尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体IA基因克隆与多态分析

采用touchdownPCR和RACE技术,获得了两条尼罗罗非鱼MHCIA基因3’端的新序列,其长度均为957bp,分别命名为orni—DAA$0101和orni—DAA 0102,其分别编码了两种新发现的等位基因亚型。两条新序列均包含666bp的CDS区和291bp的3’-UTR区,CDS区包含了部分多肽结合区、全部的IGC区以及跨膜区和胞质区同源性比对显示,cDNA序列分别在388bp和426bp处发生了碱基转换,而其编码的氨基酸序列在第130位点存在谷氨酸与赖氨酸的差异．首次发现相对保守的IGC区也存在变异．研究结果对于揭示尼罗罗非鱼MHCIA基因的多态性及其与高抗病性的相关性有重要价值。     

尼罗罗非鱼IgT重链的蛋白表达及表达分析

IgT（Immunoglobulin T）作为新型免疫球蛋白在粘膜免疫中具有重要作用. 文中根据尼罗罗非鱼IgT基因序列构建原核表达载体获得IgT重组蛋白,相对分子量约75 kDa,并制备出效价较高的小鼠抗罗非鱼IgT的多克隆抗体. 荧光定量PCR检测证明：健康尼罗罗非鱼中IgT在多种组织中都有表达,其中脾脏、皮肤、肠和鳃中表达量相对较高. 无乳链球菌感染后,皮肤和头肾中IgT mRNA的相对表达量分别在12 h和4 d显著上调. 免疫组化结果显示：IgT蛋白在头肾和皮肤中均有少量分布,在无乳链球菌刺激后,在皮肤中出现大量分布. 以上结果表明:IgT在尼罗罗非鱼皮肤粘膜免疫中具有重要作用.     

尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼性腺的RAPD分析

奥利亚罗非鱼（Ｔ．ａｕｒｅａ）和尼罗罗非鱼（Ｔ．ｎｉｌｏｔｉｃａ）属于鲈形目（Ｐｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ）鲡鱼科（Ｃｉｃｈｉｄａｅ）罗非鱼属（Ｔｉｌａｐｉａ）内的两种鱼类［１］,它们繁殖周期短,生长速度快,抗逆性能强,是热带和亚热带地区重要的淡水经济鱼种,在淡水养殖业中占有重要的地位．但是由于罗非鱼种类繁多,种间杂交容易发生,致使罗非鱼养殖群体之间,或者野生种群和养殖种群之间多有程度不同的混杂,因而出现诸如群体种系不纯,优良经济性状衰减退化（性成熟提早,生长缓慢,个体趋小）等不良后果,直接影响了养殖…     

尼罗罗非鱼雌性性腺关键LncRNA的鉴定和表达分析

生殖细胞的分化与发育是硬骨鱼类性别分化的重要环节,并受到遗传和环境2个因素的影响.为研究LncRNA在硬骨鱼类卵母细胞发育以及性别分化中的作用,课题组通过转录组测序获得了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)雌、雄性腺中呈现差异表达的LncRNA,并选取LncRNA(TCONS_02477925)开展研究.发现该LncRNA具有2个外显子,属于典型的基因间LncRNA(Intergenic LncRNA),转录本全长1 537 nt,基因组定位于19号连锁群(Linkage Group 19,LG19)上,并且该基因在卵巢的表达水平显著高于精巢.荧光原位杂交结果表明,该LncRNA主要表达在I和II时相的卵母细胞的细胞质中.转录组测序结果及生物信息学分析发现,qrsl1和rtn4ip1可能是该LncRNA的cis靶基因,并且2个靶基因在卵巢中表达丰度较高.因此,本研究表明该LncRNA在罗非鱼卵母细胞发育和性别分化中可能有重要的作用.     

