69.11%,33.81%,34.70%;经枯草芽孢杆菌、粉红粘帚霉、棘孢木霉和嗜麦芽寡养单胞菌4种生防菌处理的黄瓜叶片CAT活性分别是空白对照的1.04倍、1.88倍、1.07倍和1.07倍。说明黄瓜经生防菌诱导处理后的一部分防御酶活性会升高。     

郁金正己烷萃取物的抑杀真菌活性与成分分析

以95%乙醇提取郁金制得的浸膏经正己烷萃取后得郁金萃取物,研究其对植物病原真菌的抑菌活性,并初步分析其作用机理与化学组分.研究结果表明其药基浓度为1.0 mg/mL的郁金正己烷萃取物对油菜菌核菌、苍白青霉、疣孢霉、轮枝孢霉等都具有较强的的抑菌效果.药基浓度为0.5 mg/mL的郁金正己烷萃取物作用后的油菜菌核菌,经透射电镜观察发现,细胞内线粒体出现严重肿胀,嵴大面积断裂,部分细胞壁缺失.郁金正己烷萃取物的GC-MS分析结果显示其所含成分108种,含量较高的为土青木香烯（23.91%）,其次是1,2-去氢睾     

三种真菌对洋地黄毒苷的生物转化特性研究

考察了新月弯孢霉(Curvularia lunata)AS3.3589、蓝色犁头霉(Absidia coerulea)CICC40302和雷斯青霉(Penicillium raistrickii)ATCC10490对洋地黄毒苷的生物转化特性.结果表明:新月弯孢霉AS3.3589转化洋地黄毒苷得到2个产物,即产物Ⅰ和产物Ⅱ,产物Ⅰ的转化率为27%,产物Ⅱ的转化率为5%;蓝色犁头霉CICC40302转化洋地黄毒苷得到1个产物,即产物Ⅲ,转化率为6%;雷斯青霉ATCC10490对洋地黄毒苷不发生转化反应.通过优化新月弯孢霉KA-91生物转化反应的工艺条件,使转化产物Ⅰ的转化率达到38%,产物Ⅱ的转化率达到10%.     

耐盐深绿木霉TW320和拟康宁木霉TW1876生长和产孢条件优化

为优化两株耐盐木霉-深绿木霉(Trichoderma atroviride)TW320和拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)TW1876的生长和产孢条件,研究了不同pH、不同培养基,不同碳源、氮源和不同碳氮比对两株木霉菌的菌落生长和孢子产量的影响。结果显示:耐盐深绿木霉(T. atroviride)TW320在 pH =4~11 的马铃薯葡萄糖琼脂 (potato dextrose agar, PDA)培养基上均可生长和产孢,且菌丝生长和产孢的最佳pH为5,在大豆玉米粉培养基上生长速度较快,产孢量最多,该菌株菌丝生长和产孢的最佳碳源为木糖,最佳氮源是酵母膏,当碳氮比为12:1时,最有利于TW320产孢;拟康宁木霉(T. koningiopsis)TW1876菌丝生长和产孢的最佳pH为11,最优培养基为PDA培养基,以乳糖作为最佳碳源,甘氨酸作为最佳氮源,且碳氮比为9:1时,TW1876产孢量最多。     

木霉菌对3种蔬菜病原菌的拮抗作用

测定了11种木霉对黄瓜枯萎尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜黑星病瓜疮痂枝孢霉(Cladospori-um cucumerinum)和番茄叶霉病褐孢霉(Fulvia fulva)的拮抗作用,筛选出1株M6粘绿木霉对3种病菌均有较强拮抗作用,而且对黄瓜枯萎病的室内盆栽防效可达65.66%。与此同时还观察到多数木霉生长速度快、生长繁茂,快速覆盖病原菌的菌落,竞争作用、抗生作用和重寄生作用是其主要作用机制。     

用Biolog-FF解析木霉制剂对番茄根际土壤微生物的影响

将木霉制剂作用于番茄根际土壤微生物,利用Biolog技术检测分析了FF微平板中95种碳源的利用程度,并根据24-192 h单孔平均颜色变化率（AWCD）,分析了木霉菌对土壤微生物生理活性的影响,同时鉴定了供试土壤中的真菌种类.结果表明,木霉制剂可在番茄根际土壤中定置并生长繁殖,能有效抑制土壤中病原真菌（厚孢镰刀霉厚孢变种Fusariumchlamydosporum var. chlamydosporum,球孢枝孢霉Cladosporiumsphaerospermum,葡萄状单隔霉Ulocladiumbotrytis）的生长,降低土壤中有害生物的生理活性,改变土壤微生物循环,从而达到防治番茄土传病害的目的.     

野生油茶根围土壤的AM真菌多样性调查

为探明野生油茶根围土壤AM真菌的种类组成与多样性。对野生油茶根围土壤AM真菌进行分离与形态学鉴定,同时提取土壤DNA,进行高通量测序,通过形态学鉴定出3属6种AM真菌,分别为台湾硬囊霉、悬钩子硬囊霉、黄孢球囊霉、长孢球囊霉、蜜色无梗囊霉和柯氏无梗囊霉;通过高通量测序鉴定出球囊霉属、原囊霉属、近明囊霉属等6属42种AM真菌,其中有36个VT种; VTX00166和球囊霉属分别为野生油茶根围土壤AM真菌的优势种和优势属;与形态学鉴定相比,高通量测序能检测出更多的AM真菌种类。