谷胱甘肽硫转移酶在东亚飞蝗两个种群mRNA的表达研究

为研究东亚飞蝗谷胱甘肽硫转移酶基因(GSTs)表达与代谢能力的相关性,应用实时荧光定量PCR技术,对东亚飞蝗沧州和天津种群9个谷胱甘肽硫转移酶基因的mRNA表达情况进行了研究.结果表明:9个GSTs基因在东亚飞蝗不同发育阶段具有表达差异,基因LmGST1、LmGST3、LmGST5、LmGST7和LmGST8随着蝗虫的生长发育表达量增高,这些基因可能影响虫体对有毒化学物质的敏感性.沧州种群GSTs的表达水平高于天津种群,据此推测沧州种群个体对有机磷农药的代谢解毒能力强,对杀虫剂的敏感性低.     

多种形式酯酶总活力的混合底物分光光度测定法

在醋酸－α－萘酯测定酯酶总活力方法的基础上，增加醋酸－β－萘酯，两种底物以２：１混合，以聚乙烯吡咯啉酮为底物乳液的稳定剂，研究了稳定剂用量及底物，产物的稀释稳定性条件，建立了一种用混合底物测多种形式酯酶总活力的新方法。     

不同染色剂对荔枝胚性愈伤组织酯酶同工酶显色的影响

以α-萘酯醋酸(α-NA)和β-萘酯醋酸(β-NA)为废物,以坚牢兰B盐和坚牢兰RR盐为偶联剂,用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳技术研究了荔枝离体培养物的电泳显色。结果为:少数酶带只能用α-NA显色;绝大多数酶带可用α-NA或β-NA显色;用混合底物同时显色,较一些单独用α-NA或β-NA能显色的酶带的相对染色强度降低;用坚牢兰B盐与坚牢兰RR盐为偶联剂相比,某些酶带的相对染色强度增加。表明,各电泳酶带染色强度的相对强弱不一定反应各酶本身活性的相对高低。     

东亚飞蝗不同龄期解毒酶和靶标酶活性研究

对东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis(Meyen))各龄期酯酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肤 S-转移酶活性进行了比较研究,同时对酯酶进行了非变性聚丙烯酰胺凝胶检测.酯酶活性测定结果表明,不同龄期酯酶的比活力不同,五龄若虫最高,一龄若虫最低.酯酶非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果发现,各龄期酯酶同工酶酶谱主带比较一致,在谱带上存在有细微的差异;乙酰胆碱酯酶的比活力二龄若虫最高,四龄若虫最低;一龄若虫谷胱甘肽S-转移酶的比活力最高,三龄若虫最低.据此推测,东亚飞蝗不同龄期解毒酶和靶标酶的活性差异可能是由于各龄期生长发育代谢机能的不同所致.     

寄主植物对中华稻蝗四龄若虫酯酶活性的影响

分别以α-NA、α-NB为底物测定了经狗尾草、水稻、小麦三种不同寄主植物饲喂1 d、3 d和5 d后中华稻蝗四龄若虫雌、雄虫的酯酶比活力.结果表明,不同寄主植物对中华稻蝗四龄若虫的酯酶有诱导作用,且水稻组酯酶比活性显著高于狗尾草组和小麦组.以α-NA为底物测定酯酶活性,喂食1d后,水稻组雌、雄虫酯酶比活力分别是狗尾草组、小麦组的1.35、2.00倍和1.44、1.63倍.喂食3 d后,水稻组雌、雄虫酯酶比活力分别是狗尾草组、小麦组的1.40、1.67倍和1.62、1.43倍.喂食5 d后,雌虫酯酶比活力水稻组分别是狗尾草组、小麦组的1.63、2.00倍,雄虫酯酶比活力水稻组分别是狗尾草组、小麦组的2.00、1.71倍.上述结果可能与不同寄主植物所含的次生代谢物质对酯酶的诱导作用有关,且在三种寄主植物中水稻的诱导作用最强.饲喂同一寄主植物1 d、3 d 和5 d后,害虫体内酯酶比活性没有显著性差异,但总体趋势是饲喂1d后的酯酶比活性稍高于饲喂3 d和5 d后的,这可能是害虫在饥饿后进食的应激反应所造成的.研究结果还表明不同寄主植物诱导后中华稻蝗体内酯酶对不同底物的水解能力有所差异.     

