丝状真菌原生质体技术研究（Ⅵ）：高脚小伞原生质体…

报道高脚小伞菌丝体原生质体制备及再生的结果，多种因素影响原生质体的产量及再生率，在最适条件下，质原质体产量可达２．５４×１０＾６个／ｍｌ，再生率达２３．６％，还对原生质体的活力及核数进行了测定，本研究为进一步的原生质体融合及外源基因转化工作打下了基础。     

丝状真菌原生质体技术——(Ⅰ)黑曲霉原生质体灭活

在GM玻璃纸平板上接种10~6数量级的孢子悬液,31℃培养17～18hr,收集菌丝于1.5%Lywallzyme中酶解4hr,过滤离心收集原生质体,原生质体经50℃,5min处理,并20W紫外灯40cm照射,150s,0.1MHNO_2,pH4.6.再经31℃恒温处理7min,原生质体可达到全部灭活.     

酿酒酵母W5原生质体制备及再生条件的初步研究

对影响酿酒酵母W5制备与再生的一系列因素做了初步的研究,确定了原生质体制备与再生的最佳条件:菌龄为12h,脱壁预处理剂作用20min,在30℃,pH为偏酸或者偏碱的条件下,选用2%(m/v)的蜗牛酶用10mL试管摇床温育15min;渗透压稳定剂采用17%(m/v)蔗糖,原生质体制备率和再生率可达到95.11%和14.66%。     

丝状真菌原生质体技术研究——培养条件对原生质体的影响(VII)

研究了培养基成分、培养方式和培养时间对台湾根霉（Ｒｈｉｚｏｐｕｓｆｏｒｍｏｓａｅｎｓｉｓ）、糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）、草菇（Ｖｏｌｖａｒｉｅｌａｖｏｌｖａｃｅａ）和银丝菇（Ｖ．ｂｏｍｂｙｃｉｎａ）原生质体分离再生的影响．分离原生质体培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,银丝菇以ＣＹＭ培养基,糙皮侧耳以２０％平菇子实体浸出液配制的ＰＱＡ培养基为好．原生质体再生培养基,草菇以ＰＤＡ＋稻草浸出液,糙皮侧耳以ＢＭ培养基为好．不同培养方式对不同菌种原生质体再生率的影响是不同的．台湾根霉的原生质体在液体再生培养基上的再生率为４５％,而在固体培养基上再生率为０．０９％;草菇的原生质体以固体和液体两种培养方式再生无明显差异．试验过的所有丝状真菌,夹层固体再生较单层固再生率高．菌龄影响原生质体的分离和再生．不同真菌分离原生质体的菌龄不同,台湾根霉的菌龄以１４～１６ｈ（３２℃）、草菇以４８ｈ、银丝菇以７２ｈ（３０℃）为最适培养时间     

丝状真菌原生质体技术的研究——去壁酶对丝状真菌原生质体形成的影响(Ⅱ)

本文研究了几种丝状真菌原生质体形成的最佳酶类和酶浓度(W/V).结果表明:台湾根霉为2％的溶壁酶(Ⅱ);黑曲霉,平菇,草菇,银丝草菇为1.5％的溶壁酶(Ⅰ);放线菌的红霉素链霉菌为0.025％的溶菌酶.     

丝状真菌原生质体技术的研究(Ⅷ)——渗透压稳定剂对原生质体的影响

报道用五种无机盐和有机糖醇作渗透压稳定剂,对草菇、银丝菇、台湾根霉和黑曲霉原生质体分离和再生的影响．分离原生质体以ＫＣｌ、ＮａＣｌ和ＭｇＳＯ４等无机盐渗稳剂较有机糖醇效果好．ＫＣｌ和蔗糖对四种真菌原生质体再生都有较好的效果．就浓度而言,分离原生质体０．６ｍｏｌ／ＬＫＣｌ、ＭｇＳＯ４、蔗糖和甘露醇对黑曲霉和台湾根霉都是最佳的浓度．草菇和银丝菇以０．４ｍｏｌ／Ｌ蔗糖或０．５ｍｏｌ／ＬＫＣｌ和ＭｇＳＯ４效果较好．渗透压稳定剂的种类和浓度不仅影响原生质体的数量而且影响原生质体的质量．０．６ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ对台湾根霉和黑曲霉原生质体分离有好的效果,而对草菇和银丝菇效果就比较差．０．６ｍｏｌ／ＬＫＣｌ对草菇、银丝菇和台湾根霉原生质体再生有很好的效果,而对黑曲霉效果则相当差．     

侧耳属食用菌原生质体制备与再生试验

原生质体分离与再生,是进行原生质体融合育种的先行工作。本文报告食用菌侧耳属四个种六个菌株原生质体分离与再生的试验结果。六菌株平板培养五天的幼龄菌丝体,在混合酶液中32℃摇瓶酶解5～7小时,即可全部离解。经过滤、离心、洗涤等净化的原生质体悬液,原生质体浓度多数可达2·10~5(个/毫升)以上。原生质体采用固液两种培养基进行再生培养时,菌株S_1、S_2仅在液培中获再生菌株,而S_3、S_4、S_5、S_6在固液两种培养基均获再生菌株。     

