抗黄矮病小麦易位系cDNA文库的构建

对小麦-中间偃麦草易位系HW642一周龄幼苗接种饲黄矮病毒蚜虫,接种48 h后取幼叶提取mRNA构建了一个cDNA文库,文库的滴度为1.5×105pru/mL.随机挑取103个重组克隆,用限制内切酶EcoR I、Xho I消化,统计分析结果表明插入片段在150～4000 bp之间,平均插入片段大小为2000 bp左右,重组率为95.15 ％.文库可用于筛选抗病候选基因及EST研究等.     

用酵母双杂交筛选与AP-2α相互作用的因子

AP—2α是重要的转录因子家族AP—2α的成员之一，为了研究AP—2α在体内的转录调控方式及与其直接相互作用的蛋白因子，用AP—2α作为饵蛋白通过酵母双杂交系统筛选HeLa细胞的cDNA库，筛选得到的一个阳性克隆中，经鉴定含有人TESTIN基因cDNA片段自5876bp起始的完整3′端序列，将此TESTIN片段引入GST基因融合系统成功的进行了表达，得到大小约45kD的GST—TESTIN融合蛋白，用于多克隆抗体的制备，用Western—blot检测TES—TIN和AP—2α在HeLa细胞中的表达和定位，结果表明：TESTIN的表达主要在细胞质中，细胞核内也有少量表达；而AP—2α表达主要集中于细胞核内，它们的相互作用可能与AP—2α在细胞内分布及其调控基因转录的方式有关。     

四倍体鱼促性腺激素α亚基cDNA的克隆与序列分析

从四倍体鱼脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆了四倍体鱼GTH-α亚基4种不同的cD-NA,分别命名为GTH-α1、GTH-α2、GTH-α3和GTH-α4.其中,GTH-α1和GTH-α2的cDNA都由363个核苷酸组成,编码117个氨基酸;而GTH-α3和GTH-α4都由366个核苷酸组成,编码118个氨基酸.分析表明,四倍体鱼4种不同的GTH-α亚基之间的核苷酸和氨基酸的同源性非常高,均在96%以上;四倍体鱼和原始亲本红鲫和鲤鱼GTH-α亚基氨基酸序列之间的同源性也非常高,如四倍体鱼GTH-α1和原始母本红鲫GTH-α1氨基酸的同源性为99.2%,四倍体鱼GTH-α3和原始父本鲤鱼GTH-α1氨基酸的同源性达到了100%.     

鳜肌球蛋白轻链2基因cDNA的克隆及其发育表达分析

通过构建肌肉组织cDNA文库分离到鳜肌球蛋白轻链2基因(MLC2),基因登录号为FJ428249.MLC2基因cDNA序列全长1 206 bp,编码区长度为579 bp.MLC2基因开放阅读框编码170个氨基酸,具有EF-手相家族蛋白全部4个EF-手相结构.与已报道的其他动物MLC2相比较,所推导氨基酸序列同源性在66.3%～97.6%,其中与ca2+结合区域非常保守,7种鱼氨基酸序列同源性为100%.采用实时荧光定量PCR方法对鳜MLC2发育表达分析表明,MLC2在原肠期开始有低量表达,与原肠期相比,尾芽期、肌肉效应期和仔鱼阶段MLC2表达量随发育阶段渐进而升高.     

10种大肠杆菌对47种抗生素敏感性测试的研究

随着抗生素的广泛使用,细菌对药物的耐药性逐渐增强.了解细菌对药物的敏感程度,对微生态制剂的研究及临床用药具有指导作用;本实验结果表明多数菌对苯唑西林、克林霉素、青霉素G等出现不敏感;某些菌对链霉素、头孢拉啶、万古霉素、阿奇霉素等出现敏感性,但某些菌对其则出现耐药或轻度耐药;10种菌对阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦等均强的出现极高的敏感性.     

