148例孕妇弓形虫感染分析

对１４８ 例孕妇（妊娠八周至妊娠七个月），运用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测静脉血弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍ ａ ｇｏｄｉｉ， ＴＯ）抗体；即Ｔｏｘ－ＩｇＧ抗体和Ｔｏｘ－ＩｇＭ抗体，发现近年来有猫犬接触史（指现在或曾经养过猫犬的）孕妇弓形虫感染率明显高于无猫犬接触史孕妇（Ｐ＜ ０．０５），两者有显著性差异。     

抗弓形虫IgY抗体在酶免疫试验中的应用

IgY是从鸡蛋黄中提取的免疫球蛋白,不但具有高免疫活性,而且不受类风湿因子、血清补体等干扰,在免疫学试验中具有优越性。用纯化的弓形虫虫体抗原免疫白菜杭鸡获得特异性的IgY抗体,用辣根过氧化物酶标记后与抗人IgM单抗配伍建立捕获法酶免疫试验,与同类试剂对照,平行检测192份临床血样,检测结果二者吻合,表明该IgY具有良好的特异性和敏感性。     

胭脂红酸ELISA检测试剂盒的制备及应用

为了快速高效检测肉类食品中胭脂红酸含量,制备了胭脂红酸ELISA检测试剂盒,检测了市售肉类样品中胭脂红酸含量,并通过高效液相色谱法进行了验证。结果显示试剂盒的检测限为1 ng/mL,线性范围7. 8～1 150 ng/mL,灵敏度IC50值为95. 2 ng/mL;该试剂盒中的检测抗体对胭脂红的交叉反应率为108. 7%,但与其他4种色素添加剂均未见交叉反应。检测市售肉类样品的批内回收率在79. 1%～103. 1%之间,批间回收率在81. 6%～98. 8%之间;批内、批间试验的相对标准偏差基本小于10%,且与HPLC方法具有良好的一致性(R2=0. 927),说明该试剂盒具有灵敏、准确、简便、快速的特点,为胭脂红酸免疫学快速检测方法的建立提供了技术基础。     

浅谈禽病ELISA操作技术

在疾病监控方面,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术是应用最为广泛的血清学检测技术,禽病ELISA抗体检测试剂已经大量应用到SPF鸡微生物学监测中。ELISA不仅操作技术上有一定的要求,而且影响因素也较多,如不注意有可能导致试验结果不准确。因此,将禽病检测过程中,ELISA操作各环节需注意的问题归纳总结,与各位同仁一起交流学习。     

基于猪链球菌2型烯醇化酶建立的筛查并监控细菌侵袭性感染的ELISA方法

目的探索猪链球菌2型(S.suis2)重组烯醇化酶(Enolase)蛋白的免疫学特性,建立调查S.suis2侵袭性感染的标记和方法,并用于人群及猪群中S.suis 2感染的监控和筛选有效的疫苗抗原。方法 PCR法检测enolase在各血清型菌株中的分布情况,免疫印记检测Enolase的免疫反应性,建立筛查S.suis 2感染的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。结果 PCR检测显示enolase在多种血清型中广泛存在,Western-blot表明重组Enolase蛋白具有较好的免疫反应性。基于Enolase建立的ELISA结果显示,感染S.suis 2的猪血清中Enolase抗体效价较高。结论基于Enolase建立的ELISA方法能有效地用于S.suis 2感染的筛查和监控。     

免疫学与生化方法检测C反应蛋白相关性分析

为比较酶联免疫双抗体夹心法与生化免疫比浊法在检测C反应蛋白方面的差异,并进行相关性分析,分别利用4个厂家酶免方法的超敏C反应蛋白试剂盒(HS-CRP)和1种生化方法的普通C反应蛋白(CRP)作为考核试剂盒,选择21例低中高值样本,采用双盲法与参比试剂盒做临床平行比对并进行相关性分析.结果表明,与参比产品相比,免疫学方法检测HS-CRP具有高度相关性,并且有较好的检测低限.得出免疫学与免疫比浊法试剂盒有较好的临床相关性,能较好的满足国际上心血管事件风险评估新标准规定的1 mg/L以下为低风险区的检测需要的结论.     

