乙酰短杆菌酶法合成5—甲基尿苷

用乙酰短杆菌完整细胞为酶源,以鸟苷和胸腺嘧啶为底物,酶法合成５－甲基尿苷。最佳反应条件为：底物浓度１００－２００ｍｍｏｌ／Ｌ,ｐＨ８．０,磷酸盐缓冲液尝试１０－５０ｍｍｏｌ／Ｌ,６０℃,摇床转速１２０ｒ／ｍｉｎ,反应１ｈ即达到平衡,５－甲基尿苷转化率达６０％以上。     

硼酸基亲和层析纯化5-甲基尿苷

利用聚乙烯系大孔聚合物与间氨基苯硼酸偶联制备亲和介质，配基密度为每克湿胶0．92mmol。最佳吸附条件为pH9．0和2．0mol/LNaCl；最佳洗脱条件为0．1mol/LHCl。测定了吸附等温线，算得解离常数Kd为0．155mol/L，最大吸附量qm为每克湿胶78．8mg。将含有胸腺嘧啶的5－甲基尿苷溶液进行亲和层析，5－甲基尿苷收率为56．3％。     

麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质

从麦芽根中提取5′－磷酸二酯酶，酶活可达474U／mL。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸，得到5′－CMP、UMP、GMP、AMP4种单核苷酸。最佳反应条件为：底物RNA浓度为0.01g/mL，每毫升底物的酶用量为30U，酶解温度70℃，pH7.0，时间2h,5′－核苷酸转化率达80％。     

5─Br─DMPAP分光光度法测定微量铑

用5－Br－DMPAP作显色剂，表面活性剂CTMAB作增溶剂，采用分光光度法测定微量锗。结果表明：方法的线性范围为：2．5～25．0μg／25mL，表现摩尔吸光系数为7．97×104L．cm－1．mol-1，变异系数为3．5％，回收率为99．6％。     

重组巴斯德毕赤酵母高密度培养中铵离子浓度的影响

采用Mut^s表型的重组毕赤酵母生产血管生长抑制素,表达阶段流加甘油—甲醇混合碳源以提高菌体密度和血管生长抑制素的表达水平,菌体密度可达174g／L,约是表达阶段采用甲醇为单一碳源的发酵过程的3倍。菌体密度的提高导致表达阶段发酵液中铵离子浓度下降很快,当发酵液中的铵离子浓度低至40mmol／L时,影响了血管生长抑制素的表达。改变pH调节方式并在发酵后期添加25mmol／L(NH4)2SO4使发酵液中铵离子浓度维持在150mmol／L以上,血管生长抑制素的表达产量达到108mg／L。     

离子对反相高效液相色谱法考察糖浆口服液中核黄素—5—磷酸钠稳定性

建立了离子对反相高效液相色谱分析方法考察复方制剂诺平糖浆口服液的稳定性。以核黄素-5-磷酸钠为指标组分,采用Hypersil C18色谱柱,流动相为：0．01：mol／L K2HPO4(含50mmol／L PIC-B7)：乙腈(90：10),检测波长为254nm,流速：1．0mL／min。结果表明,核黄素-5-磷酸钠在8．0～320μg／mL范围内呈良好的线性,降解产物不干扰测定;方法准确、灵敏、操作简单、重现性好,可对复方制剂中核黄素-5-磷酸钠的降解产物进行有效监控。     

用固定化啤酒酵母细胞合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱

κ－卡拉胶－魔芋多糖复配胶包埋的啤酒酵母细胞，经冻融处理后用于合成胞嘧啶核苷二磷酸胆碱（CDP－胆碱）。结果表明：250mL摇瓶中加入50mL反应液（葡萄糖400mol/L，CMP10mmol/L，磷酸碍碱50mmol/L,K2HPO4-KH2PO4缓冲液100mmol/L，MgSO410mmol/L,pH=8.0），固定化细胞1200g/L,34℃、150r/min下，反应4h后补加400mmol/L葡萄糖，反应8h可使60％以上的CMP转化为CDP－胆碱。反应液经灭菌和添加辅酶I（NAD^ ）后，固定化细胞可连续使用4次，CDP－胆碱转化率维持在40％以上。     

司他夫定的合成

报道了以四乙酰核糖和胸腺嘧啶为起始原料，经中间体5－甲基尿苷的抗艾滋病药物司他夫定的合成工艺。四乙酰核糖与三甲硅保护的胸腺嘧啶缩合、醇解得到中间体5－甲基尿苷（4），5－甲基尿苷甲磺酰化、环化、溴代后得到2'－溴－3'－甲磺酸酯（7），再经还原消除，去保护得到最终产物司他夫定（9）。总收率46．4％。     

新试剂DCOBA8Q5S与Al的荧光性能的研制和应用

本文研究了新试剂7－（2，4）－二羧甲氧基－5－羧基苯（偶氮）－8－羟基喹啉－5－磺酸与Al^3+的配合反应，结果表明，试剂在HAL／NaAC缓液体系中与Ll^3+形成荧光配合物。最大激发峰512nm最大荧光发射峰波长为570nm，络合物组成比为R：AL＝2：1，铝离子含量在0－1ug/25mL时符合比尔定律。本文拟用该方法对茶叶样中含量进行测定，结果令人满意，检测下限为5．04&;#215;10^-6g/L。     

