花背蟾蜍内胚层细胞核在核移植胚胎LDH表达上的等能性

研究了花背蟾蜍发育不同阶段内胚层细胞核为供体的核移植胚胎的LDH同工酶。发育20期之前的核移植胚胎整体的LDH同工酶谱均与发育同期正常受精的胚胎结果一致。发育20期之后,分别取肝、鳃、脑及肠进行分析,核移植胚胎的LDH同工酶表现也与对照组基本一致,表明花背蟾蜍早期发育不同阶段的内胚层细胞核在核移植胚胎LDH同工酶表达上具有全能性。     

花背蟾蜍早期发育中内胚层细胞核的分化

以细胞核移植的方法,探讨花背蟾蜍早期发育中内胚层细胞核的分化。实验按供体胚胎的不同发育时期分7组,并以囊胚期动物极区细胞核的移植作对照。结果表明:原肠晚期以前的内胚层细胞核与囊胚期动物极区细胞核一样,是尚未分化的,它们仍具有发育的全能性。从神经胚期开始,细胞核有了明显的分化,但这种分化是渐进的,至摄食期的蝌蚪仍有部分细胞核保持着促使卵子发育的功能。     

用细胞核移植的方法研究黑眶蟾蜍(Bufo melanostictus)早期内胚层细胞核的分化

本研究以移植细胞核的方法,探讨黑眶蟾蜍胚胎发育过程中胚胎层细胞核的早期分化。以囊胚期动物半球细胞核的移植为对照:当原肠早期囊胚腔底内胚层细胞核,与原肠晚期原肠腔底内胚层细胞核,移入去核的未受精卵后;移核卵发育到各期胚胎的百分率,与对照组基本相似。这表明以上两个时期的内胚层细胞核与囊胚期动物半球的细胞核一样,是尚未分化的,它们仍有发育的全能性。在以神经板期内胚层细胞核为供体的移植过程中,虽有一半以上的全囊胚发育到原肠期,但是胚胎进一步发育的能力受到较明显的阻抑。由此得出结论:黑眶蟾蜍内胚层细胞核从神经期开始,出现了较明显的分化,使卵子发育到游泳蝌蚪的能力显著下降。这结果表明黑眶蟾蜍内胚层细胞核的功能变化迟于豹蛙,而与非洲爪蟾相似。     

配子及早期胚胎发育过程中的染色质高级结构

细胞核内染色质的空间高级构象影响基因的转录调控,进而影响基因功能.近年来,由3C技术衍生而来的"C"方法,结合二代测序技术,尤其是Hi-C技术的出现和发展,为我们研究细胞核内高分辨率的染色质高级结构提供了强有力的平台.在胚胎发育过程中,基因表达的时空调控是生命个体正常生长发育的关键,而染色质结构正是调控这一过程的基础.精子和卵子的染色质构象截然不同,精子染色质高度压缩,呈现高频率的染色体间相互作用和超长距离的染色体内相互作用.MII期卵母细胞处于分裂中期,没有明显的TAD和compartment之分.受精之后,全能性的受精卵结构松散,随着发育进程逐渐压紧,其染色质高级结构的建立不依赖于受精卵基因组转录的激活,而是依赖于基因组的复制.接下来,我们对早期胚胎发育过程中染色质三维结构的变化进行详细归纳总结.     

新生牛牛脑活性肽NBBP-1对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞凋亡的诱导作用

应用新生牛牛脑活性肽NBBP-1处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,通过细胞计数、流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳、Hoechst染色、HE染色和电子显微镜检测等方法,研究新生牛牛脑活性肽NBBP-1对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞凋亡的诱导作用.实验结果显示,60 μg/mL新生牛牛脑活性肽NBBP-1能有效抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖活动,生长抑制率高达88.84%;细胞周期检测出现亚G1细胞凋亡峰,细胞凋亡率达19.20%;琼脂糖凝胶电泳显示出现细胞凋亡典型的DNA梯状条带;Hoechst染色显示细胞核内出现浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光;光学显微镜和电子显微镜下可见典型的细胞凋亡特征:细胞核固缩、染色质凝聚与凋亡小体等典型的细胞凋亡形态和超微结构特征.因此,新生牛牛脑活性肽NBBP-1能够有效诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的凋亡.     