山西临猗东亚飞蝗普通酯酶生化特性研究

对山西临猗地区东亚飞蝗雌雄共64个个体的酯酶动力学特征及体外抑制进行比较研究．结果表明：雌雄个体的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱不存在明显差异，蛋白含量雌性个体为雄性个体的1．04倍。但是以α—NA,β-NA和α-NB为底物,雌性个体的酯酶活性分别是雄性个体的1．40，1.30和1．39倍．体外抑制表明，雌雄个体的B型酯酶含量分别为78．81％和59．70％．     

高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇代谢酶的影响

为了解高效氯氟氰菊酯亚致死浓度对番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)代谢酶的影响,采用药膜法测定了高效氯氟氰菊酯对番石榴实蝇不同种群的毒力及代谢酶活性.结果表明:经药剂选育15代后,种群抗性倍数为11.50,达到中等抗性.在LC10,LC25和LC50处理下,敏感种群的羧酸酯酶(CarE)和谷胱甘肽S-转移酶(GST)显著提升(p0.05),而抗性种群的CarE和GST无统计学意义.不同种群的过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性无统计学意义.表明CarE和GST活性的提升与敏感种群的抗性发展有关.     

猪毛蒿精油对玉米象体内4种解毒酶活力的抑制

植物精油是一种最具潜力的储粮防护剂,对储粮害虫具有多种生物活性并能影响害虫体内酶活力的变化.采用5种质量分数的猪毛蒿精油(1%,5%,10%,15%,20%)分别处理玉米象2,4,8,12,24h后,测试了玉米象体内4种解毒酶活力的变化情况.结果表明,经猪毛蒿精油触杀后,玉米象体内4种解毒酶的活力发生了变化.酸性磷酸酯酶(ACP)、碱性磷酸酯酶(ALP)和α-乙酸萘酯酶(α-NACarE)活力受到抑制.在低质量分数处理条件下(第Ⅱ至第Ⅳ处理组),谷胱甘肽-S-转移酶被诱导,活性升高;在高质量分数时(第Ⅴ、第Ⅵ处理组),酶的活性受到抑制.本研究的结果为阐明猪毛蒿精油的杀虫机理提供了参考.     

α-苯乙醇的酶法拆分工艺优化

使用一种重组脂肪酶对乙酸苯乙酯进行选择性水解拆分以得到R-α-苯乙醇.研究首先以选择性和转化率为指标,测定了底物浓度、酶量、缓冲液的浓度和pH、反应温度、摇床转速以及反应时间等因素对拆分效果的影响.结果显示,在最佳条件下,产物R-α-苯乙醇ee达到97.2%,转化率48%.反应液进行过硅胶柱分离后,R-α-苯乙醇的产率为30%,ee值为98%;S-乙酸苯乙酯在碱性条件下水解得到S-α-苯乙醇产率为40%,ee值为85%.     

2种拟青霉代谢产物对烟蚜乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶的影响

 以粉拟青霉菌的sw03032菌株和玫烟色拟青霉菌的sw03085为研究对象,比较其代谢产物的杀蚜虫活性和对烟蚜乙酰胆碱脂酶和羧酸酯酶活性的影响.结果表明2种真菌发酵液含有能毒杀蚜虫的毒素物质.且毒素粗提物浓度越大,杀蚜活性越强.经玫烟色拟青霉菌不同浓度毒素粗提液处理的蚜虫乙酰胆碱酯酶比活力分别比对照(CK2)降低了70.4%～29.8%.不同浓度玫烟色拟青霉菌毒素粗提液处理12h后,蚜虫羧酸酯酶比活力分别比对照(CK2)降低79.5%～44.4%.用不同浓度粉拟青霉菌毒素粗提液处理烟蚜12h后,乙酰胆碱酯酶和酸酸酯酶活性分别降低了38%～18.6%和51.6%～59.5%.玫烟色拟青霉菌的sw03085菌株代谢产物对烟蚜的伤害活性明显较粉拟青霉菌sw03032菌株代谢产物高.     

