酵母嗜杀质粒融合转移──Ⅰ．融合转移系统的建立

以嗜杀酵母ＥＲＲ１和啤酒生产酵母ＡＳ２４２０出发菌株，建立了供体菌ＭＫ２－３：Ｋ＋Ｒ＋Ｌｅｕ－ρ＋（ｎ）和受体菌ＡＳ２４２０－１：Ｋ－Ｒ－ｌｅｕ＋ρ°（２ｎ）．对原生质体制备再生条件的研究结果表明两株菌的原生质体制备条件不尽相同；同一菌株原生质体形成与再生的最佳条件也不相同．有利于融合再生的原生质体制备条件是ＭＫ２－３：菌龄３０ｈ，蜗牛酶解量３０ｇ／Ｌ酶解时间３０ｍｉｎ，此时原生质体形成率为８０％，而再生率达１７．１％，这些条件对嗜杀活性无影响，再生菌落的嗜杀活性率达１００％；而ＡＳ２４２０－１；菌龄２４ｈ，蜗牛酶量２０ｇ／Ｌ，酶解时间３０ｍｉｎ，原生质体形成率为８１％，再生率为１８．１％．对四种渗透压稳定剂的再生效果实验表明甘露醇效果最佳，氯化钾次之，考虑到廉价，氯化钾是很好的代用品，在３０％ＰＥＧ６０００及Ｃａ２＋条件下进行原生质体融合，融合率可达８．９×１０－６，对其中的融合子ＭＡＲ４的遗传性状及嗜杀活性的稳定性检测，ＤＮＡ含量及细胞大小测定，ｄｓＲＮＡ质粒的提取及电泳结果分析和发酵性能测定，结果表明融合子ＭＡＲ４具有较高的嗜杀活性并可以稳定遗传，有与供体菌ＭＫ２－３嗜杀质粒ｄｓＲＮＡ相同的电泳行为，     

酿酒酵母不同嗜杀菌株的比较及相互作用

以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株ＳＫ４和ＥＲＲ１为材料，分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性。     

酿酒酵母不同嗜杀菌株的比较及相互作用

以酿酒酵母两种不同类型的嗜杀菌株ＳＫ４（Ｋ１型）和ＥＲＲ１（Ｋ２型）为材料，分析了不同嗜杀酵母的嗜杀特性．证明两株菌产生的毒素蛋白的最适条件不同，最适ｐＨ和温度分别为４．８、１６℃和４．２、２２℃，但均对在对数生长期的敏感细胞作用最显著．ＳＫ４和ＥＲＲ１的嗜杀质粒的比较表明：Ｍ１－ｄｓＲＮＡ质粒和Ｍ２－ｄｓＲＮＡ质粒分子量分别为１．７ｋｂ和１．５ｋｂ，两株菌的Ｌ－ｄｓＲＮＡ质粒均为４．０ｋｂ．用高温和紫外线处理嗜杀酵母，嗜杀活性随之消失．     

含有嗜杀质粒的核融合缺陷突变株原生质体制备及再生条件的研究

利用由藤黄节杆菌(Arthrobacter latevs)分泌的,以β—1.3葡聚糖酶为主的酵母细胞壁溶解酶(Zymolyase),对含有嗜杀质粒的核融合缺陷突变株5045(α,his4,karl—1[KIL—K_1]rho~+)进行破壁,得到该菌株破壁,再生的最佳条件。为嗜杀酵母原生质体融合育种提供了依据。     

极端嗜盐菌冻干保藏及其质粒稳定性的研究

采用优化组合保护剂冷冻干燥２０株极端嗜盐菌，于４℃冷库保存２年，经复水测定，全部菌株保持较高存活性。用ＴＥＮＳ法对其中９株菌Ｒ，ＲＦ１，Ｊ７，Ｓ９，ＴＦ－１，Ｊ８，Ｒ６－１，Ｒ６－７和Ｒ６－５作质粒稳定性检测，含质粒的菌株ＲＦＪ１，Ｊ７，Ｓ９，Ｔ４－１，Ｒ６－５于４℃保存2年后，质粒稳定存在。     

嗜麦芽假单胞菌质粒pSH1的限制图谱及km^r标记的克隆

对嗜麦芽假单胞菌Ｐ２菌株的质粒ｐＳＨ１进行了限制酶切分析，确定了Ｂｇ１ Ⅱ，ＥｃｏＲ Ⅰ，Ｐｓｔ Ⅰ，Ｘｂａ Ⅰ，ＢａｍＨ Ⅰ，Ｂｇｌ Ⅰ，及Ｐｖｕ Ⅱ共７种限制性内切酶在ｐＳＨ１，质粒上的切割位点，前４种酶均为单一切点，后３种依次为２，７，５个切点。通过双酶切和部分酶切的方法绘制了ｐＳＨ１质粒的限制酶切图谱。将ｐＧＰ１－２质粒上的卡那霉素抗性基因片段插入ｐＳＨ１，获得了重组质粒ｐＳＨ２．ｐＳＨ２     

红酵母菌产胡萝卜素的初步研究红酵母菌产胡萝卜素的初步研究

报道一株分离于自然界的红酵母菌株,通过正交实验确定了菌株产生胡萝卜素的最佳培养基,并优化了菌株的培养条件温度28℃和最佳pH6.0及最适培养时间3d,在优化培养条件下色素产量为0.26mg/干细胞(g).     