铜(Ⅱ)-2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚络合物吸附波的研究

在pH8．3的NH3－NH4Cl介质中,KSCN存在下铜（Ⅱ）与2－（5－溴－2－吡啶偶氮）－5－二乙氮基酚（5－Br－PADAP）生成络合物,在线性扫描示波极谱仪上于－0．35V（vs．SCE）出现一络合物吸附波。二阶导数峰高与铜（Ⅱ）浓度在7．81×10－9～8．00×10－6mol／L范围内里线性关系,检出限为3．13×10－9mol／L。用多种电化学方法研究了极谱波的性质及电极反应机理,峰电流由中心离子铜（Ⅱ）还原产生。试验了多种离子对峰电流的影响,方法已用于矿样中铜的测定,结果满意。     

铜(Ⅱ)-7-碘-8-羟基喹啉-5-磺酸络合物吸附波的研究

在PH6,34的柠檬酸三钠-盐酸介质中,铜（Ⅱ）与7－碘－8－羟基喹啉－5－磺酸（Fer－ron）形成络合物,在线性单扫描示波极谱仪上产生一灵敏吸附波,一阶导数峰电位Ep=0．56V（vs．SCE）。峰电流与铜的浓度在0．005～0．315μg／mL间呈良好的线性关系,检出限为0．001μg／mL。用多种电化学方法研究了极谱波的性质及电极反应机理,证明了该极谱波为络合物吸附波,峰电流由中心离子铜（Ⅱ）还原产生,络合物组成为Cu（Ⅱ）：Ferron=1：1,表现稳定常数β=1．52×104。试验了多种离子对峰电流的影响。方法应用于生铁和硅钢标样中铜的测定,获得满意结果。     

油包水微乳液介质中脂肪酶催化α-单硬脂酸甘油酯水解反应活性研究

以α-单硬脂酸甘油酯为底物研究油包水（W／O）微乳液介质中脂肪酶的水解催化活性。结果表明，由AOT／水／正庚烷构成的ω/O微乳液体系的w0值、pH值、缓冲液离子浓度、AOT浓度等参数对脂肪酶催化活性有影响，最佳酶活力对应的微乳液组成为：w0=8;pH=7.17(67mmol/L的KH2PO4－Na2HPO4缓冲液）；[AOT]=0.10mmol/L。研究还表明，微乳液介质中，脂肪酶催化α-单硬脂酸甘油酯水解反应动力学与水介质中相类似；当酶浓度恒定时，反应速率与底物浓度的关系符合Michaelis-Menten方程，最大反应速率vmax（用脂肪酶活力表示）约为156u,米氏常数Km约为5．6mmol/L；当底物浓度恒定时，反应速率与酶浓度成正比。     

固定化啤酒酵母废菌体吸附Pt4+特性的研究

用2％海藻酸钠与l％明胶混合为包埋剂固定啤酒酵母废菌体．固定化啤酒酵母废菌体(ISCWB)呈球形．粒径2～3mm．ISCWB吸附作用受吸附时间、溶液pH值、ISCWB浓度和Pt^4 起始浓度等的影响．但不受温度的影响；吸附作用是一个快速的过程．吸附60min达到平衡．但在最初的5min内吸附量可达最大吸附量的88．4％．吸附Pt^4 的最适pH为2．0．在Pt^4 起始浓度200mg／L、固定化菌体浓度1．6g／L、pH2．0和30℃条件下振荡吸附60min．吸附量为44．0mg／g．TEM观察显示，固定化菌体不仅能吸附Pt^4 而且能将Pt^4 还原成Pt^0．从含Pt^4 95．22mg／L和47．6lmg／L的废铂催化剂处理液中回收铂．其吸附率分别为48．44％和60．72％，吸附量为26．97mg／g和17．2lmg／g．以1．0mol／L盐酸作为解吸剂，解吸率达80．2％．在填充床反应器中．固定化菌体的最大饱和吸附量为21.0mg／g．解吸率为80％．该固定化菌体有较好的应用前景．     

氧载体对L-天冬酰胺酶发酵过程影响的研究

以抗癌药物L－天冬酰胺酶生产为应用背景,针对发酵过程中存在的严重耗氧问题,研究了氧载体对发酵过程的影响。通过对几种氧载体的筛选,认为正十二烷最适合该发酵过程。随后以产物L－天冬酰胺酶活性、菌体浓度以及溶氧水平为主要指标,考察了氧载体在发酵过程中的作用,实验表明,发酵基质中5％正十二烷的添加量为最佳浓度,这种氧载体的加入,明显地提高了发酵介质中的溶氧水平,改善了供氧条件,增加了菌体浓度,提高了L－天冬酰胺酶发酵水平,在优化条件下,可使发酵液最终酶活提高21％左右。     