小白链霉菌(Streptomyces albulus)的原生质体制备研究

广谱天然防腐剂ε-多聚赖氨酸产生菌Streptomyces albulus的育种工作目前仅处于常规育种水平,为对其进行原生质体技术的育种改造,对影响S.albulus原生质体制备的几个重要因子进行了详细研究。测定了S.albulus的生长曲线,确定制备原生质体的最佳菌龄为稳定期初期即培养40h;S发酵液中添加2·0%甘氨酸可使原生质体形成率最高;以破坏链霉菌细胞壁效果最好的溶菌酶进行酶解,确定最佳酶解温度为为35℃、最佳酶解时间为180min、最佳溶菌酶浓度为2.0mg·mL-1;在以上最佳原生质体制备条件下可获得纯净且量多的S.albulus原生质体,形成量达1.74×108cfu·mL-1,为S.albulus原生质体的进一步遗传育种奠定了良好的基础。     

丝状真菌原生质体技术研究（V）──原生质体融合的形态学观察

本文报道了台湾根霉、黑曲霉、米曲霉、草菇、银丝草菇和糙皮侧耳等，几种丝状真菌原生质体释放、再生和融合过程的形态学观察结果，并对其机制进行了讨论．原生质体释放有顶位、侧位和原位释放３种方式；原生质体分无核、单核、双核和多核４种类型．原生质体的再生过程由壁的再生、修复和萌发３个阶段组成．原生质体萌发可成芽管状、念珠链状和３个以上方向分裂形成的不规则状．原生质体融合分为两个、３个和原生质体再融合３种类型，无核原生质体、原生质修复不完整、遗传物质不完全整合性和细胞壁合成机制不协调，是造成种间融合再生率低的重要因素．     

G-8菌株原生质体形成和再生条件的研究

以浮游球衣细菌Ｇ－８菌为出发菌株,有杉甘氨酸－溶菌酶－ＥＤＴＡ方法,研究了各种因素对原生质体形成和再生的影响。在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,Ｇ－８菌原生质体形成率和一率分别达９６．８％和２９．８％,通过光学显微镜技术,观察了原生质体形成和再生的过程。     

植物原生质体培养与融合的研究进展

对原生质体的分离、培养、融合及植株再生方面进行了简要的论述.并根据对有关文献的分析,讨论了原生质体研究中存在的问题及今后的发展趋势,指出植物原生质体的游离、培养和融合技术在近20多年来得到了迅速的发展,今后在进一步加强原生质体培养基础理论研究的同时,重点放在利用原生质体融合技术进行遗传性状的改良,以获得优良性状的个体并通过无性途径固定下来.     

水基金属切削液的失效及其再生设备设计

分析了水基金属切削液失效的原因,论述了其废液的处理方法。针对水基金属切削液失效及其废液的危害,设计了水基金属切削液在线循环净化设备。     

药用植物蚬壳花椒的离体培养及再生体系的建立

为了研究蚬壳花椒的离体培养并建立再生体系,用蚬壳花椒的二年生植株的幼茎作为起始外殖体,接种在含不同激素的MS培养基上,结果为最佳腋芽诱导培养基为:Ms+2.0 mg.L-16-BA+O.05 nag.L～1NAA,诱导率达64.O%;最佳丛生芽诱导培养基为:MS+2.0 mg.L-1ZT+0.2 mg.L-1NAA,诱导率达90.O%;最佳增殖培养基为:MS+6.BA0.5 mg.L-1+NAAO.05rag.L-1+生物素1.0 mg.L-1,增殖系数可达到4.O;最适生根培养基为:1/3MS+IBAO.3mg.L-1+NAA O.05 rag.L-1,生根率达78%.     

都市实验：武汉市昙华林历史街区修复再生设计研究

针对武汉市昙华林历史街区的保护与再生问题展开论述，认为具有历史积淀的老城区，在城市发展过程中富有历史记忆和文化价值，强调在城市现代化进程中保护历史文化并力求让其再生的重要性。根据武汉市昙华林历史街区现有的具体形态，从当代美学、景观建筑学、文化记忆的延续、当代艺术的体现、新元素的介入等方面，试图对其提出可持续性的修复再生设计策略，从而为武汉市昙华林历史街区的人们，创造一个位于城市中心区的心灵安宁之所。     

T_1与T_2之间的两个分离公理

本文给出了T_1与T_2之间的两个分离公理,并讨论了它的某些性质.     

置换混叠信号的盲检测和分离

针对观测信号相互置换的情况,从盲源分离的角度研究置换混叠信号的盲检测与分离问题,给出了置换混叠信号的数学模型,提出了基于特征域可分的置换混叠区域检测方法,根据频谱特性和局部相关性分别提出了正弦置换混叠信号和置换混叠图像的盲检测与分离算法. 实验结果表明,该方法能有效应用于置换混叠信号的检测.     

疏水吸附剂吸附、微波再生净化有机废气研究

研究了疏水吸附剂HZ净化苯、乙醚、二硫化碳等有机废气的吸附特征，并考察了微波再生性能，结果表明，吸附饱和的吸附剂能在微波场中有效再生，有机废气被转化为无害或低害的水、二氧化碳、二氧化硫等小分子物质，微波再生后的吸附剂具有与原来相当的吸附容量和表面积．     

亚、超高斯信号后非线性混合的盲分离

研究后非线性混合信号的盲分离,从最大似然角度推导了一般后非线性分离结构的学习公式;在前人一些工作的基础上,提出一种用于亚、超高斯信号后非线性混合的盲分离算法.通过对人造及自然信号的实验,证实了该算法的有效性.     

阴离子间接紫外光度单柱离子色谱快速分离方法研究

本工作对阴离子间接紫外光度单柱离子色谱快速分离方法进行了研究。考察了柱长和洗脱液组成对阴离子分离的影响，并对井水、坝水、自来水和雪水中无机阴离子进行了快速分离。