表面活性剂对α-糜蛋白酶催化水解动力学的影响

在对酶-表面活性剂超活性和反胶束酶反应器的研究中,表面活性剂对酶催化动力学的影响是定量研究酶活性的关键之一.以α-糜蛋白酶作为模型酶,研究了阳离子表面活性剂GN10存在下对醋酸二萘酯的催化水解.由于表面活性剂与酶的弱相互作用,使酶催化动力学发生改变.对酶水解的初始速率进行了讨论,为酶-表面活性剂体系的酶活性研究提供了定量测量的实验方法和理论依据.     

针毛鳞盖蕨不同溶剂萃取物抗氧化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

以针毛鳞盖蕨为研究对象,用体积分数95%乙醇提取后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3种有机溶剂萃取得各萃取物,分别测定其多酚含量,通过DPPH·和ABTS~+·清除法及PNPG法评价针毛鳞盖蕨乙醇粗提物及不同溶剂萃取物的体外抗氧化活性及降血糖活性.实验结果表明,在各萃取物中,乙酸乙酯萃取物的多酚含量最高(34.8%);针毛鳞盖蕨乙醇粗提物及各萃取物均具有一定的抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性.其中,乙酸乙酯萃取物具有显著的DPPH·清除能力、ABTS~+·清除能力及α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,且其α-葡萄糖苷酶抑制活性IC_(50)=(5.3±0.8)μg/mL高于阳性对照阿卡波糖IC_(50)=(103.7±5.1)μg/mL.     

以氯离子为例的北大港水库水质调控技术

针对南水北调配套水库——北大港水库水质咸化问题,采用数值模拟方法,应用EFDC三维水动力水质模型形成水库水质模拟技术,调控水库运行方式,提高水库蓄水利用率.以氯离子为模拟指标,通过实测数据与模拟结果比较分析,验证了模型的可靠性.将北大港水库分为主库区和辅库区两部分,利用该模拟技术调控水库运行方式,对水库3种典型蓄供水方案进行水质模拟研究,探讨底泥氯离子释放对水质的影响,指出主辅库联合调度为较优的调控方案.该套水库水质模拟技术可推广应用于其他南水北调配套水库.     

产CGTase菌种的分离筛选及酶学性质的研究

本文重点报道了产ＣＧＴａｓｅ的ＮｏＦＬ＿（１６８）菌株的分离筛选、生理特性及ＮｏＦＬ＿（１６８）ＣＧＴａｓｅ的酶学特性（ｐＮ、温度）对酶活性及稳定性的影响。ＮｏＦＬ＿（１６８）菌株是从沧州等地的土样中筛选出来的，该菌株嗜碱性强，产酶活力较高。     

基于层次分析法的京津冀地区水资源承载能力评价

京津冀地区位于华北平原环渤海的核心地带。近年来,京津冀地区经济快速发展,成为华北经济规模最大、最具经济活力的地区,而水资源的短缺却成为制约该地区经济社会发展的重要因素。采用层次分析法(analytic hierarchy process,AHP),通过指标体系的构建,对京津冀地区的水资源承载能力进行评价和分析。综合研究评价表明,京津冀地区的北京市、天津市、唐山市、沧州市、石家庄市和邯郸市属于严重过载级别;廊坊市、衡水市、邢台市属于过载级别;保定市、张家口市属于临界级别;只有承德市和秦皇岛市水资源承载能力较好,所以综合分析认为,京津冀地区水资源承载能力压力过大,整个地区水资源过载比例接近70%,水资源严重短缺,严重阻碍和制约了京津冀地区经济的可持续发展,形势堪忧。化学需氧量排放、工业用水总量、生活用水总量、农业用水总量、常住人口、城市人口密度、耕地面积、城镇化率被确认为造成京津冀地区水资源承载压力过大的重要指标。只有发展节水战略,提高水资源可持续利用水平,才能促进京津冀地区经济可持续发展。     

马拉硫磷对秀丽隐杆线虫的急性毒性研究

研究了马拉硫磷对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)形态、行为和生理生化等方面的影响,发现马拉硫磷可以导致线虫体型、繁殖能力、衰老、趋化性以及一些代谢酶类变化,但对线虫的寿命、运动能力和靶标酶并未产生显著影响.表明秀丽隐杆线虫对马拉硫磷有较强的耐受性,体内可能存在对马拉硫磷高效的代谢途径.     