稻田养尼罗罗非鱼

江西省水产科研所去年以宜春县水江公社为稻田养鱼的试点,划定了约140亩共168丘稻田为试验区,主要放养尼罗罗非鱼种,又塔配一部分水花鲤鱼及少数夏花草鱼,取得了平均亩产77斤,最高亩产194斤的成绩。稻田养鱼有许多好处,如能增产稻谷,养鱼不占水面,不投饵料,技术简单、成本少等。而在稻田养尼罗罗非鱼还有它的特殊     

尼罗罗非鱼的八大优点

我国淡水鱼产量,历来每亩一千斤左右.但去年(到9月底为止),上海嘉定县马陆公社机械化养鱼场创造了亩产尼罗罗非鱼三万斤的高纪录.有人要问,他们为什么能创造出这样好的成绩呢?除了科学管理等原因外,能获得高产,与尼罗罗非鱼的品种优良是分不开的.那么,尼罗罗非鱼"优"在哪里呢?根据国内几     

尼罗罗非鱼腺垂体的显微和超微结构研究

对尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)的腺垂体进行显微和超微结构研究.通过Heidenhain-Azen和PFA-AB-PAS-OG染色,比较腺垂体的腺细胞类型及在腺垂体前叶、间叶和过渡叶的分布.在电镜水平上对腺垂体七类内分泌细胞的超微结构和对前叶存在的一种非分泌细胞(星状细胞)作描述和讨论.结果表明,同属罗非鱼内分泌腺细胞在腺垂体的分布和染色特征是相一致的.     

唐古特白刺NtCBL1、NtCBL2基因克隆及表达分析

[目的]唐古特白刺(Nitraria tangutorum)是土壤荒漠化和盐碱化防治的先锋植物,对高盐和干旱有极强的适应能力,植物CBL基因作为钙离子感受器,在植物逆境应答及发育过程中具有重要功能.以盐生植物唐古特白刺为材料,开展唐古特白刺CBL基因克隆及表达分析,以深入了解唐古特白刺的抗逆分子机制.[方法]根据唐古特...     

吉富品系尼罗罗非鱼耐盐性研究

对吉富品系尼罗罗非鱼（简称吉富鱼）从淡水移入不同盐度咸水的平均 死亡时间（MST）和半数死亡时间（ST50）的研究结果表明,MST和ST50值随移入盐度（S）增高而减少,相关性非常显著,其关系式为：MST＝494．5／（S－17．0）（P＜0．01）,ST50－495．1／（S－17．1）（P＜0．01）。96h半致死盐度（MLS－96）随吉富鱼体重增是增大相关性也非常显著,其关系式为：MLS－96＝15．6W0．045（P＜0．01）。吉富鱼适宜在0－12的盐度下养殖,在24‰以上的盐度下不宜养。     

尼罗罗非鱼精子发生的超微结构研究

对尼罗罗非鱼精子发生的超微结构进行描述.罗非鱼精子发生的类型属于A型,其发生顺序经历早期精细胞期;轴丝发生;细胞核凝缩和旋转;线粒体的迁移等过程.本文并讨论硬骨鱼类精巢结构和精子发生的有关问题.     

尼罗罗非鱼对汞富集的研究

本文以尼罗罗非鱼（Ｔ·ｎｉｌｏｔｃａＬ）为材料，应用冷原子吸收测汞法，进行了汞（Ｈｇ＋＋）在鱼体内的积累的实验性研究；还对鱼体不同部位汞的蓄积量作了比较；此外，对鱼体汞中毒的死亡过程作了观察。     

尼罗罗非鱼RAPD标记及其遗传多样性分析

采用 4 18个引物对尼罗罗非鱼进行了RAPD分析 ,筛选出 4 6个重复性好、可用于尼罗罗非鱼RAPD标记的引物 .另用 12个引物对尼罗罗非鱼群体 (2 3尾 )进行了遗传多样性分析 :共检出 5 8个位点 ,其中 18个位点表现出多态性 ,多态位点比例达 31.0 3% ,其群体的Nei&Li氏遗传相似率为 90 .2 3% ,申农信息指数为0 .10 0 5bit.上述三项指标表明 ,该尼罗罗非鱼群体保持着较高水平的遗传变异 .     

浅论温流水培育尼罗罗非鱼鱼苗技术

利用太原第一热电厂余热水资源，采用水泥地对尼罗罗非鱼进行了产卵、孵化、育种，并产生了可观的经济效益和社会效益，对今后开发工厂化育苗基地进行渔业养殖将起到重要作用。     

尼罗罗非鱼Hepcidin基因结构与序列分析

Hepcidins是一类具有调节铁代谢功能的抗菌肽.利用RT-PCR、RACE和LA等技术,以尼罗罗非鱼[Oreochro-mis niloticus(Linnaens)]肝脏中分离和克隆到Hepcidin基因.其全长cDNA为505 bp(不包括polyA),5′端非翻译区有85 bp,3′非编码区为156 bp,阅读框为264 bp.其编码的氨基酸包括信号肽和前体肽等,前体肽进一步酶解产生22个氨基酸的活性肽,该活性肽具有Hepcidin基因家族特有8个半胱氨酸的保守序列.罗非鱼的Hepcidin基因结构包含3个外显子和2个内含子.本研究为今后阐明Hepcidin基因表达特性、表达产物理化性质、抗菌活性及其相关功能等奠定基础.     