353例孕妇TORCH感染与不良流产的关系

目的:探讨TORCH感染与不良流产的关系。方法:对353例孕妇用酶联免疫吸附试验测RV-IgM,TOX-IgM,CMV-IgM,HSV-IgM。结果:353例中,RV-IgM阳性者18例,阳性率为5.10%,TOX-IgM阳性者9例,阳性率为2.55%,CMV-IgM阳性者7例,阳性率为1.98%,HSV-IgM阳性者5例,阳性率为1.42%。结论:不良流产与TORCH感染有关。     

桑树植原体含量的周年变化及其对寄主激素水平的影响

采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）检测植原体在桑树体内的分布及其相对含量的周年变化．结果显示,茎部植原体含量在生长季节逐渐升高,７月达到最大,冬季检测不到;叶部与茎部相似但植原体含量在８月达到最大;根部全年均含有植原体,含量较低．此外,用酶联免疫吸附分析（ＥＬＩＳＡ）对桑树内源激素检测的结果显示,病株中生长素、细胞分裂素（Ｚ＋ＺＲ,ＤＨＺ＋ＤＨＺＲ）及赤霉素（ＧＡ３,ＧＡ４）的含量都明显高于健株．表明桑树体内激素水平的变化与植原体有关     

猪肝脏中盐酸克伦特罗残留量的检测

从某农贸市场随机抽取30份猪肝脏，采用酶联免疫吸附法（ELISA）对猪肝脏中盐酸克伦特罗残留进行了检测，以1ng／g为标准划定阳性检出率，检测结果阳性检出率为6．7％，表明在该地区仍有超量使用盐酸克伦特罗的现象。ELISA法简便快速，适于在基层推广使用。     

弓形虫快速鉴定及国内实验动物感染调查

目的 建立弓形虫快速鉴定方法,进行国内实验动物感染调查,为国家标准的修订提供参考依据。方法 选择2012年12月至2016年12月期间全国60个不同厂家的12 394只实验动物（包括：猴290只、小型猪425只、犬579只、兔1 234只、地鼠372只、豚鼠1 363只、大鼠987只、小鼠7 144只）作为调查对象。采用ELISA方法检测动物血清中弓形虫抗体IgG和循环抗原CAg。利用PCR技术鉴定弓形虫p30基因。应用直接镜检实时动态显微视屏摄录技术识别弓形虫虫体。结果 用ELISA从12 394份动物血清中检出4份弓形虫抗体IgG阳性。在这4份抗体IgG阳性样本中都发现了弓形虫虫体和DNA。通过PCR扩增p30基因的分子特性证明了样本中弓形虫病原体的存在。通过直接镜检实时动态显微视屏摄录技术,在这些样本中发现了弓形虫速殖子。2012年12月至2016年12月期间,对12 394只实验动物调查结果显示,弓形虫感染率为0.03%（4/12 394）。结论 ELISA、PCR、直接镜检实时动态显微视屏摄录技术相结合可完成实验动物的弓形虫检验工作。国内实验动物中存在弓形虫感染。因此,建议设计合理的筛查程序用于防止动物传播的弓形虫病。有必要开发新的诊断工具,特别是快检技术用于这一重要人兽共患病的未来研究。     

IB-ELISA诊断试剂的研究

目的　为鸡群日常监测传染性支气管炎病毒 (IBV)抗体提供一个方便、特异、快速的检测方法。方法　利用 9日龄SPF鸡胚尿囊腔接种培养IBV ,以及鸡胚成纤维细胞传代培养IBV ,经纯化后 ,测定蛋白含量 ,作为包被抗原 ,利用过碘酸盐法标记兔抗鸡IgG作为酶结合物 ,用TMB作为显色剂 ,建立起酶联免疫吸附试验 (ELISA)技术 ,检测血清样品中传染性支气管炎抗体。结果　上述两种方法制备的抗原皆可用于此试验 ,与NDV、MDV、IBDV、AIV、APIV、REV、ILTV、IC、MG、MS等抗血清无交叉反应 ,与IDEXXIB ELISA比较 ,结果吻合较好。结论　本研究制备的IB ELISA诊断试剂 ,可用于日常监测传染性支气管炎病毒抗体     