Tissue-specific expression of glutathione S-transferases induced by 2-tridecanone or quercetin in cotton bollworms, Helicoverpa armigera (Hübner)

The tissue-specific expression of glutathione S-transferases (GSTs) in the cotton bollworm and the expression level induced by 2-tridecanone and quercetin were examined using the methods of biochemistry and the quantitative PCR. The relative expression level of GST mRNA was unanimous with the GSTs activity conjugaging with 1-chloro-2, 4-dimitro-benzene (CDNB) in fat bodies,midguts, heads and integuments of cotton bollworms. The GSTs activity in fat bodies was the highest, then midguts, heads and integuments in turn, which was in consistent with the relative expression level of GST mRNA. The specific activity of GSTs and the relative expression level of GST mRNA could be significantly induced by 2-tridecanone and quercetin, and after the induction the order of the GSTs activity and the relative expression level of GST mRNA in the above four tissues in cotton bollworms was not different from the control.The induction of GSTs by 2-tridecanone was stronger than by quercetin in all four tissues, which was in accordance with the relative expression level of GST mRNA. It suggested that the increase of GSTs activity induced by plant allelochemicals was associated with the elevated expression of GST mRNA in cotton bollworms.     

飞蝗五个自然种群的遗传分化研究

采用随机扩增多态性DNA（RAPD）技术检测飞蝗Locusta migratoria（Linnaeus）2个亚种5个种群的遗传多样性，11个随机引物扩增共产生了163条带，其中多态性片段为156条．Shannon信息指数和Nei’S指数对RAPD数据的分析表明：东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis（Meyen）不同种群存在较高的遗传多样性；同时，东亚飞蝗种群间出现一定程度的遗传分化，遗传分化系数分别为36．09％和33．85％．用UPGMA对Nei’S遗传距离作聚类分析，结果表明：东亚飞蝗不同种群的亲缘关系较近，而它们与亚洲飞蝗Locusta migratoria migratoria（Linnaeus）关系较远．由Nei’S遗传一致度和遗传距离可以看出，东亚飞蝗不同种群间的遗传距离均小于东亚飞蝗与亚洲飞蝗之间的遗传距离．由Mantel软件检验得出地理距离和遗传距离的相关性系数r〈0．7，表明这5个种群亲缘关系的远近与地理距离无相关性．同时，还结合等位酶种群遗传结构研究结果综合分析了上述东亚飞蝗4种群的遗传多样性及其分化，表明RAPD可检测出更高水平的遗传多样性．     

Tissue-specific expression of glutathione S-transferases induced by 2-tridecanone or quercetin in cotton bollworms, Helicoverpa armigera (Hübner)

The tissue-specific expression of glutathione S-transferases (GSTs) in the cotton bollworm and the expression level induced by 2-tridecanone and quercetin were examined using the methods of biochemistry and the quantitative PCR. The relative expression level of GST mRNA was unanimous with the GSTs activity conjugaging with 1-chloro-2, 4-dimitro-benzene (CDNB) in fat bodies, midguts, heads and integuments of cotton bollworms. The GSTs activity in fat bodies was the highest, then midguts, heads and integuments in turn, which was in consistent with the relative expression level of GST mRNA. The specific activity of GSTs and the relative expression level of GST mRNA could be significantly induced by 2-tridecanone and quercetin, and after the induction the order of the GSTs activity and the relative expression level of GST mRNA in the above four tissues in cotton bollworms was not different from the control. The induction of GSTs by 2-tridecanone was stronger than by quercetin in all four tissues, which was in accordance with the relative expression level of GST mRNA. It suggested that the increase of GSTs activity induced by plant allelochemicals was associated with the elevated expression of GST mRNA in cotton bollworms.