尼罗罗非鱼选育家系的遗传多样性研究

近年来,微卫星标记技术因其引物通用性强、检测快速、多态信息含量高等优点发展并成为各种物种基因组作图的首选标记。本文利用11个微卫星标记分析14个尼罗罗非鱼家系的遗传多样性,研究尼罗罗非鱼群体的遗传多样性和家系间的遗传关系。结果表明,11个微卫星位点扩增产物具有多态性,每个位点平均等位基因数为8.36;14个尼罗罗非鱼家系的平均多态信息含量、平均杂合度、平均有效等位基因数分别为0.499 3、0.558 3、2.608 0,表现为较高的遗传多态性。对14个尼罗罗非鱼家系间的遗传距离分析发现,家系NT207与NT213遗传距离最小,为0.204 4;家系NT208与NT210遗传距离最大,为0.760 9。14个尼罗罗非鱼家系间的平均遗传相似性指数为0.649 6,平均遗传距离为0.440 2。UPGMA系统树分析结果表明,家系NT215、NT218、NT210与NT211构成一个分支;家系NT214、NT203、NT206、NT207、NT213、NT217、NT209与NT216构成另一个分支;而家系NT208、NT201与其他家系的遗传距离则较远,分别构成独立的分支。     

尼罗罗非鱼主要组织相容性复合体Ⅱβ(MHCⅡβ)基因的克隆、表达和多态性

MHCⅡβ基因在鱼类免疫反应中起重要作用。采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)技术,克隆了尼罗罗非鱼的MHCⅡβ基因。MHCⅡβ基因含有5个外显子和4个内含子,其c DNA全长为1 142 bp,开放读码框为750 bp,编码249个氨基酸。通过同源性分析和进化树分析发现,与其他硬骨鱼类和哺乳类的相似性在30.6%~78.6%,和鲈形目的鱼类同源性最高。从25尾罗非鱼的50个开放读码框的阳性克隆中共获得10条不同的核苷酸序列,分别编码不同的氨基酸。氨基酸序列比对分析发现,多态性位点主要集中在MHCⅡβ基因的第2外显子上。通过对海豚链球菌感染后易感个体和抗病个体的PCR-SSCP电泳分析,发现电泳条带出现2~12条不同的单带,测序结果表明个体存在1~6个等位基因,暗示至少存在3个MHCⅡβ基因座。q PCR检测表明,MHCⅡβ基因在鳃、心脏、脾脏等组织高度表达,在肾脏、肌肉、脑等组织中中度表达,而在皮肤、肠、肝脏等组织中表达最弱。在攻毒后的头肾组织中,MHCⅡβ基因的表达量呈现下降-上升-下降的变化趋势,表明MHCⅡβ参与了罗非鱼的免疫反应。     

大肠杆菌RsmH基因克隆及表达

以大肠杆菌全基因组DNA为模版,PCR扩增目的基因rsmh,构建pMD18-T-RsmH重组克隆载体和pET-28aRsmH重组表达载体,转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导表达RsmH蛋白,利用重组His-tag,通过Ni-NTA亲和层析对RsmH蛋白进行纯化。SDS-PAGE对RsmH蛋白进行定性分析,考马斯亮蓝法测定RsmH蛋白含量,确认获得质量浓度为3.91 g/L纯化的rsmh表达蛋白。     

TePPO基因克隆及表达分析

万寿菊(Tagetes erecta L.)作为一种兼具观赏和经济价值的优质植物资源,在世界范围内广泛种植.文章依据万寿菊转录组数据,通过RNA提取、反转录克隆了万寿菊原卟啉原氧化酶(Tagetes erecta protopor-phyrinogen oxidase,TePPO)基因.PPO作为催化叶绿素合成的关键酶...