Nucleostemin siRNA对结肠癌细胞株HT-29细胞凋亡的影响

利用RNA干扰技术沉默结肠癌细胞株HT-29细胞中Nucleostemin(NS)基因的表达,并分析其对HT-29细胞凋亡的影响,进一步利用半定量RT-PCR和Western blotting技术检测细胞凋亡相关基因caspase-3/9 mRNAs和蛋白的表达.结果表明,NS基因的沉默能明显提高caspase-3/9的活性(P0.05),并诱导细胞发生凋亡,此外,HT-29细胞中NS基因沉默后,caspase-3/9mRNAs和蛋白的表达均明显升高,提示NS基因沉默介导的细胞凋亡与caspase-3/9基因表达的升高密切相关.     

黄荆子乙酸乙酯提取物诱导结肠癌HT-29细胞凋亡

目的研究黄荆子乙酸乙酯提取物（EVn-50）诱导人结肠癌HT-29细胞凋亡作用。方法用不同浓度的EVn-50处理体外培养的HT-29细胞;碘化丙啶（PI）染色流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察DNA梯形条带;Western blot分析Bcl-2和Bax蛋白表达。结果EVn-50以浓度依赖的方式增加HT-29细胞凋亡率（P〈0．05）。10．0tanoVLEVn-50处理HT-29细胞48h导致典型DNA梯形条带形成。10．0umol/LEVn-50以时间依赖方式下调Bcl-2蛋白表达,同时,上调Bax蛋白表达（P〈0．05）。结论EVn-50诱导HT-29细胞凋亡作用与增加Bax／Bcl-2比值有关。     

JR6对人结肠癌细胞HT-29氧化还原系统影响

探讨新型抗肿瘤药物JR6诱导人结肠癌细胞HT-29凋亡机制.使用噻唑兰比色法(MTT)检测JR6对人结肠癌细胞HT-29的生长抑制作用,并测定HT-29细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)浓度.JR6对HT-29细胞生长有明显抑制作用,可以降低HT-29细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性,升高MDA浓度.JR6对HT-29细胞有明显的细胞毒作用,其IC50为39.8μg/ml,可能通过影响HT-29细胞中SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA浓度,达到诱导HT-29细胞凋亡的目的.     

PPARγ罗格列酮对HT-29的生长抑制作用

PPARγ配体在抗肿瘤中发挥着重要的作用,这些配体具有抗肿瘤、诱导分化和抗血管生成等效果.目的主要是评估PPARγ激动剂罗格列酮对结肠癌细胞株HT-29生长的抑制作用.结果显示,罗格列酮可以有效地抑制体外培养的结肠癌细胞株HT-29的生长及克隆形成,并能抑制HT-29裸鼠移植瘤的生长.与此同时,罗格列酮能够升高PPARγ, p- PPARγ的表达水平.以上结果初步证明罗格列酮在体内外均可抑制结肠癌细胞株HT-29的成长,提示罗格列酮有可能发展成为治疗结肠癌的有效药物.     

白花蛇舌草提取物对结肠癌HT-29细胞Bcl-2和Bax表达的影响

结直肠癌(CRC)是危害人类健康的主要肿瘤之一,在美国的各种肿瘤中位列第三[1]。最新统计数据显示2007年估计在15多万CRC的新病例中就有5万多人死于CRC[1,2]。虽然     

RNA干扰Nucleostemin基因对人结肠癌细胞株HT-29细胞增殖及细胞周期的影响

将Nucleostemin(NS)siRNA利用脂质体2000转染人结肠癌细胞株HT 29,分别利用CCK-8试剂盒和流式细胞术检测NS siRNA对HT 29细胞增殖和细胞周期的影响,进一步利用Real-time PCR和Western blotting技术检测NS基因和细胞周期相关基因p21 mRNA和蛋白的表达.结果表明,NS siRNA的转入能有效下调NS mRNA和蛋白的表达(P0.05),并能明显抑制人结肠癌细胞株HT 29的细胞增殖(P0.05),并诱导细胞周期静止在G_0/G_1期,转染NS siRNA后,p21 mRNA和蛋白的表达均明显升高,提示细胞增殖抑制和细胞周期静止与p21基因表达的升高密切相关.     

槲寄生总碱抗肿瘤及抗炎作用研究

用自行提取的槲寄生总碱,分不同剂量每天给植瘤小鼠腹腔注射,证明槲总碱在较高剂量(90 mg/kg)时对小鼠实体瘤(S180)和瘤性腹水的生长均有显著的抑制作用.另外,用同样的给药方法,证明槲总碱对实验性炎症反应也有显著的抑制作用.     