苦味酸锰、钴、镍、铜、锌、镉与4′—硝基苯并—15—冠—5配合物的合成与表征

在乙腈－乙醇－水（2：2：1，V／V／V）的混合溶剂中制备了六种金属（锰、钴、镍、铜、锌、镉）苦味酸盐与4′-硝基苯并－15－冠－5的固态配合物，其组成为M（pic)2.2L.XH2O(M=Mn,Cu,x=2;M=Co,Ni,Zn,Cd,x=4;pic=苦味酸根；L＝4′-NO2B15C5），并通过元素分析、红外光谱、紫外光谱和摩尔电导对该系列配合物进行了表征。     

Galactomyces reessii转化β-甲基丁酸生产β-羟基-β-甲基丁酸

Galactomycesreessii可将 β-甲基丁酸 ( MBA)转化为 β-羟基 - β-甲基丁酸 ( HMB)。摇瓶实验表明发酵过程中提供生长因子的酵母萃取物浓度以 3 g/L较适宜。高浓度钠、铵离子对菌体生长有抑制作用 ,为保证转化 MBA所需 p H可采用混合碱 ( Na OH、KOH、NH4 OH)来调节 ,以防止单一阳离子浓度过高对菌体生长和产物形成的抑制。MBA对菌体生长有明显的抑制作用 ,1 0 g/L的MBA可使菌体浓度减少 3 0 %。分批补料发酵中 ,连续流加葡萄糖和 MBA,控制发酵液中葡萄糖浓度不超过 3 g/L,MBA浓度不超过 4g/L ,1 0 2 h时 HMB浓度达 2 9.0 g/L ,转化率达 5 7.3 % ,HMB平均生产率达 0 .0 98g/( L· h)。     

镁离子提高融合株SPSC耐酒精性能机制

生长阶段和冲击阶段均添加3．5 mmol／L Mg^2 能显著提高融合株SPSC在20％(体积分数)酒精冲击下的存活率：经过9h冲击,对照组的存活率为0,而添加Mg^2 试验组的存活率为53．1％,表明适当浓度的Mg^2 能显著提高菌体的耐酒精能力,通过考察Mg^2 对菌体在15％(体积分数)酒精冲击下细胞膜透性的影响发现,生长阶段和冲击阶段均添加3．5 mmol／L Mg^2 的试验组的胞外核苷酸平衡浓度和细胞膜透性系数(P′)分别仅为对照组水平的45．6％和15．6％,表明添加适当浓度的Mg^2 能显著降低受冲击茵体的细胞膜透性;而且,添加Mg^2 提高存活率与添加Mg^2 降低胞外核苷酸浓度和P′存在直接的对应关系。因此,Mg^2 提高融合株SPSC耐酒精能力是与其降低受冲击菌体细胞膜透性密切相关的。     

5-羟色胺对大鼠肝细胞DNA合成增强作用的研究

目的：调查诱导或增强肝细胞ＤＮＡ合成因素。方法：；从成年大鼠肝脏分离肝细胞，在含＾３Ｈ－胸苷的培养液中培养，向含或不含表皮生长因子（ＥＧＦ）和胰岛素的肝细胞培养加入不同浓度的５－羟色胺（５－ＨＴ）以观察对ＤＮＡ合成的影响。在部分含５－ＨＴ的培养中加入５－ＨＴＨ２受体拮抗物酮舍林以检查Ｈ２受体的参与。ＤＮＡ合成以＾３Ｈ－胸苷掺入肝细胞ＤＮＡ的量用液体闪烁计数法测量。结果５－ＨＴ单独不能刺激ＤＮＡ合成     

熊猫豆β—D—半乳糖苷酶的基本性质研究

经硫酸铵分级分离,DEAE－cellulose 52,CM-cellulose 52和Sephacryl S 100HR凝胶过滤层析方法从熊猫豆黄化苗中获得了一种β－D－半乳糖苷酶,活性收率为8．0％,纯化倍数为245。经PAGE显示单一蛋白着色带,用IEF－PAGE测定其PI为4．1。SES－PAGE显示2条蛋白着色带,其相应分子量分别为40kD和29kD.Sephadex G200层析法测得表观分子量为68kD,以ONPG和PNPG为底物测得该酶的表观Km分别为3.02mmol/L和0．33mmol/L。最适pH为4．2,最适温度为52℃。以乳糖为底物测得表观Km为43mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖对酶表现出不同的抑制作用。对某些金属离子和化学修饰剂对酶活性的影响也进行了探讨。     

大肠杆菌乙酸代谢突变株的培养和外源基因表达

大肠杆菌JL3是JM101经诱变和连续培养所选育到的乙酸耐受性突变株，JL3在复合培养基中产生的乙酸比JM101少，菌体对葡萄糖的得率（YX／S）增加，在基本培养基M中连续培养，最大菌体得率（YG）增大，维持系数（m)降低，存在外源乙酸时，JL3对葡萄糖亲和性增加，显示较强的生长优势，在含有10g/L乙酸钠的复合培养基中，JL3／pUC19的β－半乳糖苷酶比活比JM101／PUC19提高30％。