毛竹茎竿纤维细胞发育过程中酸性磷酸酶的动态变化

应用磷酸铅沉淀技术对毛竹(Phyllostachys edulis(Carr.)H.De Lehaie)茎竿纤维细胞发育过程中酸性磷酸酶的动态变化进行了研究。结果表明:在纤维原始细胞形成期,酸性磷酸酶主要分布于质膜和细胞核染色质上;在初生壁形成早期,酸性磷酸酶主要分布在质膜、液泡和细胞核染色质上,并在质膜上密集分布;随着初生壁的继续形成,质膜上的酸性磷酸酶逐渐减少呈稀疏分布,而细胞核染色质上的酸性磷酸酶逐渐增多呈密集成团分布;随着次生壁的形成,染色质开始凝聚,细胞核染色质上分布的APase活性有所减弱。但随着液泡膜的裂解,在裂解的液泡膜、降解的线粒体和细胞质上具有APase活性。随着次生壁持续增厚,APase在胞间连丝、质膜、质膜内陷结构、运输小泡和凝聚并边缘化的染色质等部位持续多年保持较强的活性。因此,酸性磷酸酶可能是引起纤维细胞程序性死亡的原因之一,不同的酸性磷酸酶同功酶可能分别参与了毛竹茎秆纤维细胞初生壁和次生壁的形成,以及细胞程序性死亡过程中原生质体的降解。酸性磷酸酶持续保持较高活性与竹子纤维细胞的长寿特性也密切相关。     

双丁酰环腺苷酸对人胃腺癌体外培养细胞DNA合成的影响

应用~3H-TdR光镜和电镜放射自显影观察表明,MGc80-3 细胞标记指数达31.51％,标记银粒集中于分裂间期的S期细胞核中,细胞核呈重标记状态,绝大多数标记银粒分布于细胞核常染色质区域,少数见于核孔附近的常染色质或核孔附近的细胞质中,核仁未见标记,显示细胞内 DNA合成十分活跃。但经 dBcAMP诱导后,标记指数则降至 4.35％,细胞核呈弱标记状态,电镜放射自显影则未在细胞核内见到标记银粒,表明其DNA合成受到明显抑制。这种变化是由于dBcAMP诱导胃癌细胞内cAMP水平提高而实现的,认为DNA合成抑制是导致MGc80-3细胞走向分化的一个重要原因,对于癌变细胞恶性表型逆转具有重要作用。     

LMNA突变介导细胞核结构与功能异常

核膜蛋白综合征是一类主要由细胞核膜结构蛋白(如lamins、SUNs、emerin等)基因突变诱发的包括早衰等一系列疾病的总称,因其多数突变发现于核纤层蛋白基因上,所以又被称为核纤层蛋白综合征,其发病机制目前还不清楚。本文以A型核纤层蛋白基因位点上的致病突变基因C1294T为切入点,研究突变对细胞核结构与功能的影响,以及相关核膜蛋白及染色质定位与功能的影响。研究结果表明,LMNA突变对细胞核膜的结构与功能完整性具有影响作用,可致使细胞核膜异形甚至产生凸起小泡;另外还对细胞核内染色质的定位具有一定抑制作用,使其在细胞核内形成不均匀的分布状态,表明该突变已经影响到细胞核正常的结构与功能,并可能进一步诱发相关疾病。     