自制和进口试剂盒在犬细小病毒检测中的应用

用本研究室研制的犬细小病毒单克隆抗体和多克隆抗体，采用夹心ＥＬＩＳＡ原理，研制成功犬细小病毒快速诊断试剂盒。对８７份犬粪便样品进行检测，并与ＨＡ法和美国ＩＤＥＸＸ公司研制的ＥＬＩＳＡ试剂盒进行比较。结果表明，与ＨＡ法相比，自制试剂盒的敏感性为９３．３％，特异性为１００％，总符合率为９５．４％；与美国试剂盒相比，自制试剂盒的敏感性为１００％，特异性为８４．６％，总符合率为９５．０％，达到国外同类产品     

大理地区精神病患者弓形虫感染情况调查

目的：了解大理地区精神病患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神疾病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验对219例精神病患者及91例健康体检者进行血清弓形虫IgG抗体检测。结果：精神病患者弓形虫抗体阳性率为31．96％,健康体检者为20．88％,两者之间差异显著（P〈0．05）。结论：本地区精神病患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群。临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况．对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测。     

ELISA对毒理实验动物血清中神经生长因子抗体动态的研究

用ＥＬＩＳＡ法对神经生长因子（ＮＧＦ）毒理实验动物犬和大鼠血清作了抗－ＮＧＦ抗体检测。结果表明在大鼠血清中没有发现抗－ＮＧＦ抗体,但犬血清中有相应的抗体产生,并随注射剂量增加和注射时间延长而逐渐升高,另外,对ＥＬＩＳＡ间接法和竞争抑制法进行了比较,结果表明,竞争抑制法明显优于间接法,而且是一种简便、特异的好方法。     

酶联免疫法测定水产品中己烯雌酚残留量

采用酶联免疫法测定水产品中残留己烯雌酚的含量,并采用液相色谱-质谱联用法验证阳性结果。实验结果表明,该方法对水产品中己烯雌酚的检出限为0.35 μg/kg,回收率达77%～91%,具有良好的灵敏度和准确度。     

Determination of Cd-MT in <Emphasis Type=Italic>Pteria penguin</Emphasis> with indirect non-competitive ELISA

Cadmium-metallothionein (Cd-MT) of Pteria penguin was used to immunize domestic rabbit in order to obtain polyclonal antibody against Cd-MT. Using the anti-Cd-MT antibody, a method of indirect non-competitive enzyme-linked immunosorbent assay (non-competitive ELISA) was established to detect shellfish Cd-MT. In this case, the minimum detectable concentration of P. penguin Cd-MT was (4.563±0.051) ng/mL. The linear range of detection was 9.75-2.0×104 ng/mL. Intra-assay relative standard deviation (RSD) was less than 11.6%, and inter-assay RSD less than 6.7%. The recovery rates ranged from 83.7% to 119.0%. The polyclonal antibody against Cd-MT of P. penguin can also be used to detect MT of other four types of shellfish. In the crude extracts from different organs of P. penguin, the MT concentrations determined by this method matched well with the concentrations of cadmium detected by the atomic absorption spectroscopy.     

实验动物弓形虫的检测

通过概述检测弓形虫的主要方法,推论了＂国标＂推荐两种血清学检测方法的主要选择依据,推荐了进一步深入检测且较可靠的免疫学方法。     

氯霉素残留胶体金免疫层析快速检测法的研制

建立一种快速、简易的检测样品中氯霉素残留含量的胶体金免疫层析法.将抗氯霉素单克隆抗体-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上,并将人工合成的氯霉素抗原包被在硝酸-醋酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线),其与待测样品中氯霉素竞争结合胶体金标记的氯霉素单克隆抗体,并能以颜色直观显示检测的结果.用GICA与ELISA试剂盒对比检测了...     

人胎肝金属硫蛋白的分离纯化及酶联免疫吸附检测

人胎肝经匀浆、离心、乙醇沉淀后,通过Sephadex G-75、DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析分离,获得金属硫蛋白的两种亚型(MT-1和MT-2)。经氨基酸组成分析证明是均一的。MT-1为抗原免疫青紫兰兔制备了抗血清,以纯化的IgG建立了人MT的酶联免疫吸附检测(ELISA)方法,并给出了标准工作曲线。