硝基芳烃化合物对大肠杆菌的毒性作用及QSAR分析

以大肠杆菌（Escherichia coli)为急性毒性测试生物,实测了12种苯的硝基芳烃衍生物对大肠杆菌的12hEC50,建立以大肠杆菌为毒性试验生物的实验方法。应用三种物理化学分子描述符进行QSAR分析,探讨毒性效应和作用机制。     

TNFAIP1与RIN3相互作用的鉴定

TNFAIPI是第一个被鉴定能受TNF-α(tumor necrosis factor-α)诱导的蛋白.TNFAIP1基因是一个多功能基因,参与DNA的复制和修复,细胞周期的调控,细胞信号通路转导的调节等.采用酵母双杂交的方法以TN-FAIP1为靶蛋白筛选得到与其相互作用蛋白RIN3.RIN3含有RIN家族多个多功能的结构域,根据RIN3结构域对其分段,研究与TNFAIPI的相互作用.通过免疫共沉淀,荧光共定位一系列细胞证明TNFAIP1蛋白能直接与RIN3相互作用,提示TNFMP1可能参与细胞的胞吞胞吐.     

一株大肠杆菌所产絮凝剂的特性研究

考察了一株大肠杆菌产生的絮凝剂的絮凝特性.研究表明,该菌产絮凝剂的活性成分主要存在于上清液中,且产絮凝剂的时间与菌生长相比,稍有些滞后.该絮凝剂絮凝高岭土悬浊液时,最适宜的pH范围为5.0~8.0,最佳的高岭土悬浊液浓度为2~4 g/L;不同的金属阳离子都有不同程度的助凝作用,且Ca2 更具优越性,其适宜浓度为0.2~0.5 g/L.与其他生物絮凝剂及常用絮凝剂相比,其絮凝效果及絮凝剂用量展现出较好的优势.     

LL-37/hCAP-18基因克隆及其真核表达载体的构建

LL-37 hCAP-18是一种重要的多功能免疫分子.为探讨hCAP-18在基因治疗中的可行性,应用RT-PCR技术从人白血病细胞系J6-1细胞总RNA中成功扩增出560bp的hCAP-18基因编码区cDNA序列,构建了hCAP-18重组表达质粒phCAP-18.采用脂质体法将质粒phCAP-18瞬时转染COS-7细胞,Westernblot证实,hCAP-18能在COS-7细胞中表达.     

窖水中主要无机离子对光催化灭除大肠杆菌(E.coli)的影响研究

采用自主开发的N-TiO_2作为光催化剂,在流动相光催化反应装置中,对窖水中所含Ca~(2+)、Cl~-、CO_3~(2-)、HCO_3~-、SO_4~(2-)等主要无机离子对光催化剂灭除E.coli的影响,以及复配模拟窖水和实际窖水对光催化灭除E.coli的影响进行了实验研究,并分析了其影响机理。实验结果表明:Ca~(2+)、HCO_3~-对光催化灭除E.coli有抑制作用,CO_3~(2-)对光催化灭除E.coli有明显的促进作用,而SO_4~(2-)、Cl~-对光催化灭除E.coli无影响。在对实际窖水进行光催化灭除E.coli菌落总数的实验中,经60min反应,窖水中菌落总数和总大肠菌群均为零,达到国家饮用水卫生标准,说明自主开发的NTiO_2光催化剂在农村窖水深度处理灭除E.coli效果好,可推广应用。     

基于K-means聚类分析与偏相关分析的高考质量评价体系构建与实施

阐述了高考成绩中多学科间K-means聚类分析和偏相关分析的高考成绩分析方法,构建基于数据挖掘技术的高考质量评价体系分析方法,并利用齐齐哈尔市高考考生成绩数据进行评价体系分析,为高考质量评价方法提供了一种新的尝试.     

松嫩平原不同生境土壤细菌数量的季节动态及与环境因子的相关分析

以松嫩平原羊草群落、虎尾草群落、碱蓬群落及光碱斑为研究对象，对土壤细菌数量和土壤理化因子的季节动态进行研究，结果表明：四个样地的细菌数量变化均呈单峰曲线，并在八月份达到最大值，八月后逐渐降低；从5月到10月，各样地的细菌数量由大到小的顺序均为：羊草群落〉虎尾草群落〉碱蓬群落〉光碱斑群落；土壤细菌数量与土壤含水量、土壤温度、土壤有机质、全氮、全磷、速氮之间均呈极显著正相关，而与ph值呈负相关，速磷与土壤细菌之间的相关性不明显．     

乌鸡法氏囊和大肠杆菌病混合感染的诊治

去年5月,某养殖户饲喂的300只乌鸡发生了一种以拉黄白色水样稀粪、打蔫、死亡为主要特征的疾病,发病率40%,死亡率15%,曾用氟哌酸、痢特灵、土霉素等治疗,效果不明显.     