轮环藤碱对小胶质细胞活化的抑制作用研究

考察了轮环藤碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞过度活化的抑制作用.培养BV2小鼠小胶质细胞系,以脂多糖(1μg/mL)激活小胶质细胞,同时给予不同浓度的轮环藤碱(0.1～10μmol/L)处理细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,Griess法测定细胞释放一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附分析实验(ELISA)检测细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的水平.进一步在无细胞体系中考察了轮环藤碱对NO的直接清除能力;以及对DPPH、羟自由基(·OH)、过氧亚硝酸根离子自由基(ONOO~-)和超氧阴离子(·O_2~-)自由基的清除作用.结果表明,轮环藤碱可显著抑制LPS激活的小胶质细胞释放NO及三种炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α),且对细胞存活率无明显影响;此外,轮环藤碱对NO、DPPH、·OH、ONOO~-和·O_2~-自由基均具有显著清除能力.综上,轮环藤碱可能对小胶质细胞过度激活引起的神经炎性相关疾病具有潜在的防治作用.     

白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌HT-29细胞增殖及Hedgehog信号传导通路表达的影响

目的:观察白花蛇舌草乙醇提取物对人结肠癌HT-29细胞增殖及Hedgehog信号传导通路表达的影响.方法:采用人结肠癌细胞HT-29常规体外培养,随机设定空白组和不同浓度(1、3、5mg/mL)白花蛇舌草乙醇提取物组,干预24h,倒置显微镜观察细胞形态变化;MTT法测定不同浓度药物对HT-29细胞增殖的影响;RT-PCR检测药物作用后HT-29细胞Shh、Ptch、Smo和Gli-1mRNA的表达.结果:白花蛇舌草乙醇提取物干预后,能抑制HT-29细胞增殖,并呈现出量效作用;Shh、Ptch、Smo和Gli-1 mRNA 表达随药物浓度的增加而减少.结论:白花蛇舌草乙醇提取物能抑制HT-29细胞与其可抑制Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达有关.     

ABL沉默对DOX和TRAIL诱导结肠癌细胞HT29凋亡的影响

研究酪氨酸激酶Abelson(ABL)基因沉默与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)、阿霉素(doxorubicin,DOX)联合作用对结肠癌细胞株HT29凋亡的影响.利用shRNA慢病毒载体构建ABL沉默稳转细胞株,并用Western blot检测ABL表达水平;细胞计数试剂盒8(cell count kit 8,CCK8)实验检测细胞增殖和药物毒性;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关蛋白PARP1,cleaved-caspase3的表达水平.结果表明:TRAIL,DOX均能够抑制结肠癌细胞的细胞活性,二者联合用药可在较低剂量诱导细胞凋亡;ABL基因沉默能够抑制结肠癌细胞增殖,但同时也抑制了TRAIL对HT29细胞的凋亡诱导作用,以及TRAIL和DOX对HT29细胞凋亡的协同作用.可见,DOX和TRAIL联合用药能够显著诱导HT29细胞发生凋亡;虽然ABL沉默能抑制HT29细胞增殖,但同时也抑制了TRAIL和DOX协同促进HT29细胞凋亡的作用.     

H2-calponin对结肠癌细胞增殖的抑制作用

摘要：目的：探讨H2-calponin在结肠癌发生发展中所发挥的作用。方法：Western blot检测H2-calpinin在结肠癌组织和细胞系中的表达;构建H2-calpinin特异性小干扰RNA,稳定转染结肠癌SW480细胞系,同时将转染随机序列的SW480细胞作为对照,通过MTT实验、FACS细胞周期检测等方法研究H2-calponin下调对结肠癌细胞恶性生物行为的影响。结果：H2-calponin的表达与结肠癌的增殖能力具有相关性,下调H2-calponin的表达能够促进结肠癌细胞的增殖=。结论：本实验率先验证了H2-calponin能够抑制结肠癌细胞的增殖。     

苦参总碱对血管生成抑制作用的初步研究

水煎煮法提取苦参总碱（Alkaloids of Sophora Flavescens,ASF）,检测其对鸡胚绒毛尿囊膜（chick chorioallantoic membrance,CAM）血管生成的影响,并以鸡胚绒毛尿囊膜为模型检测其活性．结果发现,2mg／ml、4mg／ml、8mg／ml给药组的血管数目较对照组均明显减少（P〈0．05）,所有给药组显微镜所见的血管结构均较对照组模糊．2mg／ml、4mg／ml、8mg／ml三个给药组对CAM血管生成的抑制率分别为14．8％、28．1％和46．0％．因此,苦参总碱对CAM血管生成有一定的抑制作用．     

灭多威对美国棉铃虫细胞的抑制作用研究

运用 LKB2 2 77生物活性检测仪在 2 8℃下测定了昆虫细胞 (美国棉铃虫 Hz)的离体基础代谢热值 (其值为 2 3.6p W/ cell) ,研究了不同浓度的灭多威农药对昆虫细胞代谢产热功率的影响 ,并对其影响进行了讨论 .同时测得了农药 (灭多威 )对美国棉铃虫 Hz的半抑制量浓度 EC5 0 为1 96μg·m L- 1 ,并讨论了抑制率与农药浓度之间的关系     

H13对HT-29细胞周期和caspase-3蛋白表达的影响

探讨新型Topo I抑制剂H13对体外培养的人结肠癌细胞HT-29细胞周期和caspase-3表达的影响.以人结肠癌细胞HT-29为研究对象,PI染色,流式细胞仪检测H13处理48 h后细胞周期的分布;Western Blot法检测H13处理48 h后caspase-3表达的变化.2.5和5 g/mL H13处理的HT-29处理48 h后,G1期细胞百分率下降,S期细胞百分率上升,并且有剂量依赖性;2.5,5,10 g/mL H13处理的HT-29处理48 h后,caspase-3蛋白表达升高.H13对诱导HT-29细胞周期阻滞于S期,其机制可能与其上调caspase-3表达有关.     