牡蛎低分子活性肽对人肺腺癌A549细胞形态与超微结构变化的影响

以牡蛎(Saccostrea cucullata)体内分离提取出的牡蛎天然低分子活性多肽(BPO-L,Bioactive Peptides of Oyster in Peak L)为效应物,观察研究BPO-L对人肺腺癌细胞形态和超微结构的影响.光镜观察显示经0.1 mg/mL BPO-L处理后的A549细胞体积增大,趋于扁平铺展状态,细胞核质比例变小,核仁数量减少.透射电镜观察显示经0.1 mg/mL BPO-L处理后的A549细胞核形态较规则,细胞核内异染色质减少,常染色质增多;细胞质内线粒体数量增多,结构较为一致,高尔基体呈较为典型发达状态,并出现粗面内质网增多和多聚核糖体减少等变化.结果表明,BPO-L能有效改变人肺腺癌细胞的恶性形态与超微结构特征,对肺癌细胞具有一定的诱导分化作用.     

蛙类的早期胚胎发育,特别着重于原肠背壁形成中的某些问题

观察了我国常见的四种蛙,即北方狭口蛙(Kaloula borealis),黑斑蛙(Rana nigromaculata),大蟾蜍(Bafo gagarizens)和多疣狭口蛙(Kaloula verrucosa)的早期胚胎的石蜡切片,主要结果如下:1.中胚层形成时,在胚体前端也首先成层,随之分散;2.原肠背壁细胞来源于背唇转入层,3.原肠背壁细胞在神经胚形成过程中,形成了短暂存在的原肠背褶和底索。     

烟草表皮细胞薄层培养中第一次无丝分裂时的核及核外微丝骨架变化的观察

通过Hoechst33258和TRITC－Phalloidin对烟草茎表皮薄层培养细胞的非固定染色观察，发现细胞无丝分裂过程中核及其外围微丝鞘发生了很大变化．染色质在分裂时形成卷曲拉裂状，此时核外微丝鞘完全消失．直至染色质分开后，两组染色质由伸张状态回缩时，微丝鞘才重新聚合排列，并最后形成两个子核的微丝鞘．     

人胎盘绒毛合胞体细胞凋亡的电镜观察

利用电镜观察人胎盘绒毛的合肥体时，发现妊娠早期已有代表退化现象的合肥体结形成，此时合胞体结的核染色质分布均匀，近核区的粗面内质风渠扩大，从妊娠中期开始合肥体 的核染色质出现凝缩及边集，近核区粗面内质网渠扩大明显，并可见合胞体结游离面断主绒毛间隙有浓缩细胞核和部分胞南，发现提示合胞体细胞的凋亡是从形成合胞体结开始，再经核染色质凝缩与边集及近核区粗面内质网渠的扩张，最后造成合胞体结游离面断裂及浓缩的核     

烟草薄层培养早期细胞核形态与核DNA含量变化的研究

通过应用ＤＮＡ专一性活体荧光染色剂Ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８对烟草茎表皮细胞薄层培养物的细胞核进行活体染色，发现在培养早期，细胞核发生了明显变化，由分化时的一般扁圆形和靠壁的位置逐渐变成圆形和居中的位置；核体积增大；染色质结构由致密变得疏松；而后染色质凝缩，发生无丝分裂；经数次分裂之后，细胞形态较一致，通过单细胞核内ＤＮＡ含量的测定，发现细胞分裂之前，核ＤＮＡ含量不增加；而最初几次分裂之后，含量减     

以沥青为原料制备油井高温防砂剂

以沥青中的稠环芳烃为原料的改性 COPNA树脂可用作高温防砂材料 ,该材料具有原材料易得、价廉 ,且在高温下 ( 4 0 0～ 5 0 0℃ )长期不分解 ,抗压强度高等特点 .根据 COPNA树脂的溶解性及热稳定性实验结果阐述了改性 COPNA树脂作为防砂剂的优点 ,并对以胜利 1 0 0号沥青为原料合成的改性 COPNA树脂的性能进行了试验研究     

水螅细胞层内营养分布动态的研究

以０．０１％中性红溶液标记杆吻虫喂水螅，观察了标记物在水螅细胞层内的分布动态。结果表明，中性红在内胚层细胞呈碱性反应。在外胚层细胞中呈酸以应。被标记的营养物在体轴方向以及在同一个体区的内，外胚层中的分布均不同。本实验与前人用中性红直接活体染色水螅出现的中性红裉色顺序不同。     