嗜热脂肪芽孢杆菌质粒的研究

从广西各地的八个温泉的水样中分离到２０株耐药的嗜热脂肪芽孢杆菌，用改良的ＢｉｎｇｈａｍＳＤＳ裂解法，从其中的１５株菌中检测到质粒。再用琼脂糖凝胶电泳法及电子显微镜技术对耐氨苄青霉素（２５μｇ·ｍｌ－１）的１２号菌株的质地作了较深入的研究。发现该质粒为共价闭合坏状ＤＮＡ分子（ＣＣＣＤＮＡ），共分子量为１４．６３×１０６，澳化乙锭（１μｇ·ｍｌ－１）和吖啶橙（２０μｇ·ｍｌ－１）共同作用可将该质粒消除掉。该质粒的功能有待进一步研究。     

酵母质粒Killer系统的研究

从酿酒酵母中筛选出两个具有线状双链RNA质粒的酵母菌株,提取并纯化了它的质粒RNA.用RNase和DNase处理,发现它们能被RNase消化,证明它们是质粒RNA.用电镜观察到它们呈线状,凝胶电泳图谱表明,这些质粒RNA都含有两条带;其分子量分别为3.0×10~6d和1.5×10~6d。     

面包生产用干酵母发酵特性的研究

对6 种即发活性干酵母:马利干酵母、梅山酵母王、梅山干酵母、燕牌干酵母、丹宝利牌干酵母和燕山牌即发干酵母的发酵特性进行了研究。结果表明,不同干酵母的耐盐性和耐糖性均不相同;通过对糖盐交互作用的分析得知,不同干酵母对配料中所用糖和盐的比例有不同的要求,马利干酵母的耐盐性最好,梅山酵母王的耐糖性最好,马利干酵母对糖盐交互作用的适用性最好。     

硒酵母中三种含硒馏分的生物活性研究

本文采用超声粉碎硒酵母,将其超速离心所得上清液通过Sephadex—G25分子筛色谱柱,分离得到三个含硒馏分(P_1;P_2;P_3)。用T_3菌生物发光和电子自旋共振(ESR)技术研究了它们对As(Ⅲ)毒性的拮抗作用和对脂质过氧自由基的清除作用。实验结果表明其生物活性大小为P_3>P_1>P_2>Na_2SeO_3,并对三个含硒馏分的结构进行了讨论。     

酵母细胞麦角固醇含量测定的研究

以石油醚取代正庚烷和乙醚作为萃取剂对麦角固醇含量进行了测定，并分析和比较了皂化，干细胞或湿细胞提取等条件对麦角固醇含量测定的影响，在此基础上，提出了一种快速测定发酵液中酵母麦角固醇含量的方法。     

国产干酵母活化方法的研究

本试验利用土豆汁、活化液、土豆汁加活化液对丹宝利和梅山两种国产干酵母分别进行了活化，并测定其发酵力。结果表明，对于丹宝利活化最佳工艺为利用活化液活化４５ｍｉｎ，对于梅山活化最佳工艺为利用５％土豆汁和活化液共同活化１５～３０ｍｉｎ，两种干酵母发酵力分别提高９０ｍｌ和１２１ｍｌ，这为国产干酵母替代进口干酵母提供了依据。     

酵母菌呼吸缺陷型和野生型线粒体DNA比较

以酒精酵母(S.cerevisiae)IFFI1300为材料,建立了以“蜗牛酶+机械振荡”复合处理破碎细胞的方法;先提取并纯化线粒体,后从线粒体中提取线粒体DNA的方法,得到了紫外吸收A260/A280为1.823,琼脂糖电泳为一条带且分子量大于λDNA(49kb)的线粒体DNA,与EB诱发的呼吸缺陷1300—1、1300—5的线粒体DNA比较,说明rho~+与rho~-之间、不同的rho~-之间其线粒体DNA的琼脂糖电泳、浮力密度、变性曲线(Tm值)的性质均不相同。由此推测:EB诱发的呼吸缺陷菌株的线粒体DNA是由一系列不同分子量的分子组成,群体呈多态性。     

乙醇对酿酒酵母酸化力的影响

酿酒酵母A364A菌悬液中加入0.1mol/L葡萄糖后立即出现酸化现象。乙醇抑制酵母酸化力作用受菌龄、温度及pH的影响。菌株A364A在含乙醇培养基中生长后对乙醇的耐受力变小,但在YNB培养基中能恢复。而放线菌酮抑制这种恢复作用说明乙醇耐受力的恢复与蛋白质合成有关。     

酵母酸性磷酸酯酶基因PHO81克隆的初步研究

酵母PHO81基因是调控阻遏酸性磷酸酯酶的的一种中介因子,其编码区由3531个核苷酸组成。由于片段较大,目前很难应用PCR技术一次予以扩增。本文用自行设计的4个引物以啤酒酵母总染色体DNA为模板借助PCR技术扩增PHO81基因的两个片段,其长度分别为1.3kb和2.2kb,通过限制性酶切将其装入载体质粒pUC18中。并初步进行了重组质粒限制性内切酶酶谱分析和Southern杂交试验。     

固定化酵母用于传统啤酒发酵的研究

利用固定化酵母用于传统啤酒发酵,结果表明:酵母在固定化载体中生长良好、增殖快、稳定性高,可使啤酒的主发酵期由7～12天缩短为36小时,有效的提高了设备利用率,啤酒产量增加30～40％.同时还节省能源,降低成本.     

人工神经网络技术用于酵母同化无机硒作用的研究

本文研究了啤酒酵母和假丝酵母对无机硒的同化能力,结果表明假丝酵母对无机硒的耐受力较强;并且假丝酵母对无机硒的同化能力和菌体产率均高于啤酒酵母．另外还研究了金属元素对假丝酵母同化无机硒及生长的影响,运用神经网络技术,以正交试验法构造训练样本,通过预测与优化,得出培养基中的无机金属元素的最佳含量．