双氯芬酸对Jurkat细胞的抑制作用

目的:探讨双氯芬酸体外对淋巴瘤细胞的抑制作用及机制。方法:分别以双氯芬酸10、30、100μg·mL-1体外处理T细胞淋巴瘤细胞系(Jurkat细胞),采用流式细胞仪和细胞生长曲线观察双氯芬酸对Jurkat细胞的影响。结果:双氯芬酸在体外显著抑制Jurkat细胞的增殖,其抑制作用随着剂量的加大而增强,和空白对照组比较有显著性差异。经流式细胞仪分析显示,双氯芬酸与Ju rkat细胞共同培养,可使细胞凋亡率显著升高。结论:双氯芬酸体外能显著抑制Jurkat细胞的增殖,此作用可能与诱导淋巴瘤细胞发生凋亡有密切关系。     

4HPR对Hela细胞的抑制作用

目的：国外文献报道４ＨＰＲ对乳腺癌具有显著的化学预防及治疗作用。本文拟探讨４ＨＰＲ对Ｈｅｌａ细胞的抑制作用。方法：运用荧光显微镜、电子显微镜、动物致癌试验及流式细胞仪分析等方法。结果：通过荧光显微镜、电子显微镜观察发现Ｈｅｌａ细胞发生明显的形态学改变；流式细胞仪检测，Ｈｅｌａ细胞ＤＮＡ出现显著改变；裸鼠致癌试验也提示４ＨＰＲ抑制Ｈｅｌａ细胞生长。结论：上述结果提示４ＨＰＲ在体内外对Ｈｅｌａ细胞均具有较强的抑制作用。     

Blf-ADT对HeLa细胞的抑制作用及其机制的研究

研究Blf-ADT(布洛芬硫化氢供体物)的抗肿瘤作用,并对其机制作初步探讨.通过形态学观察、噻唑蓝(MTT)比色实验、集落形成实验测定He La细胞的增殖能力;细胞划痕实验测定He La细胞的迁移能力;Annexin VFITC/PI双染流式细胞仪测定He La细胞的凋亡率;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Erk、P38和Procaspase-3等)的表达.结果显示,Blf-ADT能呈浓度或时间依赖性抑制细胞增殖、减少细胞集落的形成,降低细胞的迁移能力,同时能显著提高He La细胞的凋亡率,影响细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、Erk、P38和Procaspase-3等)的表达.Blf-ADT对人宫颈癌He La细胞的生长有显著的抑制作用,对治疗宫颈癌具有潜在的临床应用价值.     

湿生扁蕾对结肠癌细胞SW480增殖的抑制作用及对Wnt/β-catenin信号通路的影响

探究藏药湿生扁蕾抑制结肠癌细胞SW480增殖的潜在作用机制。MTT试验筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位(Ethyl acetate extract from Gentianopsis paludosa,GPE)最佳给药剂量。将试验分溶剂对照组、阳性对照组和药物干预高、中、低剂量组。MTT试验检测GPE对SW480细胞增殖的抑制作用;AO-EB双染试剂盒检测GPE对SW480细胞的凋亡的促进作用;Western Blot试验检测GPE对SW480细胞的Wnt3a、β-catenin、C-myc、Bcl-2蛋白表达的调节作用。与溶剂对照组相比,GPE给药组表现为剂量依赖式抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,尤以高剂量组为最优,阳性对照组也可不同程度降低SW480细胞增殖,促进其凋亡。Western Blot试验结果显示,与溶剂对照组相比,GPE给药后Wnt3a、β-catenin、C-myc、Bcl-2蛋白表达也呈剂量依赖式降低,阳性对照组也具有降低以上蛋白表达的作用。GPE通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌细胞增殖,促进其凋亡。     

利用斑马鱼模型研究芦荟大黄素对宫颈癌细胞SiHa的抑制作用

通过细胞增殖实验（MTT）研究不同浓度芦荟大黄素（Aloe emodin,AE）对人宫颈癌细胞SiHa生长的抑制作用,并将SiHa细胞注入48 hpf的斑马鱼胚胎卵黄囊,建立斑马鱼移植瘤模型,然后用不同浓度AE进行处理,考察肿瘤细胞在斑马鱼体内的增殖和迁移情况。结果显示,AE对SiHa细胞的生长抑制率随浓度和作用时间的增加而呈明显上升趋势,表现出一定的浓度 时间 效应依赖关系;体内实验表明AE对斑马鱼移植瘤的增殖和转移具有抑制作用。本研究表明,AE具有开发成抗宫颈癌药物的潜能,同时斑马鱼移植瘤模型也可以成为宫颈癌研究和药物评价的重要模型。