半工半读教学管理质量评价模式的构建与实施

<正>工学结合、半工半读是当前我国深化教育改革,探索职业教育发展新路径、优化人才培养模式的一个重要途径。在我国当前大力推进职业教育的背景下,半工半读人才培养模式获得了长足的发展。但是,我们也必须注意到,在我国社会工业化发展和创新型国家建设过程中,社会对于人才的需求也日     

东北地方猪抑肌素基因表达载体的构建及其原核表达的研究

瘦肉率的提高是猪育种中重要的目标性状之一,其大小与骨骼肌的量密切相关.1997年由McPherror等发现的肌肉生长抑制素基因(myostatin,简写为MSTN)因其功能丧失后会导致小鼠骨骼肌的量极显著增加而引起广泛关注. 为进一步研究myostatin基因的本质功能,奠定猪遗传改良和分子育种基础,本研究以克隆在pGEM-3Z上的猪myostatin基因cDNA为研究对象,利用Oligo 5.0软件设计出两对上、下游特异性引物,并分别引入EcoRI和BamHI两酶切位点.扩增出与表达载体相匹配的全长与半长MSTN基因cDNA序列,构建融合表达载体,进而将构建好的表达载体转化到大肠杆菌BL-21中表达出全长与半长蛋白,实现了具有二硫键基因在大肠杆菌中的正确表达.     

抗蛔虫人源单链抗体库的构建及鉴定

目的:构建抗蛔虫人源单链抗体库,从中筛选建抗蛔虫人源特异性单链抗体.方法:分离10个患蛔虫病人的淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库.结果:初...     

构建具有优良荧光性能的生物功能化碳点的新方法

以乳糖和盐酸为原料,通过超声和细菌辅助反应直接获得新型的生物功能化碳点,并通过透射电子显微镜、傅立叶红外分光光度计以及激光共聚焦显微镜对构建出来的生物功能化碳点进行表征.结果显示:所得粒子表面富含羧基和羟基,这一性质使得生物功能化碳点具有很好的亲水性和生物活性.进一步的实验表明:生物功能化碳点与传统化学方法合成的荧光碳点相比,具有很高的光致发光性和光稳定性,且生物功能化碳点的发光区域在近红外和可见光区,这使其在生物活体成像和生物活体检测上具有非常广阔的应用前景.     

鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)促性腺激素β亚基的克隆、表达和序列分析

促性腺激素(Gonadotropin Hormone, GTH)是垂体合成和分泌的促进性腺发育成熟的一种重要的糖蛋白激素(Glycoprotein Hormones, GPHs).通过RT-PCR方法从鳙(Hypophthalmichthys nobilis)脑垂体中克隆出两种促性腺激素β亚基,分别是促黄体素亚基(Luteinizing Hormone, LH)和促滤泡激素亚基(Follicle-stimulating Hormone, FSH).鳙鱼FSHβ亚基全长645bp,开放阅读框396bp,编码131个氨基酸(GenBank序列登录号:EF552360);LHβ亚基全长559bp,开放阅读框444bp,编码147个氨基酸(GenBank序列登录号:EF565164).根据鳙鱼与草鱼等鱼类及其他脊椎动物FSHβ和LHβ亚基的氨基酸序列分析表明:在鱼类中LHβ亚基具有高度保守性,而FSHβ亚基分化更快.用β-actin内参法从鳙鱼的垂体、下丘脑、心脏、肝脏和性腺等不同的组织,提取总RNA,用RT-PCR技术分析得出鳙鱼FSHβ和LHβ基因仅在垂体中特异性表达.     

干燥环境下爆炸伤的细菌学变化分析

探讨了干燥环境下爆炸伤细菌定量变化及感染发生．采用三元品种猪制作干燥环境下的爆炸伤模型,对伤后4h、7h、9h、12h、16h、24h、48h进行创面观察、血中白细胞计数、细菌计数、细菌鉴定及药敏测定分析．其结果表明：爆炸伤后24h创面细菌数量可达（5．64＋0．20）×10^6／g组织,白细胞数可达（23．43＋3．93）×10^9／L,创面组织出现炎症症状,清创后每克组织细菌数量增加速度减慢．爆炸伤创面细菌种类多,细菌对青霉素、四环素、红霉素及复方新诺明表现耐药性,对三代头孢菌类和喹诺酮类药物敏感．干燥环境下爆炸伤的清创时间可适当延长,可在伤后16h内进行清创．