Intranuclear injection of anti-actin antibodies into Xenopus oocytes blocks chromosome condensation

The role of contractile proteins in the structural organisation of the interphase nucleus and of metaphase chromosomes is largely unknown. Actin has been found in interphase nuclei of different species, especially in association with condensed chromatin. In the germinal vesicle (nucleus) of Xenopus oocytes, actin has been localised in the nuclear gel supporting the chromosomes and the extrachromosomal nucleoli. It has been reported that the premeiotic lampbrush chromosomes in these germinal vesicles are positively stained for actin and tubulin by the immunoperoxidase technique. Moreover, the longitudinal contraction of these chromosomes is ATP dependent. Therefore it has been suggested that actin participates in the structural organisation of the highly specialised lampbrush chromosomes. However, actin is not a major component of the metaphase chromosome scaffold. The results reported here suggest that actin is involved in the condensation of Xenopus chromosomes.     

南方鲶仔稚鱼期齿发育的组织学和组织化学

南方鲶的颌齿均由外胚层及中胚层分化而成.口咽腔真皮细胞内凹入间充质形成齿蕾,并分化形成成齿质细胞和齿髓细胞.釉质来源于外胚层.齿质为粘多糖蛋白及钙离子的复合物,呈现PAS反应阳性,并有碱性磷酸酶的活性分布.仔鱼期和稚鱼期,处于同一发育阶段的齿存在着差异性.在每一成熟齿侧有一正在发育的替换齿.     

粗枝木麻黄(Casuarina glauca)小枝中缩合单宁提取条件的探讨

探讨了对粗枝木麻黄(Casuarinaglauca)小枝多酚(Polyphenols)和缩合单宁(Condensedtannins)的适合提取条件.为确保样品中的多酚和缩合单宁的含量不被低估,含有1.0%HCl的7:3的丙酮水提取液是合适的提取溶剂.它能抑制以共价键结合的蛋白质和纤维素结合态的缩合单宁在样品处理过程中形成和在此酸性条件下对形成的复合物有一定的溶解,能提取出最大量的可溶态的多酚和缩合单宁.同时通过3次以上的提取,样品颗粒大小对可溶性多酚和缩合单宁的影响不显著,但是在全部过100目筛的样品研磨处理下能最多地将结合态的缩合单宁转化为可溶态.     

东方杯叶吸虫精巢和精子发生的超微结构研究

本文应用透射电镜研究了东方杯叶吸虫精巢和精子的超微结构及精子发生过程,并与体外培养成虫进行比较,提出一种精子结构模式图.精子的形成经历了由精原细胞,初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞和精子的发育等过程.精子细胞形成后,胞质突起形成一分化区,并发育成精子鞘,核向鞘中旋转、浓缩和迁移,两根鞭毛轴丝由鞘中基体发出;鞭毛为9+“1”结构.体外培养成虫尚有几种不正常的成熟精子,可作为体外培养的评价指标.     

Effect of polychlorinated biphenyls on spermatogenesis and testosterone secretion in adult cocks

The effects ofpolychlorinated biphenyls (PCBs) on reproduction of adult cocks were studied by gavaging peanut oil or PCBs (Aroclor 1254, 50 mg/kg) once a week for six consecutive weeks. Physiological parameters were recorded and gonads were removed at the end of experiment for histological examination. The results showed that there was no significant difference between the control and treatment group in body weight, respiration rate, heart rate, body temperature, and the numbers of red and white blood cells. However, there was a marked decrease in the testicular weight and serum testosterone level after PCB treatment. Morphological studies manifested severe damage of the seminiferous tubules by PCB. The number of the germ cells at the different developmental stages was decreased and condensed nuclei were observed in most of these cells. This study revealed that the reproductive function of the adult cocks is sensitive to PCBs, which inhibited mainly spermatogenesis and testosterone secretion.